梁為民 唐 露 熊建華 蔣桂秀
廣西正廉司法鑒定中心,廣西 南寧 530031
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血液樣本中乙醇濃度檢測與線性回歸方程
梁為民 唐 露 熊建華 蔣桂秀
廣西正廉司法鑒定中心,廣西 南寧 530031
應用頂空氣相色譜內(nèi)標法分析血液樣本(以下簡稱血樣)中乙醇濃度,是通過血樣中乙醇的燃燒峰面積與乙醇濃度成線性關(guān)系的原理來進行分析計算,因此,用線性方程來計算血樣中乙醇濃度是非常精確的,結(jié)合氣相色譜儀的精度最終分析結(jié)果精確到0.01mg/100ml。
線性方程有一元線性方程、二元線性方程、三元(多元)線性方程,在本分析方案中,只有一對變量,即乙醇峰面積和乙醇濃度,因此,只能是一元線性方程。一元線性方程的通式一種是:Y=AX+B,另一種是Y=AX;前者有B值,后者沒有。該B值在解析幾何中稱為截距,在化學分析中,稱為初始值。由于乙醇峰面積與內(nèi)標峰面積的比值等于乙醇濃度與內(nèi)標濃度的比值,因此方程式中不可能有截距,也就是不可能存在初始值,這也就充分證明了正常人體血液中不含乙醇,為酒駕的司法鑒定提供了科學的理論依據(jù)。所以方程式只能是:Y=AX,Y為因變量,即血樣中乙醇濃度,X為自變量,即乙醇峰面積,A為線性方程的斜率,意義是內(nèi)標濃度與內(nèi)標峰面積比。
以上線性方程式的判定基于一個理論:乙醇峰面積/內(nèi)標峰面積=乙醇濃度/內(nèi)標濃度,但是,峰面積和濃度是兩個不同性質(zhì)的數(shù)值,峰面積表示的是樣品在檢測器上的響應值,這個響應值通過電子信號表達出來,這樣就存在兩個物理量的轉(zhuǎn)換,也就是存在一個轉(zhuǎn)換參數(shù),響應值與樣品濃度成正比,也就是峰面積與濃度成一元線性關(guān)系,信號轉(zhuǎn)換參數(shù)就是斜率,我們把這個斜率定義為相對因子A。至此,最終理論為:乙醇峰面積/內(nèi)標峰面積*相對因子A=乙醇濃度/內(nèi)標濃度,方程式是:Y=AX,Y是血樣中乙醇濃度,X是血樣中乙醇峰面積,A是血樣中內(nèi)標濃度*相對因子/內(nèi)標峰面積。對于A,內(nèi)標濃度和內(nèi)標峰面積都是可知的,唯獨相對因子是未知,但可根據(jù)峰面積與濃度成一元線性關(guān)系來得到相對因子,也就是函數(shù)中出現(xiàn)相同的子函數(shù),這就是遞推函數(shù),遞推函數(shù)可以回歸成一個同樣的總函數(shù),所以本方案需要進行回歸運算,從而最終確定出A值。
以上是初等函數(shù)的在氣相色譜分析實驗中的運用,初等函數(shù)雖然簡單,但運用統(tǒng)計學中的回歸函數(shù)確定出A值,就相對復雜。
所謂回歸方程,就是根據(jù)自變量和應變量所對應的一系列離散點,找出某條方程曲線,使得所有離散點到這條曲線的平均垂直距離最短,這條曲線所對應的方程就稱為這對自變量和應變量的回歸方程?;貧w方程在統(tǒng)計學中十分常用。
在酒駕的司法鑒定中,人體血液中乙醇濃度達到20mg/100ml到79mg/100ml,則定性為酒駕,達到80(含80)mg/100ml以上,則定性為醉駕,這就要求實驗中,必須做20、80mg/100ml這兩個標準液的峰面積;外加300mg/100ml標準液的峰面積,由這三個峰面積與分別與其濃度的比值作為離散點,構(gòu)成標準曲線,曲線的線性越高,分析結(jié)果就越精確,線性要求必須達到0.9995到1之間,1為最佳值,越接近1實驗結(jié)果越精確,因為數(shù)值為1時,各離散點的連線斜率相同,也就是所有離散點完全處在同一直線上。利用20、80、300mg/100ml這三種必做的離散點,結(jié)合線性回歸運算所要求的離散點校驗,就可以計算出A值。以下實驗舉例:其中X(0.0761,0.3042,1.1401),Y(20.0375,80.0564,300.0243)。
根據(jù)回歸方程:(n=3)
將以上計算結(jié)果代入回歸方程得:A=263.1579,a=1/A=1/263.1579=0.0038
通過以上判斷,1/a(即相對因子A)是兩個物理量轉(zhuǎn)換的轉(zhuǎn)換參數(shù),根據(jù):乙醇峰面積/內(nèi)標峰面積*A=乙醇濃度/內(nèi)標濃度這個理論,A=(乙醇濃度/內(nèi)標濃度)*(內(nèi)標峰面積/乙醇峰面積),該值與內(nèi)標濃度/內(nèi)標峰面積的比值有關(guān),也就是與信號轉(zhuǎn)換有關(guān)。R2為各離散點連線的斜率比,R2=1時,說明各連線斜率相同,曲線最直。也就是說,R2=1時就非常完美了,越接近1結(jié)果越精準,R2小于0.9995(不含0.9995)以下,則說明達不到直線標準,實驗就有很大誤差,這就要注意檢查設備是否有殘留,這時要做好各種儀器設備的清理工作,甚至更換。整個分析過程,融合了多門學科相輔相成,充分體現(xiàn)了自然科學的神奇魅力。
[1]中華人民共和國公共安全行業(yè)標準<血、尿中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、異丙醇、正丁醇、異戊醇的定性分析及乙醇、甲醇、正丙醇的定量分析方法>(GA/T 105-1995)[M].北京:中國標準出版社,2002.6.
[2]任琳,孫成均,鄒曉莉,曾紅燕,江波.全血中乙醇的毛細管氣相色譜快速檢測法[J].四川大學學報(醫(yī)學版),2010(06).
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