劉春紅，王曉慧，高 磊，段翠翠，趙玉娟，牛春華，欒 暢，李盛鈺,*（.長(zhǎng)春大學(xué)特殊教育學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 300；.吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，吉林 長(zhǎng)春 30033）

植物乳桿菌C88聯(lián)合人參多糖的免疫調(diào)節(jié)作用

劉春紅1，王曉慧2，高 磊2，段翠翠2，趙玉娟2，牛春華2，欒 暢2，李盛鈺1,*
（1.長(zhǎng)春大學(xué)特殊教育學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130022；2.吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，吉林 長(zhǎng)春 130033）

以環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)昆明小鼠建立免疫抑制模型后，分別給其灌胃人參多糖、人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）C88。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了小鼠血清中的白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、白細(xì)胞介素-4（interleukin-4，IL-4）、白細(xì)胞介素-10（interleukin-10，IL-10）、干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG），并利用碳廓清法檢測(cè)了小鼠吞噬細(xì)胞吞噬能力，評(píng)價(jià)了人參多糖（water-soluble ginseng polysaccharides，WGPA）聯(lián)合植物乳桿菌C88的體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明WGPA聯(lián)合益生菌C88可明顯增強(qiáng)免疫抑制小鼠吞噬細(xì)胞的吞噬能力和遲發(fā)型超敏反應(yīng)，顯著上調(diào)血清中IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α、IgG水平，下調(diào)IL-10水平，并呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性，且聯(lián)合用藥組的作用明顯強(qiáng)于人參多糖WGPA單獨(dú)用藥組。綜上所述，植物乳桿菌C88聯(lián)合人參多糖可以發(fā)揮一定的免疫調(diào)節(jié)作用。

植物乳桿菌；人參多糖；益生元；免疫調(diào)節(jié)

劉春紅, 王曉慧, 高磊, 等. 植物乳桿菌C88聯(lián)合人參多糖的免疫調(diào)節(jié)作用[J]. 食品科學(xué), 2016, 37(11): 202-207. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201611035. http://www.spkx.net.cn

LIU Chunhong, WANG Xiaohui, GAO Lei, et al. Immunomodulatory effects of ginseng polysaccharides combined with Lactobacillus plantarum C88[J]. Food Science, 2016, 37(11): 202-207. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201611035. http://www.spkx.net.cn

益生元（prebiotic）是指一些不被宿主消化吸收卻可選擇性地促進(jìn)機(jī)體體內(nèi)雙歧桿菌、乳桿菌等益生菌的代謝和增殖，從而改善宿主健康的物質(zhì)[1]。由于益生元不能被人體分解、吸收和利用，通過(guò)消化道到達(dá)結(jié)腸后，有的能被結(jié)腸菌群分解和利用，而促進(jìn)結(jié)腸菌群的生長(zhǎng)，在改善腸道微生態(tài)、促進(jìn)脂質(zhì)、蛋白質(zhì)與礦物類(lèi)代謝方面具有重要意義[2-3]。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，一些產(chǎn)胞外多糖的乳酸菌在發(fā)酵末期，自身產(chǎn)生的多糖能夠被菌株降解或作為碳源被菌株利用[4-7]。另外，Ramnani等[8]研究結(jié)果也證明，低分子質(zhì)量的瓊脂多糖和海藻多糖能明顯促進(jìn)腸道雙歧桿菌的生長(zhǎng)，并能顯著提高短鏈脂肪酸的產(chǎn)量。臺(tái)灣金線蓮（Anoectochilus formosanus）水溶性、非消化性多糖能降低實(shí)驗(yàn)大鼠盲腸pH值，增強(qiáng)鈣吸收能力及腸道雙歧桿菌數(shù)量，具有明顯的益生元作用[9]。硬粒小麥可溶性膳食纖維多糖能夠促進(jìn)植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）L12的生長(zhǎng)[10]。上述研究結(jié)果表明，一些非消化性的多糖具有明顯的益生元作用，益生元多糖能夠促進(jìn)腸道益生菌的生長(zhǎng)，抑制有害微生物的種類(lèi)和數(shù)量，使腸道菌群向有利于宿主健康的方向轉(zhuǎn)化，是對(duì)機(jī)體健康起推動(dòng)作用的一類(lèi)生物活性物質(zhì)。

