■楊仕群趙延斌陽 剛舒 剛*
(1.宜賓職業(yè)技術(shù)學(xué)院,四川宜賓 644003;2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,四川成都 611130)
藍孔雀為半草性非保護動物,集食用、觀賞、保健為一體,可以商品化飼養(yǎng),具開發(fā)價值。藍孔雀肉的蛋白質(zhì)含量為28%,脂肪約為1%,富含十幾種氨基酸及多種維生素[1]。藍孔雀國內(nèi)的養(yǎng)殖企業(yè)不多,全國僅有少數(shù)幾個省、市引種,養(yǎng)殖存欄不足8萬只,不能滿足市場需求,開發(fā)前景廣闊。藍孔雀養(yǎng)殖存在著飼料轉(zhuǎn)化率低、免疫能力低,幼雛成活率低等方面的問題。
竹葉黃酮為竹葉提取物的主要活性成分,是一種天然抗氧化劑,具有類似超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過氧化物酶的作用。竹葉中黃酮類化合物含量豐富,平均含量在2%左右。而據(jù)研究發(fā)現(xiàn),黃酮類化合物能增強動物機體的非特異免疫功能和體液免疫功能,可以通過影響巨噬細胞、T淋巴細胞、B淋巴細胞、自然殺傷細胞(NK)、LAK細胞、細胞因子以及胸腺來進行免疫調(diào)節(jié)。竹葉黃酮屬于黃酮類化合物,也具有免疫調(diào)節(jié)作用并被證實。黃芩中的化學(xué)成分主要為黃酮類成分,從黃芩中獲得黃酮和黃酮醇類化合物四十多種,黃酮類成分是其發(fā)揮藥理活性的基礎(chǔ),其中黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷和漢黃芩素是最主要的活性成分。
竹葉黃酮和黃芩苷作為植物提取物都具有清除自由基、增強機體免疫力、抗氧化、抗菌、抗癌等作用[2-3]。我國對竹葉黃酮和黃芩苷的藥理作用的研究雖然很多,但是在對孔雀生長性能的應(yīng)用研究鮮見報道。本試驗擬選擇藍孔雀幼雛為試驗動物,旨在觀察竹葉黃酮和黃芩苷對其生長性能和血清生化指標的影響,其結(jié)果可為竹葉黃酮和黃芩苷在藍孔雀養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究提供依據(jù)。
1.1.1 試驗動物
1日齡雌性藍孔雀幼雛45只(由邛崍孔雀園提供)。
1.1.2 藥物配方
含量為85%竹葉黃酮(由西安四季生物科技有限公司提供,生產(chǎn)批號20150221);含量為85%黃芩苷(由北京生泰爾生物科技有限公司提供,生產(chǎn)批號20150221)。
1.1.3 藥品及試劑
總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)生化試劑盒均由南京建成生物公司提供。
1.1.4 主要試驗儀器
Thermo706超低溫冰箱、SAF-680T酶標儀、T200電子天平、DT5離心機、動物飼養(yǎng)設(shè)備。
1.2.1 試驗動物分組與處理
將45只一日齡雌性藍孔雀,隨機分為3組,每組設(shè)3個重復(fù),每個重復(fù)5只。第1組飼喂添加0.5%竹葉黃酮的基礎(chǔ)日糧,第2組飼喂添加0.5%黃芩苷的基礎(chǔ)日糧,第3組飼喂基礎(chǔ)日糧作為空白對照組。本試驗的孔雀在相同環(huán)境的舍籠中飼養(yǎng),自由采食和飲水,舍內(nèi)溫度、濕度與光照等按照常規(guī)飼養(yǎng)管理要求進行,在整個試驗期進行常規(guī)的防疫和衛(wèi)生消毒,試驗期28 d。
1.2.2 日糧
采用玉米-豆粕型粉狀基礎(chǔ)日糧,由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)育禽場提供?;A(chǔ)日糧的組成和營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平
1.2.3 檢測指標與方法
1.2.3.1 體重及采食量的測定
試驗期第1、7、14、21、28 d早晨用電子天秤空腹稱量全體孔雀幼雛的體重,稱重前空腹8 h,同時每天記錄余料量。計算各重復(fù)試驗孔雀幼雛的平均日增重、平均日采食量和料重比。
1.2.3.2 血樣的采集
試驗期第14、28 d清晨喂料前,對全體試驗孔雀幼雛進行采集翅下靜脈血液,每只孔雀5 ml,分裝于干凈采血管中,立即放入37℃恒溫箱中,斜放靜置2 h,離心(4 000 r/min)15 min,分離出血清于-20℃保存待測。
1.2.3.3 血清生化指標
總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)按試劑盒說明操作。
1.2.3.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析
