胡慶蘭， 豐 蒙

(湖北第二師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院， 武漢 430205)

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紫外分光光度法測定柚子中維生素C的含量

胡慶蘭， 豐 蒙

(湖北第二師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院， 武漢 430205)

建立以pH=1的鹽酸溶液為溶劑，用紫外分光光度法直接測定柚子中維生素C的含量的方法。維生素C在4—140μg/mL濃度范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：y=0.0253x+0.1450，R2=0.9974。加標(biāo)回收率在94.9039%-96.3079%之間,RSD為1.85%。

柚子； 維生素C； 紫外分光光度法

維生素C又叫L-抗壞血酸，在日常生活中具有十分顯著的作用，也是一種常見的水溶性維C。主要生理功能有：促進(jìn)骨膠原的生物合成，促進(jìn)氨基酸中絡(luò)氨酸和色氨酸的代謝，利于組織創(chuàng)傷口的更快愈合，延長機(jī)體壽命；改善鐵、鈣和葉酸的利用；改善脂肪和類脂特別是膽固醇的代謝，增強(qiáng)機(jī)體對外界環(huán)境的抗應(yīng)激能力和免疫力，預(yù)防心血管疾??；防止牙床出血，促進(jìn)牙齒和骨骼的生長。測定方法主要有2，6-二氯靛酚滴定法[1]碘量法[2]可見光分光光度法[3-5]紫外分光光度法[4-10]。測定維生素C的方法有很多，為了能夠達(dá)到快速簡便的檢測柚子中維生素C的含量的目的，本次試驗(yàn)采用直接紫外分光光度法測定柚肉中維生素C的含量，效果顯著，所得結(jié)果快速準(zhǔn)確。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑

儀器：分析天平(FA2004B電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司)、TU-1810紫外分光光度計(jì)(北京普析儀器有限責(zé)任公司)、電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海蘇進(jìn)儀器設(shè)備廠監(jiān)制，南通滬南科學(xué)儀器有限公司制造)、臺式離心機(jī)80-2(常州國華電器有限公司)

試劑：抗壞血酸、硫酸、氫氧化鈉、濃鹽酸和硝酸(以上均為分析純)新鮮的柚子

1.2 實(shí)驗(yàn)原理

紫外分光光度法是在紫外光區(qū)(200-400nm)的特定波長處或者一定范圍內(nèi)的吸光度，對物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。根據(jù)維生素C具有對紫外產(chǎn)生吸收和對堿的不穩(wěn)定性特征，在pH=1的條件下，于236nm處測定樣品液與堿處理液兩者吸光度之差，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算得出樣品中Vc的含量。

1.3 樣品的處理

取柚肉20.00g于研缽中，加入10.00mL10%HCl,研磨成勻漿，然后放入離心管中，以8000r/s 離心10min，取上層清液，即為提取液。

1.4 最大吸收波長的測定

在200-400nm對溶液進(jìn)行掃描，得出最大吸收波長為236nm

1.5 pH的選擇

由于抗壞血酸易被空氣氧化，而它在酸性條件下較穩(wěn)定，因此，在此試驗(yàn)中，應(yīng)在酸性環(huán)境下進(jìn)行測量，在不同pH條件下，測量維生素C的吸光度，并由此選擇最適宜的pH。本實(shí)驗(yàn)維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品處理液最適宜的pH為1。

1.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

先取一定量的抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，用TU-1810紫外分光光度計(jì)以上述鹽酸溶液為參比，在200nm-400nm范圍內(nèi)測繪Vc的吸收光譜，以確定其最大吸收波長。

分別用移液管取上述抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL于50mL容量瓶中，用上述鹽酸溶液定容，備用。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

稱取抗壞血酸100mg(精確到0.1mg)，用上述鹽酸溶液溶解，小心轉(zhuǎn)移到1L容量瓶中，并稀釋至刻度，混勻備用。此時(shí)抗壞血酸的濃度為100mg/L。吸取2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液于50mL容量瓶，并用上述鹽酸溶液定容混勻備用。此時(shí)它們的溶液濃度分別為4mg/L、8mg/L、12mg/L、16mg/L、20mg/L。以鹽酸溶液為參比溶液于波長為236nm處，測定標(biāo)準(zhǔn)系列抗壞血酸的吸光度。以吸光度值與抗壞血酸的濃度Cvc繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測量