人參（Panax ginseng C. A. Meyer）是我國(guó)名貴中藥，多糖是人參重要的生物活性成分之一，已有文獻(xiàn)報(bào)道人參多糖具有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗黏附、抗氧化、降血糖等活性[11-13]。自O(shè)vodov等[14]首次報(bào)道人參多糖以來(lái)，許多研究致力于人參多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)分析和功能活性等方面。人參多糖主要由類(lèi)淀粉樣多糖和人參果膠組成，類(lèi)淀粉樣多糖主要為含3-分支的α-D-(1,6)-葡聚糖和含6-分支的α-D-(1,4)-葡聚糖，而人參果膠主要由半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸和阿拉伯糖組成的酸性雜多糖。課題前期研究通過(guò)體外發(fā)酵實(shí)驗(yàn)證實(shí)了人參多糖具有顯著的體外增殖乳酸菌和發(fā)酵產(chǎn)酸的益生作用，顯示出人參多糖的潛在益生元功能。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)人參多糖益生元作用的研究才剛剛起步，本研究擬以人參多糖和從傳統(tǒng)發(fā)酵食品中篩選所得的優(yōu)良益生性乳桿菌菌株為研究對(duì)象，通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)人參多糖對(duì)乳桿菌的益生元活性，進(jìn)一步檢測(cè)了人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌共同作用時(shí)的免疫調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 材料、培養(yǎng)基與試劑

人參多糖（water-soluble ginseng polysaccharides，WGPA），參考Zhang Xu等[15]。植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）C88分離自?xún)?nèi)蒙古傳統(tǒng)發(fā)酵奶豆腐，是1株具有優(yōu)良功能特性和發(fā)酵特性的益生菌株[16-19]。該菌株在含體積分?jǐn)?shù)20%甘油的MRS培養(yǎng)基中，－80 ℃凍存。使用前接種于優(yōu)化的MRS液體培養(yǎng)基，37 ℃ 條件下連續(xù)活化3 次[20]。

優(yōu)化MRS培養(yǎng)基（g）：果糖10、葡萄糖20、大豆蛋白胨26.7、酵母浸粉13.3、檸檬酸鈉5、無(wú)水乙酸鈉5、磷酸氫二鉀2、硫酸鎂0.2、硫酸錳0.05，吐溫-80 1 mL，定容至1 L。115 ℃高壓滅菌20 min。

小鼠血清白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、白細(xì)胞介素-4（interleukin-4，IL-4）、白細(xì)胞介素-10（interleukin-10，IL-10）、干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）酶聯(lián)免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)試劑盒 北京方程生物科技有限公司。其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

電子天平 上海佑科儀器儀表有限公司；電熱恒溫培養(yǎng)箱 上海一恒科學(xué)儀器有限公司；酶標(biāo)儀 美國(guó)BioTek公司；分析天平 德國(guó)Sartorius公司。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物分組及處理

無(wú)特定病原體（specific pathogen free，SPF）級(jí)雄性ICR小鼠（18～22 g），購(gòu)自長(zhǎng)春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（吉）-2011-0004。實(shí)驗(yàn)室條件下，20 ℃，12 h晝/夜循環(huán)，自由進(jìn)食進(jìn)水，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周。小鼠隨機(jī)分為6 組，每組15 只，分別為正常對(duì)照組、模型組、WGPA 100 mg/（kg?d）（以體質(zhì)量計(jì)，下同）、100 mg/（kg?d）WGPA＋108CFU/mL C88低劑量組、100 mg/（kg?d）WGPA ＋109CFU/mL C88中劑量組，100 mg/（kg?d）WGPA ＋1010CFU/mL C88高劑量組。除正常對(duì)照組外，其余各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于實(shí)驗(yàn)1～3 d腹腔注射環(huán)磷酰胺80 mg/（kg?d），建立免疫抑制模型。于實(shí)驗(yàn)4～21 d分別灌胃給予不同劑量的各樣品。末次給藥24 h后稱(chēng)質(zhì)量，摘眼球取血，37 ℃放置1 h，4 ℃放置1 h，4 ℃2 800 r/min離心10 min，制備血清，－20 ℃保存。取血后解剖分離胸腺、脾臟、肝臟、腎臟及心臟并稱(chēng)取質(zhì)量，臟器指數(shù)計(jì)算公式如下[21]。