用Excel 2003初步整理試驗數(shù)據(jù)后,統(tǒng)計分析采用SPSS 19.0進行單因素方差分析,試驗結(jié)果用“平均值±標準差”表示,多重比較采用Duncan's法,以P<0.05作為差異顯著性判斷標準。
表2 藥物對藍孔雀幼雛體重的影響(g)
由表2可知,第1 d對照組與竹葉黃酮組和黃芩苷組無顯著性差異(P>0.05);第7、14、21、28 d竹葉黃酮組和黃芩苷組體重顯著高于于對照組(P<0.05)。
表3 藥物對藍孔雀幼雛日增重的影響(g)
由表3可知,1~2周竹葉黃酮組和黃芩苷組日增重與對照組無顯著性差異(P>0.05);3~4周竹葉黃酮組和黃芩苷組顯著高于對照組(P<0.05);整個試驗期1~4周平均日增重竹葉黃酮組和黃芩苷組顯著高于對照組(P<0.05)。
表4 藥物對藍孔雀幼雛日采食量的影響(g)
由表4可知,1~2周竹葉黃酮組和黃芩苷組的采食量顯著高于對照組(P<0.05);3~4周竹葉黃酮組和黃芩苷組顯著高于對照組(P<0.05);1~4周竹葉黃酮組和黃芩苷組顯著高于對照組(P<0.05)。
表5 藥物對藍孔雀幼雛料重比的影響
由表5可知,1~2周竹葉黃酮組與黃芩苷組藍孔雀幼雛料重比顯著低于對照組(P<0.05);3~4周竹葉黃酮組和黃芩苷組藍孔雀幼雛料重比顯著低于對照組(P<0.05);1~4周竹葉黃酮組與黃芩苷組藍孔雀幼雛料重比顯著低于對照組(P<0.05)。
表6 藥物對藍孔雀幼雛血清抗氧化生化指標的影響(U/ml)
由表6可知,2周時,竹葉黃酮組和黃芩苷組總抗氧化能力略高于對照組(P>0.05);竹葉黃酮組的超氧化物歧化酶指數(shù)顯著高于對照組(P<0.05),黃芩苷組顯著高于竹葉黃酮組和對照組(P<0.05);竹葉黃酮組和黃芩苷組過氧化氫酶指數(shù)略高于對照組(P>0.05)。4周時,竹葉黃酮組和黃芩苷組總抗氧化能力顯著高于對照組(P<0.05);竹葉黃酮組的超氧化物歧化酶活性顯著高于對照組(P<0.05),黃芩苷組顯著高于竹葉黃酮組和對照組(P<0.05);竹葉黃酮組和黃芩苷組的過氧化氫酶活性顯著高于對照組(P<0.05)。
竹葉黃酮具有清除自由基、增強機體免疫力、調(diào)節(jié)血脂、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗衰老、抗癌和保護肝臟等功效[4];竹葉黃酮的特性符合人們對天然抗氧化劑的追求,已被用作多功能食品和綠色飼料添加劑、膳食補足劑[5],竹葉黃酮在提取工藝及抗氧化組分等有效成分方面的研究較多,小動物研究主要集中在抗輻射、抗氧化、抗衰老、抗疲勞、增強免疫力功能[2],以及對心、腦血管藥理活性和肝損傷的保護作用,腸道的吸收動力學(xué)[6]等。黃芩苷具有廣譜抗菌、抗炎、抗細菌生物膜、清除氧自由基及抗氧化、抗腫瘤、抗病毒等作用[7]。動物生長性能的體現(xiàn)在日增重、飼料轉(zhuǎn)化率等方面[8]。用竹葉黃酮和黃芩苷飼喂藍孔雀幼雛后,在一定程度上促進了藍孔雀的消化吸收能力,提高飼料轉(zhuǎn)化率,從而提高了孔雀的生長性能。
血清生化指標中抗氧化能力、超氧化物歧化酶和過氧化氫酶是評價禽類最主要的抗氧化能力指標。超氧化物歧化酶為自由基清除劑,是有效的抗衰老制劑,是一種廣泛存在于動植物、微生物中的金屬酶,含有銅和鋅兩種離子,需氧[9]。SOD能清除具有毒性而損壞細胞的超氧陰離子自由基(致衰老物質(zhì))[10],提高免疫力,使機體免受炎癥、腫瘤的侵犯,而延緩機體的衰老[11];能催化生物體內(nèi)超氧自由基(·O2-)發(fā)生歧化反應(yīng),從而清除·O2-,在生物體的自我保護系統(tǒng)中起著極為重要的作用,是機體內(nèi)·O2-的天然消除劑[12]。在免疫系統(tǒng)中也有極為重要的作用。過氧化氫酶是一種酶類清除劑,又稱為觸酶,是以鐵卟啉為輔基的結(jié)合酶,存在于細胞的過氧化物體內(nèi)[13]。它可催化H2O2分解成氧和水的酶,清除體內(nèi)的H2O2[14],從而使細胞免于遭受H2O2的毒害,是生物防御體系的關(guān)鍵酶之一[15]。過氧化氫酶存在于所有已知的動物的各個組織中,特別在肝臟中以高濃度存在;過氧化氫酶是過氧化物酶體的標志酶,約占過氧化物酶體酶總量的40%[16]。一般認為,以上三項指標的提高是由于其自身組織細胞生長發(fā)育和分裂增殖所導(dǎo)致[17],是機體抗氧化能力增強和免疫功能增強的表現(xiàn);指標數(shù)據(jù)的降低是免疫抑制所致,表明機體的免疫狀況變差,抗氧化能力下降??寡趸芰χ笖?shù)的提高表明組織細胞老化速度慢,抗氧化能力增強,免疫力增強[18]。本試驗結(jié)果表明,相對于對照組,竹葉黃酮組和黃芩苷組的抗氧化指數(shù)均不同程度有所提高,說明竹葉黃酮和黃芩苷在一定程度上有增強藍孔雀幼雛抗氧化能力的作用。
在飼料中添加0.5%竹葉黃酮和黃芩苷,可以提高提高藍孔雀幼雛的生長性能,并能改善血清中的抗氧化性能。