李潤(rùn)成，楊　宇，李　淼

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128）

黑山羊細(xì)頸囊尾蚴與彎曲桿菌混合感染的診治

李潤(rùn)成，楊宇，李淼

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128）

圖1　病羊肝臟上突起的腫塊

1　發(fā)病情況

2014年9月湖南株洲某黑山羊養(yǎng)殖場(chǎng)羊只發(fā)病，發(fā)病主要表現(xiàn)為消瘦、病程長(zhǎng)、慢性死亡，少數(shù)懷孕母羊消瘦后出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象。用阿苯達(dá)唑多次驅(qū)蟲(chóng)仍沒(méi)有明顯效果。63只羊，35 d內(nèi)死亡11只。

2　剖檢變化

將極度消瘦的病羊處死剖開(kāi)胸腹腔可見(jiàn)肝臟腫大，并且肝臟表面有突起的腫塊（圖1），切開(kāi)腫塊組織呈蜂窩狀，此外在肝臟、腸系膜上有雞蛋大小的囊泡粘附（圖2），泡內(nèi)充滿透明囊液，其他臟器病變不明顯。

3　實(shí)驗(yàn)室診斷

圖2　病羊肝臟上的囊泡

3.1細(xì)菌分離培養(yǎng)取羊肝臟腫大部位組織接種于血瓊脂平板，37℃、分別進(jìn)行有氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)48 h，厭氧培養(yǎng)采用自封袋內(nèi)放置厭氧發(fā)生袋進(jìn)行。結(jié)果有氧培養(yǎng)的平板上沒(méi)有長(zhǎng)出任何細(xì)菌，但在厭氧培養(yǎng)的平板上長(zhǎng)出了大量密密麻麻形態(tài)一致的針尖大小菌落。將培養(yǎng)的細(xì)菌進(jìn)行涂片與革蘭染色鏡檢，結(jié)果表明，分離細(xì)菌為革蘭陰性、彎曲程度不一的桿菌。

3.2分離菌的PCR擴(kuò)增與測(cè)序鑒定取分離菌作為模版，用細(xì)菌通用引物［1］進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增結(jié)果見(jiàn)圖3，可見(jiàn)從分離菌擴(kuò)增出了約1 142 bp的目的條帶。將擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物送上海鉑尚生物科技有限公司進(jìn)行測(cè)序（序列已登錄到GenBank，登錄號(hào)為KP208684）和Blast分析。結(jié)果證明分離菌為彎曲桿菌，與各彎曲菌相應(yīng)基因片段同源性最高達(dá)到99%以上。

圖3　分離菌16S rRNA基因PCR擴(kuò)增

3.3細(xì)菌藥物敏感性檢測(cè)及臨床治療效果將分離菌用綿羊血瓊脂培養(yǎng)后，刮取細(xì)菌菌落用TSB液體培養(yǎng)基稀釋，按藥敏試驗(yàn)要求將菌液濃度調(diào)至0.5個(gè)麥?zhǔn)蠁挝缓螅鶕?jù)不同細(xì)菌特性選擇檢測(cè)藥物，采用紙片法進(jìn)行藥物敏感性檢測(cè)，藥物敏感性檢測(cè)細(xì)菌培養(yǎng)仍然按厭氧法進(jìn)行。藥敏檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)該分離菌對(duì)氟苯尼考、恩諾沙星最為敏感。建議羊場(chǎng)采用吡喹酮對(duì)羊群進(jìn)行口服驅(qū)蟲(chóng)，給有明顯發(fā)病表現(xiàn)的羊肌肉注射氟苯尼考，連用3 d。結(jié)果10 d控制了病情，沒(méi)有再出現(xiàn)發(fā)病羊的死亡，并且羊群的精神狀態(tài)較以前有了很大改善。

表1　分離菌藥物敏感性檢測(cè)結(jié)果

4　討論與分析

本文對(duì)送檢病羊進(jìn)行了剖檢以及實(shí)驗(yàn)室診斷，從剖檢觀察來(lái)看，發(fā)病羊肝臟表面以及腸系膜粘附有明顯的水鈴鐺樣囊泡，說(shuō)明存在細(xì)頸囊尾蚴感染［2-3］，雖然細(xì)頸囊尾蚴主要危害幼齡羊，成年羊群常僅為帶蟲(chóng)者。病羊的臨床癥狀一般不甚明顯，主要是慢性經(jīng)過(guò)，但本文通過(guò)有氧和厭氧兩種培養(yǎng)方法從發(fā)病羊?qū)嵸|(zhì)臟器進(jìn)行細(xì)菌分離，結(jié)果厭氧方法從肝臟分離到了大量彎曲桿菌，結(jié)合臨床針對(duì)細(xì)頸囊尾蚴、彎曲桿菌聯(lián)合用藥取得明顯效果這一結(jié)果。證明該羊群發(fā)病死亡主要原因?yàn)榧?xì)頸囊尾蚴和彎曲桿菌混合感染引起，這也是該養(yǎng)殖場(chǎng)使用阿苯達(dá)唑未能取得明顯效果的重要原因。細(xì)頸囊尾蚴病是寄生于犬等肉食動(dòng)物小腸內(nèi)的帶科、泡狀帶絳蟲(chóng)的幼蟲(chóng)-細(xì)頸囊尾蚴，寄生在羊、豬、牛等動(dòng)物的腹膜、肝臟等處引起的寄生蟲(chóng)病。細(xì)頸囊尾蚴在世界范圍分布較廣，凡養(yǎng)犬的地方，一般都可能有牲畜感染細(xì)頸囊尾蚴，家畜感染細(xì)頸囊尾蚴，是由于接觸帶有泡狀帶絳蟲(chóng)的犬的糞便中的節(jié)片或蟲(chóng)卵而引起，因此，減少牧區(qū)犬的養(yǎng)殖，或防止犬的糞便污染了牧場(chǎng)、飼料和飲水可減少羊群細(xì)頸囊尾蚴感染流行的嚴(yán)重程度。至于本文從發(fā)病羊肝臟分離到大量彎曲桿菌，尚未見(jiàn)到類似的報(bào)道，該菌可能為羊群感染細(xì)頸囊尾蚴后由于機(jī)體體質(zhì)下降繼發(fā)感染所致，同樣這也可能是發(fā)病羊死亡的重要原因。

［1］Run-Cheng Li，Chao-Ting Xiao，Xing Qian，et al.Occurrence of Streptococcus dysgalactiae subsp.Equisimilis in Masked Palm Civet（Paguma larvata）［J］.Journal of Animal and Veterinary Advances，2012，11（12）：2020-2023.

［2］李繁，梁珠嫻.屠宰豬細(xì)頸囊尾蚴病的調(diào)查與思考［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2004，21（4）：42.

［3］張長(zhǎng)英.烏蘭縣豬細(xì)頸囊尾蚴病感染情況調(diào)查［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2008，44（12）：41.

S855.1+2

B

0529-6005（2016）04-0066-02

2015-01-09

李潤(rùn)成（1979-），男，實(shí)驗(yàn)師，碩士，從事動(dòng)物傳染病的教學(xué)與研究工作，E-mail：lixueshengqq@126.com