1.3.2 吞噬細(xì)胞吞噬指數(shù)的測(cè)定

末次給藥24 h后，小鼠稱(chēng)質(zhì)量，尾靜脈注射印度墨汁（1∶4稀釋?zhuān)?，?.05 mL/10 g注射劑量，注射后立即計(jì)時(shí)，分別于2、10 min時(shí)眼靜脈叢取血30 μL，血液樣本與3 mL 0.1 g/100 mL Na2CO3混勻，600 nm波長(zhǎng)處測(cè)定光密度值（OD），3mL 0.1 g/100 mL Na2CO3作空白，取血完畢后立即處死小鼠，分離肝、脾，吞噬指數(shù)（a）計(jì)算公式如下。

式中：a為每單位組織吞噬細(xì)胞指數(shù)；K為吞噬速率；m1為小鼠體質(zhì)量/g；m2為小鼠肝質(zhì)量/g；m3為脾質(zhì)量/g；OD1為2 min時(shí)測(cè)定的光密度值；OD2為10 min時(shí)測(cè)定的光密度值。

1.3.3 遲發(fā)型超敏反應(yīng)（delayed type hypersensitivity，DTH）的測(cè)定

試劑配制：體積分?jǐn)?shù)為1%的2,4-二硝基氟苯（2,4-dinitrofluorobenzene，DNFB）20 mg，將預(yù)先配好的丙酮橄欖油溶液（丙酮與橄欖油體積比1∶1），各1 mL倒入小瓶?jī)?nèi)，蓋好并封口，混勻后即可使用，現(xiàn)配現(xiàn)用。脫毛劑配制：硫化鋇10 g、淀粉2 g，加水至100 mL，混勻后即用。

測(cè)定方法：小鼠造模后于給藥第13天用脫毛劑對(duì)小鼠腹部進(jìn)行去毛處理，面積約2 cm×2 cm，次日以1% DNFB 30 μL涂于小鼠腹部脫毛處致敏，次日強(qiáng)化，于致敏第4天（給藥第18天）小鼠右耳兩側(cè)均勻涂以1% DNFB 20 μL，丙酮橄欖油溶劑涂于小鼠左耳兩側(cè)，于攻擊24 h后處死小鼠，剪下兩耳，稱(chēng)質(zhì)量，按下公式計(jì)算耳腫脹率。

1.3.4 生化指標(biāo)的檢測(cè)

獲取血液樣本制備血清后，利用ELISA針對(duì)性檢測(cè)試劑盒測(cè)定血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α、IgG的活性。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 17.0軟件利用方差分析完成統(tǒng)計(jì)處理。結(jié)果以±s表示；不同劑量組間與模型組的采用方差分析比較，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)免疫抑制小鼠臟器指數(shù)的影響

表1 WGPA聯(lián)合益生菌植物乳桿菌C88對(duì)免疫抑制小鼠臟器指數(shù)的影響Table 1 Effect of WGPA combined withL. plantarum indices in CY-induced micee

胸腺及脾臟屬于重要的免疫器官，胸腺及脾臟指數(shù)可以指明機(jī)體的免疫功能及預(yù)后情況。由表1可知，人參多糖WGPA聯(lián)合植物乳桿菌C88對(duì)衰老小鼠臟器指數(shù)的影響，結(jié)果表明模型組小鼠各臟器指數(shù)與正常對(duì)照組相比均有所降低。人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌C88低、中、高劑量組小鼠胸腺指數(shù)明顯增加，且差異顯著，具有一定的劑量依賴(lài)性；單獨(dú)WGPA組胸腺指數(shù)增加不明顯。WGPA給藥組及不同劑量的聯(lián)合用藥組小鼠與模型組相比脾臟指數(shù)均明顯增加。人參多糖聯(lián)合益生菌C88高量組小鼠腎臟指數(shù)明顯增加。另外，人參多糖聯(lián)合益生菌給藥組小鼠胸腺、脾臟、心臟，肝臟指數(shù)均高于多糖單獨(dú)給藥組。表明人參多糖聯(lián)合益生菌C88可明顯改善環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠的免疫器官指數(shù)。

