張曉華，楊嚴(yán)鷗，岳鼎鼎，王孝宇

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，安徽 合肥 230036)

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低蛋白飼料對異育銀鯽腸道抗氧化指標(biāo)的影響

張曉華，楊嚴(yán)鷗，岳鼎鼎，王孝宇

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，安徽 合肥 230036)

以蛋白含量38%為對照組，設(shè)飼料蛋白水平分別為34%、30%與26%的3個試驗(yàn)組(4種飼料能量相等)，分別飼養(yǎng)異育銀鯽8周，探討了低蛋白飼料對異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)腸道抗氧化指標(biāo)的影響。結(jié)果顯示，超氧化物歧化酶(SOD)活性不受飼料蛋白水平的顯著影響；隨著蛋白水平的下降，總抗氧化能力(T-AOC)、過氧化氫酶℃AT)活性以及抑制羥自由基能力(RAHFR)呈顯著下降趨勢，丙二醛含量(MDA)以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性呈顯著上升趨勢上升，但34%試驗(yàn)組與對照組均無顯著差異；谷胱甘肽(GSH)含量先升后降，在30%試驗(yàn)組顯著低于對照組。結(jié)果表明，低蛋白飼料中，34%試驗(yàn)組各抗氧指標(biāo)與對照組無顯著差異，30%與26%試驗(yàn)組多數(shù)指標(biāo)受到顯著影響，抗氧化能力下降。

異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)；低蛋白；抗氧化；腸道

飼料質(zhì)量差異對魚類抗氧化指標(biāo)有顯著影響[1～3]。在養(yǎng)殖中有時會遇見以低蛋白飼料投喂魚類的情況，而這類低蛋白飼料對魚類抗氧化指標(biāo)影響的研究相對缺乏；另一方面，飼料質(zhì)量主要以對肝臟、血液等的影響研究較多[1,4,5]，對腸道的研究較少[6]，而腸道是魚體重要的消化吸收器官，其抗氧化能力的變化會影響到魚體消化吸收能力，因此有必要對此進(jìn)行深入研究。本研究以異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)為研究對象，研究了低蛋白水平對異育銀鯽腸道抗氧化指標(biāo)的影響，并探討了低蛋白水平下魚類腸道各抗氧化指標(biāo)間的相互關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)魚取自安徽省合肥市肥東縣，運(yùn)回后使用2%的食鹽水進(jìn)行消毒，暫養(yǎng)期間投喂對照組飼料，10d后開始試驗(yàn)。暫養(yǎng)與正式試驗(yàn)時均使用循環(huán)水養(yǎng)魚系統(tǒng)，水族箱(60cm×60cm×65cm)水位50cm，盛水180L。試驗(yàn)魚平均初始體重為(6.05±0.30)g。

4種等能飼料的蛋白水平分別為38%(對照組)、34%、30%以及26%，均為自制的硬顆粒飼料，直徑2～3 mm，60℃烘干后置于4℃的冰柜中保存。試驗(yàn)飼料配方組成及營養(yǎng)水平詳見表1。

1.2 方法

試驗(yàn)開始前，將魚饑餓24 h，每箱放入試驗(yàn)魚30尾，每種飼料4個重復(fù)，共16個水族箱。水溫由空調(diào)及蓄水箱內(nèi)的電熱棒控制，維持(25±1)℃水平。光照時間8：00～20：00，節(jié)能日光燈提供。試驗(yàn)期間，水體溶氧>5.25mg/L，pH為7.08～7.30，氨氮<0.09mg/L。

試驗(yàn)持續(xù)8周，每天上午和下午各投過量飼料1次，1.5h后回收殘餌，70℃烘干。殘餌量用飼料溶失率校正。測定溶失率時隨機(jī)在4個無魚的箱中各放入1份已稱重的飼料，1.5h后回收，70℃烘干至恒重并稱重。

表1 試驗(yàn)飼料配方組成及營養(yǎng)水平

注：1) 維生素預(yù)混物(I.U./100g預(yù)混物)中維生素A 550、維生素D3100、維生素E 5、維生素K 1、膽堿55、尼氨酸10、核黃素2、吡哆醇2、硫胺素2、泛酸鈣5、生物素0.01、葉酸0.5、維生素B122、抗壞血酸10、肌醇10；2)礦物鹽預(yù)混物(g/100g預(yù)混物)中氯化鈉1、硫酸鎂15、磷酸二氫鈉25、磷酸二氫鉀32、磷酸二氫鈣20、檸檬酸鐵2.5、乳酸鈣3.5、硫酸鋅0.353、硫酸錳0.162、硫酸銅0.031、氯化鈷0.001、碘酸鉀0.003、纖維素0.45。

