江生汪敏 白亞敏 韓燕

（重慶市食品藥品檢驗檢測研究院，重慶401121）

·食品分析·

用可見-紫外分光光度法測定水產(chǎn)品中組胺的含量

江生*汪敏 白亞敏 韓燕

（重慶市食品藥品檢驗檢測研究院，重慶401121）

組胺中毒是由于食用含有一定數(shù)量組胺的某些魚類而引起的過敏性食物中毒，主要是因為此類魚含有較高的組氨酸，當魚體不新鮮或腐敗時，污染魚體的細菌產(chǎn)生脫羧酶，使組氨酸脫羧生成組胺。中毒機理是組胺引起毛細血管擴張和支氣管收縮，導致一系列的臨床癥狀。采用可見-紫外分光光度法測定水產(chǎn)品中組胺含量時，原標準加入3 mL碳酸鈉溶液（50 g/L），而本研究則加入3 mL無水碳酸鈉溶液（50 g/L）進行檢測，并對該檢測方法的準確性和穩(wěn)定性進行了分析。

1　材料與儀器

1.1材料

磷酸組胺，中國食品藥品檢定研究院，批號為150510-201313；正戊醇，分析純；三氯乙酸，分析純；碳酸鈉，分析純；氫氧化鈉，分析純；鹽酸，分析純。

1.2儀器

HP-8453E紫外分光光度計，美國惠普公司。

2　方法與結(jié)果

2.1供試品溶液制備

稱取適量絞碎并混和均勻的供試品，置于具塞錐形瓶中，加入20 mL三氯乙酸溶液（100 g/L），浸泡3 h，過濾；精密量取2.0 mL濾液，置于分液漏斗中，加氫氧化鈉溶液（250 g/L）使其呈堿性，每次加入3 mL正戊醇，振搖5 min，提取3次，合并正戊醇并稀釋至10.0 mL；精密量取2.0 mL正戊醇提取液于分液漏斗中，每次加3 mL鹽酸（1+11），振搖提取3次，合并鹽酸提取液并稀釋至10.0 mL，即得。

2.2標準品溶液制備

稱取磷酸組胺標準品約27.6 mg，置50 mL量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻，作為組胺標準儲備液。精密量取組胺標準儲備液5.0 mL，置50 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3測定

精密量取鹽酸提取液2.0 mL置于10 mL比色管中，分別精密量取標準品溶液0.00 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL、2.00 mL，置于10 mL比色管中，再加1 mL鹽酸（1+11）。樣品管和標準管各加3 mL無水碳酸鈉溶液（50 g/L），3 mL偶氮試劑，加水至刻度，搖勻，放置10 min后，以零管調(diào)節(jié)零點，于480 nm的波長處測定吸收度，以質(zhì)量濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，見圖1。求得回歸方程為Y=0.116 8X +0.004 1，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 7，表明組胺質(zhì)量濃度在0.407 81 μg/mL～4.078 1 μg/mL范圍內(nèi)，與吸收度呈良好的線性關(guān)系。

圖1　組胺標準曲線

2.4重復(fù)性試驗

稱取適量絞碎并混和均勻的供試品6份，按2.1方法制備供試品溶液，同時做空白試驗，按2.3方法依法測定，計算樣品中組胺含量，結(jié)果見表1。由表1結(jié)果可知，采用該方法提取與檢測，重復(fù)性良好。

表1　重復(fù)性試驗結(jié)果（n=6）

2.5精密度試驗

精密量取標準品溶液0.80 mL，按2.3方法依法操作，同時做空白試驗，連續(xù)測定5次，結(jié)果其精密度為0.21 %（n=5）。

2.6加樣回收試驗

精密稱取已知含量的供試品（0.225 g/kg）10.0 g，共9份，分別精密量取2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL組胺標準儲備液，按2.1方法制備供試品溶液，同時做空白試驗，按2.3方法依法操作，計算回收率，結(jié)果平均回收率為94.8 %，RSD為1.1 %（n=9），結(jié)果見表2。

表2　回收率測定結(jié)果（n=9）

2.5穩(wěn)定性試驗

精密量取標準品溶液0.80 mL，按2.3方法依法操作，同時做空白試驗，分別在0.0 h、0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h、3.0 h、4.0 h、5.0 h時測定吸光度，結(jié)果見表3。結(jié)果表明溶液在1.5 h內(nèi)基本穩(wěn)定，吸光度平均值為0.193 1，RSD為0.09%，隨時間增加吸光度變小。

表3　穩(wěn)定性試驗結(jié)果（n=7）

3　討論

綜上所述，采用該方法提取、測定水產(chǎn)品中組胺含量線性良好，穩(wěn)定性好，重復(fù)性、精密度、加樣回收率試驗表明，本法簡便可行。

原標準加入3 mL碳酸鈉溶液（50 g/L），本研究采用3 mL無水碳酸鈉溶液（50 g/L）。若碳酸鈉含10個結(jié)晶水配成溶液，根本不顯色，隨著結(jié)晶水的減少漸漸顯色，采用無水碳酸鈉配成溶液，在1.5 h內(nèi)顯色穩(wěn)定，結(jié)果表明此方法操作簡單，快速，測定結(jié)果準確。

［1］中華人民共和國衛(wèi)生部. GB/T 5009.45-2003 水產(chǎn)品衛(wèi)生標準的分析方法［S］.北京：中國標準出版社，2003：359-362.

Determination of histamine in the aquatic products by UV

JIANG Sheng*WANG Min BAI Yamin HAN Yan
（Chongqing institute for food and drug control，Chongqing 401121，China）

建立了水產(chǎn)品中組胺含量的測定方法。采用正戊醇提取，偶氮試劑顯色，可見-紫外分光光度計檢測，測定波長為480 nm。試驗結(jié)果表明，當組胺的質(zhì)量濃度在0.407 81 μg/mL～4.078 1 μg/mL范圍內(nèi)，質(zhì)量濃度與吸光度呈良好線性關(guān)系（R2=0.999 7）。平均回收率為94.8 %，RSD為1.1%（n=9）。本法簡單，易操作，測定結(jié)果準確。

可見-紫外分光光度法；組胺；水產(chǎn)品

To establish a UV method for the determination of histamine in the aquatic products. With positive amyl alcohol extraction，encounter azo reagent orange. The detection wavelength was set at 480 nm. Histamine linear range was：0.407 81 μg/mL～4.078 1 μg/mL（R2=0.999 7）.The average recovery was 94.8%，and all RSD less than 1.1%（n=9）. This method is sensitive，accurate and reproducible and can be used to control the quality of the cosmetic.

UV；histamine；aquatic products

TS207.3

A

1673-6044（2016）01-0062-03

10.3969/j.issn.1673-6044.2016.01.017

*江生，男，1973年出生，1998年畢業(yè)于成都理工大學分析化學專業(yè)，正高級工程師。

2015-12-14