2.2 對(duì)免疫抑制小鼠巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)的影響

利用碳清除實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同樣品對(duì)免疫抑制小鼠巨噬細(xì)胞吞噬活性的影響，結(jié)果如圖1所示，模型組小鼠吞噬指數(shù)a與正常對(duì)照組相比均明顯下降，且差異顯著，表明免疫抑制小鼠造模成功。與模型組相比，人參多糖WGPA聯(lián)合益生菌C88中，高劑量組吞噬指數(shù)明顯高于模型對(duì)照組（P＜0.05或P＜0.01），且具有劑量依賴(lài)性。當(dāng)高劑量組WGPA 100 mg/kg與C88 1010CFU/mL聯(lián)合用藥時(shí)，小鼠吞噬細(xì)胞吞噬指數(shù)可恢復(fù)到正常小鼠水平。同時(shí)由結(jié)果可知，人參多糖聯(lián)合益生菌共同用藥作用結(jié)果強(qiáng)于多糖單獨(dú)用藥。因此人參多糖聯(lián)合益生菌可增強(qiáng)免疫抑制小鼠的吞噬細(xì)胞的吞噬能力，達(dá)到增強(qiáng)免疫的效果。

2.3 對(duì)免疫抑制小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響

DNFB所致小鼠耳廓遲發(fā)型超敏反應(yīng)屬于典型的Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)模型，是由抗原誘導(dǎo)的一種細(xì)胞性免疫應(yīng)答，作為遲發(fā)型超敏反應(yīng)模型廣泛用于藥物實(shí)驗(yàn)。由圖2可知，模型組小鼠耳腫脹度與正常組小鼠相比明顯下降，表明環(huán)磷酰胺降低小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的模型成功。與模型組小鼠相比，不同給藥組小鼠耳腫脹度均明顯增加，且WGPA聯(lián)合益生菌C88不同劑量給藥組對(duì)小鼠耳腫脹度的影響具有劑量依賴(lài)性，聯(lián)合用藥高劑量組小鼠耳腫脹率均高于多糖單獨(dú)用藥。當(dāng)高劑量組WGPA 100 mg/（kg·d）與C88 1010CFU/mL聯(lián)合使用時(shí)，免疫抑制小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)結(jié)果與正常對(duì)照組小鼠相當(dāng)，耳腫脹率為3.5%。

圖2 WGPA聯(lián)合益生菌C88對(duì)免疫抑制小鼠耳腫脹率的影響Fig. 2 Effect of WGPA combined with L. plantarum C88 on ear swelling in CY-treated mice

2.4 對(duì)免疫抑制小鼠血清免疫指標(biāo)的影響

表2 WGPA聯(lián)合益生菌C88對(duì)免疫抑制小鼠血清IL-2、IL-4及IL-1100的影響Table 2 Effect of WGPA combined withL. plantaarruumm C88 on serum cytokine levels in CY-treated mice

模型組小鼠血清IL-2和IL-4與正常對(duì)照組相比含量明顯下降，IL-10含量明顯增加，表明環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制模型造模成功。結(jié)果如表2所示，WGPA聯(lián)合益生菌C88中、高劑量組免疫抑制小鼠血清IL-2含量與模型組小鼠相比明顯增加，差異顯著或極顯著（P＜0.05或P＜0.01）。與模型組相比，WGPA聯(lián)合益生菌C88中、高劑量組免疫抑制小鼠血清IL-4含量顯著增加（P＜0.01），且與正常組相當(dāng)，分別可達(dá)43.08、45.15 pg/mL。人參多糖組及人參多糖聯(lián)合益生菌C88低、中、高劑量免疫抑制小鼠血清IL-10含量與模型組小鼠相比含量明顯降低，且差異極顯著（P＜0.01），當(dāng)用藥質(zhì)量濃度為高劑量，人參多糖100 mg/（kg·d）聯(lián)合C88 1010CFU/mL時(shí)，小鼠血清IL-10質(zhì)量濃度可恢復(fù)至正常小鼠水平，為57.98 pg/mL。