試驗(yàn)結(jié)束時將魚饑餓1d，稱量各缸魚體重；每缸魚取7尾，濾紙擦干，冰盤解剖取腸道，冰浴清洗后混合，-70℃保存。

超氧化物歧化酶SOD 活性、MDA含量、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX) 活性、谷胱甘肽(GSH)含量、過氧化氫酶℃AT)活性、抑制羥自由基能力(RAHFR)、總抗氧化能力(T-AOC)的測定按相關(guān)試劑盒說明進(jìn)行，試劑盒為上海江萊生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.3 數(shù)據(jù)處理

各試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。方差分析后進(jìn)行組間差異的多重比較(Duncan’s procedure)。統(tǒng)計軟件為Statistica 5.0。主成分分析采用SPSS 17.0 軟件。

2 結(jié)果與分析

由表2可見,SOD活性不受飼料蛋白水平的顯著影響；隨蛋白水平下降，T-AOC、CAT活性及RAHFR呈顯著下降趨勢，MDA含量、GSH-PX活性呈顯著上升趨勢，但34%試驗(yàn)組與對照組均無顯著差異;GSH含量先升后降，在30%試驗(yàn)組顯著低于對照組。

3 討論

異育銀鯽幼魚蛋白質(zhì)最佳需求為35.05%～38.0%[7～9]，因此，本研究設(shè)計最高蛋白水平為38.0%。結(jié)果顯示，低蛋白飼料中，34%試驗(yàn)組各抗氧指標(biāo)與對照組無顯著差異,30%與26%試驗(yàn)組多數(shù)指標(biāo)受到顯著影響，抗氧化能力下降。

表2 低蛋白飼料對異育銀鯽腸道抗氧化指標(biāo)的影響

注：同行數(shù)據(jù)上標(biāo)字母不同表示組間存在顯著差異(P<0.05)。

T-AOC代表體內(nèi)酶類和非酶類抗氧化物的總體水平，其含量直接反映了組織抗氧化能力的高低[10]。過氧化氫酶CAT能將細(xì)胞內(nèi)H2O2分解為H2O和O2，抑制羥自由基能力(RAHFA)間接反映機(jī)體羥自由基水平[11]。本研究中，這3項(xiàng)指標(biāo)變化一致，均隨著蛋白水平下降而顯著下降，有很強(qiáng)的協(xié)同性；GSH-Px也可將細(xì)胞內(nèi)H2O2分解為H2O和O2，降低羥自由基濃度[12]，但其變化卻與CAT相反，隨蛋白水平降低而呈上升趨勢；而超氧化物歧化酶(SOD)是催化氧自由基O2-生成H2O2消除超氧陰離子毒性的重要酶類，是重要的抗氧化酶類，但本研究中該指標(biāo)未受到蛋白水平的顯著影響，其變化趨勢與總抗氧化能力變化趨勢不一致，這反映出指標(biāo)變化的復(fù)雜性。

丙二醛(MDA)是脂質(zhì)過氧化物的最終分解產(chǎn)物之一,具有很強(qiáng)的生物毒性,其含量能直接反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化程度[13，14]。本研究中MDA含量偏高，這可能是由于腸道內(nèi)含有較多的游離脂肪酸，同時腸道中抗氧化酶活性相對較低，不能充分消除所生成的過氧化物(ROS)，導(dǎo)致MDA大量積累[2]。

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2016-08-15

安徽省科技富民強(qiáng)縣專項(xiàng)行動計劃資金項(xiàng)目(2069999)。

張曉華(1966-)，女，副教授，碩士生，研究方向?yàn)樗a(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)。通信作者：楊嚴(yán)鷗，cdyyo@126.com。

S917;Q959.46+8

A

1673-1409(2016)27-0033-03

[引著格式]張曉華，楊嚴(yán)鷗，岳鼎鼎，等.低蛋白飼料對異育銀鯽腸道抗氧化指標(biāo)的影響[J].長江大學(xué)學(xué)報(自科版)，2016，13(27)：33～35.