得出y=0.0253x+0.1450 R2=0.9974

1.7 樣品吸光度的測定

取柚肉20.00g于研缽中，加入10.00mL1%HCl,研磨成勻漿，然后放入離心管中，以8000r/s 離心10min，取上層清液，配制成樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液100mL。平行實(shí)驗(yàn)三次，標(biāo)記為1、2、3。測得結(jié)果取平均值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線 中的線性方程y=0.0253x+0.1450，以及計(jì)算中維生素C含量的計(jì)算公式計(jì)算獲得柚子中維生素C的含量。

表2 樣品吸光度的測定

1.8 加標(biāo)回收率

為了保證分析結(jié)果的可靠性，了解試樣中干擾物質(zhì)的影響，應(yīng)用本法對樣品進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)。

A組取1.00ml提取液，放入盛有4ml鹽酸溶液(均為上述溶液配制中的鹽酸溶液)的50ml容量瓶中，用去離子水定容至刻度，搖勻備用。

B組取1.00ml提取液，并加入盛有1.00ml標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液，放入盛有4ml鹽酸溶液的50ml容量瓶中，用去離子水定容至刻度，搖勻備用。

C組吸取1.00ml提取液，并加入4ml上述氫氧化鈉溶液，混勻，15min左右(讓樣品中的維生素C與氫氧化鈉充分反應(yīng))，加入4.00ml鹽酸溶液，再用去離子水定容至刻度，搖勻備用。

以C組為空白對照，測定相應(yīng)的吸光度值，并記錄。

表3 加標(biāo)回收率

2 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)采用直接紫外分光光度法在pH=1的條件下來測定柚子中維生素C的含量。線性方程為： y=0.0253x+0.1450，R2=0.9974。線性范圍為：4-140μg/mL。

使用紫外分光光度法測定維生素C含量，方法簡單，快速，結(jié)果較為準(zhǔn)確，且不會因?yàn)闃悠繁旧眍伾鴮?dǎo)致影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。此次實(shí)驗(yàn)，所得結(jié)果較為低下，但用此種方法，仍然可以在較短時(shí)間內(nèi)獲取結(jié)果，說明紫外分光光度法不受限于較低含量的維生素C的測定。

[1]苑乃香，宣亞文，謝東坡，武文.2,6-二氯靛酚鈉測定蔬菜中抗壞血酸的含量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009,37(25):11853-11854.

[2]華中師范大學(xué)，東北師范大學(xué)，陜西師范大學(xué)，北京師范大學(xué).分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)[M].北京：高等教育出版社，2010:2.

[3]夏志清，劉玉榮，靳建華.維生素C的化學(xué)實(shí)驗(yàn)[J].化學(xué)教育，2008,(5)：66-73.

[4]廖肇燕，王科軍，周南華.贛南臍橙中維生素C的測定研究[J].贛南師范學(xué)報(bào)，2007,(6):63-65.

[5]孫德坤，許月明，吳定.褪色光度法測定果蔬中VC的含量[J].食品工業(yè)科技，2003,24(5)：93-95.

[6]王雷，楊新建，寇欣.紫外分光光度法在中藥分析中的應(yīng)用進(jìn)展[J].天津藥學(xué)，2003,15(5)：62-64.

[7]徐大光，陰志剛，侯曉強(qiáng)，薛冰.紫外-可見分光光度法在藥物分析中的應(yīng)用及進(jìn)展[J].中國醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志，2006,23(6)：432-434.

[8]馬占玲，馬占彪，夏云生，等. 青椒中還原型維生素C含量的測定[J]. 渤海大學(xué)學(xué)報(bào)， 2006， 27(2)：111-113.

[9]趙連俊. 水果中維生素C含量測定的研究[J]. 當(dāng)代化工， 2008， 37(6)：672.

[10]陳玉峰，莊志萍.紫外分光光度法測定橙汁中維生素C的含量[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(1):236-237.

Determination of Vitamin C in Pomelo by Uv Spectrophotometry

HU Qing-lan, FENG Meng

(College of Chemistry and Life Sciences, Hubei University of Education, Wuhan 430205, China)

This paper attempts to establish a pH=1 hydrochloric solution as the solvent and draw direct determination of the content of vitamin C in pomelo by UV. Vitamin C in the 4-140μg / mL concentration range and absorbance was linear. And the regression equation is:y=0.0253x+0.1450, R2=0.9974.The detection limit is 0.12μg / mL, the recoveries in between94.9039%-96.3079%. The RSD is 1.8523%.

pomelo; Vitamin C; Uv spectrophotometry

2016-07-03

胡慶蘭(1965-)女 ，高級工程師，研究方向?yàn)榉治龌瘜W(xué)。

O65

A

1674-344X(2016)08-0005-03