WGPA聯(lián)合益生菌C88對(duì)免疫抑制小鼠血清IFN-γ、TNF-α及IgG質(zhì)量濃度的影響如表3所示，由結(jié)果可知模型組小鼠血清IFN-γ、TNF-α及IgG質(zhì)量濃度與正常組小鼠相比均明顯下降。各用藥組免疫抑制小鼠血清IFN-γ質(zhì)量濃度與模型組相比含量明顯增加，WGPA單獨(dú)給藥組與聯(lián)合用藥低劑量給藥組小鼠血清IFN-γ質(zhì)量濃度呈增加趨勢(shì)，分別為168.18 pg/mL和177.25 pg/mL，中、高劑量組IFN-γ質(zhì)量濃度均高于正常組小鼠和多糖單獨(dú)用藥組。與模型組相比，WGPA組免疫抑制小鼠血清TNF-α質(zhì)量濃度明顯上升，且差異顯著（P＜0.05）。WGPA聯(lián)合益生菌C88低、中、高劑量組小鼠血清TNF-α質(zhì)量濃度與模型組相比差異極顯著（P＜0.01），高劑量組T NF-α含量恢復(fù)值與正常對(duì)照組大致相當(dāng)，質(zhì)量濃度可達(dá)268.65 pg/mL。對(duì)于環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的小鼠血清IgG含量的降低，WGPA單獨(dú)用藥組及不同劑量的聯(lián)合用藥組均可使IgG的含量有不同程度的恢復(fù)，差異顯著或極顯著（P＜0.05或P＜0.01）。另外，WGPA聯(lián)合益生菌C88低、中、高劑量組對(duì)免疫抑制小鼠血清IgG的影響具有劑量依賴(lài)性，分別為564.54、623.96、716.62 ng/mL。由此表明人參多糖聯(lián)合益生菌對(duì)環(huán)磷酰胺所致免疫功能的抑制有一定的改善作用，且作用活性強(qiáng)于WGPA單獨(dú)用藥組。

表3 WGPA聯(lián)合益生菌C88 對(duì)免疫抑制小鼠血清IFN-γ、TTNNFF--α及IIggGG質(zhì)量濃度的影響Table 3 Effect of WGPA combined withL. plantarum TTNNFF--α and IgG levels in serum of CY-treated mice

3 討 論

碳粒廓清實(shí)驗(yàn)是一種最常用于檢測(cè)巨噬細(xì)胞吞噬能力的檢測(cè)方法，通過(guò)測(cè)定血液中碳粒的消失速率反映巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬異物的能力，從而評(píng)價(jià)機(jī)體的非特異性免疫功能。本研究采用碳粒廓清實(shí)驗(yàn)檢測(cè)WGPA聯(lián)合植物乳桿菌C88對(duì)機(jī)體單核-巨噬細(xì)胞吞噬能力的影響，結(jié)果顯示人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌C88可顯著提高免疫抑制小鼠的吞噬指數(shù)，且作用效果明顯高于單獨(dú)人參多糖WGPA組，即人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌C88可提高免疫抑制小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬能力，從而增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫功能。

DTH由效應(yīng)T細(xì)胞介導(dǎo)，屬于細(xì)胞免疫反應(yīng)。本研究利用DNFB誘導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)模型，其原理是機(jī)體接觸到小分子抗原DNFB后會(huì)產(chǎn)生特異性致敏淋巴細(xì)胞，當(dāng)有相應(yīng)的過(guò)敏原接觸皮膚后致敏淋巴細(xì)胞會(huì)釋放出多種因子引發(fā)以單個(gè)核細(xì)胞浸潤(rùn)為主的炎癥反應(yīng)。有研究表明多糖可拮抗環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的DTH減弱，使小鼠耳腫脹率恢復(fù)正常。本研究結(jié)果表明WGPA聯(lián)合植物乳桿菌C88可明顯增強(qiáng)免疫抑制小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)，并與正常組小鼠水平相當(dāng)。因?yàn)镈TH的發(fā)生與效應(yīng)T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及其產(chǎn)生的細(xì)胞因子或細(xì)胞毒性介質(zhì)有關(guān)，所以WGPA聯(lián)合植物乳桿菌C88可能通過(guò)增強(qiáng)T細(xì)胞向效應(yīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)化及增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的活性來(lái)發(fā)揮對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的促進(jìn)作用。由此證明WGPA聯(lián)合植物乳桿菌C88可增強(qiáng)小鼠的細(xì)胞免疫作用。另外，聯(lián)合用藥中、高劑量組作用效果明顯高于多糖單獨(dú)用藥組。

研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥組作用效果明顯高于WGPA單獨(dú)用藥組，且小鼠血清IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α含量較環(huán)磷酰胺免疫抑制組小鼠明顯升高，并具有劑量依賴(lài)性。表明人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌C88可促進(jìn)免疫細(xì)胞的增殖及分化，調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞因子的釋放從而增強(qiáng)免疫功能。已有類(lèi)似的報(bào)道證明碳水化合物與益生菌聯(lián)合用藥對(duì)于增強(qiáng)機(jī)體免疫具有更好地作用效果，Zhang Qin等[22]將枯草芽孢桿菌與低聚果糖為研究對(duì)象，分別檢測(cè)了兩者分別單獨(dú)用藥或聯(lián)合用藥對(duì)海參免疫功能的影響，證明兩者對(duì)于增強(qiáng)機(jī)體免疫功能方面存在協(xié)同作用的效果。IL-10可擾亂Th1細(xì)胞 因子的釋放，同時(shí)影響不用類(lèi)型免疫細(xì)胞的增殖及分化[23]。已有研究表明多糖對(duì)于抑制IL-10的分泌起著重要作用[24]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌C88低、中、高劑量組均可明顯降低免疫抑制小鼠血清IL-10的含量，當(dāng)聯(lián)合用藥為高劑量組時(shí)，IL-10含量可恢復(fù)至正常小鼠水平，其作用效果明顯強(qiáng)于WGPA單獨(dú)用藥組。IgG、IgA、IgM是主要的免疫球蛋白，參與補(bǔ)體激活、調(diào)理作用及毒素的中和等。越來(lái)越多的研究表明多糖可通過(guò)促進(jìn)IgG、IgA、IgM的產(chǎn)生來(lái)加強(qiáng)體液免疫[25]。本研究結(jié)果顯示人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌C88或人參多糖單獨(dú)用藥組均可明顯提高免疫抑制小鼠血清IgG的含量，聯(lián)合用藥中、高劑量組小鼠血清IgG水平可恢復(fù)至正常小鼠水平，表明WGPA聯(lián)合植物乳桿菌C88可增強(qiáng)體液免疫。因此通過(guò)對(duì)免疫抑制小鼠血清免疫指標(biāo)的檢測(cè)可知，人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌C88增強(qiáng)免疫抑制小鼠的細(xì)胞免疫和體液免疫。

綜上所述，人參多糖聯(lián)合植物乳桿菌C88可通過(guò)增強(qiáng)免疫抑制小鼠的免疫器官指數(shù)、巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)及改善免疫抑制小鼠血清免疫指標(biāo)，從而從非特異性免疫，細(xì)胞免疫及體液免疫三方面起到增強(qiáng)免疫抑制小鼠免疫功能的作用，另外，WGPA聯(lián)合植物乳桿菌C88免疫增強(qiáng)效果明顯高于人參多糖單獨(dú)給藥組，兩者可能存在疊加或協(xié)同的免疫效果。

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Immunomodulatory Effects of Ginseng Polysaccharides Combined with Lactobacillus plantarum C88

LIU Chunhong1, WANG Xiaohui2, GAO Lei2, DUAN Cuicui2, ZHAO Yujuan2, NIU Chunhua2, LUAN Chang2, LI Shengyu1,*
(1. Special Education College, Changchun University, Changchun 130022, China; 2. Institute of Agro-Food Technology, Jilin Provincial Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130033, China)

In this study, a mouse model of cyclophosphamide (CY)-induced immunosuppression was used to evaluate the immunomodulatory effects of water-soluble ginseng polysaccharides (WGPA) combined with Lactobacillus plantarum C88. The mice was administered with WGPA alone and combined with L. plantarum C 88 by gavage, respectively. The serum levels of interleukin-2 (IL-2), interleukin-4 (IL-4), interleuk in-10 (IL-10), interferon-γ (IFN-γ), tumor necrosis factor-α (TNF-α) and immunoglobulin G (IgG) in mice were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The p hagocytic index of pha gocytes was also examined by carbon clearance test. The results showed that WGPA combined with Lactobacillus plantarum C88 could signifi cantly enhance the phagocytic capacity of phagocytes. IL-2, IL-4, IFN-γ, TNF-α and IgG levels were signifi cantly increased, whereas IL-10 level was signifi cantly decreased in a dose-dependent manner. In addition, the immunomodul atory effect of the combined treatment was signifi cantly stronger than that of WGPA alone. In conclusion, WGPA combined with L. plantarum C88 has certain immunomodulatory effects.

Lactobacillus plantarum; ginseng polysaccharides; prebiotic; immunomodulatory activity

10.7506/spkx1002-6630-201611035

TS202.1

A

2015-08-28

國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（奶牛）產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)（CARS-37）；吉林省世行貸款農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全項(xiàng)目（2011-Y35）；吉林省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程優(yōu)秀創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（c42070302）

劉春紅（1976—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)楣δ苁称费芯颗c開(kāi)發(fā)。E-mail：lisy720@163.com

*通信作者：李盛鈺（1977—），男，副研究員，博士，研究方向?yàn)榘l(fā)酵食品及乳品加工。E-mail：lisy720@126.com