梁 鳳，宋 慧,2,*，周家生，郭 超，甄 東，張彤瑤，曾巧莉，張愛龍（.吉林農(nóng)業(yè)大學生命科學學院，吉林 長春 308；2.食藥用菌教育部工程研究中心，吉林 長春 308）

金針菇菇腳對肉雞血清生化指標和脂肪沉積的影響

梁 鳳1，宋 慧1,2,*，周家生1，郭 超1，甄 東1，張彤瑤1，曾巧莉1，張愛龍1
（1.吉林農(nóng)業(yè)大學生命科學學院，吉林 長春 130118；2.食藥用菌教育部工程研究中心，吉林 長春 130118）

目的：研究金針菇菇腳（Flammulina velutipes stembase，F(xiàn)VS）對Arbor Acres（AA）肉雞血清生化指標、腹脂沉積、肝臟以及肌肉中脂肪含量的影響。方法：選用1 日齡AA肉雞270 羽，隨機分為5 個處理組（每個處理組3 個重復，每個重復18 只）：空白組（飼喂基礎日糧）、抗生素組（基礎日糧＋5 mg/kg黃霉素）、3 個水平的FVS組（基礎日糧＋2%、4%、6% FVS，均為質(zhì)量分數(shù)，下同），實驗期為42 d。結果：1）與空白組相比，日糧中添加2%和6%的FVS可顯著降低肉雞血清中甘油三酯（triglyceride，TG）含量（P＜0.05）；2）各劑量的FVS均可降低21 日齡肉雞血清中總膽固醇（total cholesterol，TC）含量（P＜0.05），顯著提高21 日齡肉雞血清中瘦素（leptin，LEP）含量（P＜0.05），而對高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平無顯著影響（P＞0.05）；3）與空白組相比，F(xiàn)VS可顯著提高肉雞體質(zhì)量（P＜0.05），各劑量的FVS可明顯降低胸肌、腿肌、肝臟脂肪含量，而各組肉雞糞便中脂肪含量無顯著差異（P＞0.05）；4）與空白組相比，日糧中添加4%和6%的FVS可顯著降低42 日齡肉雞腹脂率（P＜0.05），日糧中添加2%和6%的FVS可顯著提高42 日齡肉雞的激素敏感脂肪酶（hormone-sensitive lipase，HSL）活力（P＜0.05）。結論：在肉雞飼糧中添加FVS能夠促進肉雞生長，同時起到一定的降血脂和減少機體脂肪沉積的作用。

金針菇菇腳；肉雞；血清生化指標；脂肪沉積

高脂飲食是造成高脂血癥的一個關鍵因素，隨著人們飲食結構的改變，越來越多的人患上高脂血癥[1]。雞肉是人們餐桌上最受歡迎的菜肴之一，在我國禽肉已成為僅次于豬肉的第二大肉類消費食品，而體內(nèi)脂肪過多是肉雞養(yǎng)殖中普遍存在的問題[2-3]。目前應用的一些降脂類調(diào)節(jié)劑在降低脂肪沉積的同時也降低了畜禽體質(zhì)量，導致飼料轉化率降低。因此，調(diào)節(jié)動物性產(chǎn)品中蛋白質(zhì)和脂肪的合理沉積已經(jīng)成為當前研究的熱點之一[4]。同時，隨著生活水平的不斷提高，人們不僅注重美味，而且更加注重畜禽產(chǎn)品的安全。20世紀40年代末，人們發(fā)現(xiàn)四環(huán)素對動物生長具有促進作用，從而開創(chuàng)了以抗生素作為飼料添加劑的時代。但是，長期使用抗生素，即使?jié)舛群艿停矔@著增加畜禽的抗藥性[5-6]。

食用蘑菇中含有生理活性有益的化合物，是預防高脂飲食疾病的良好來源[7]。金針菇（Flammulina velutipes）學名毛柄金錢菌，又稱樸菇、智力菇等，是世界上著名的食藥兩用菌，林忠寧等[8]證明金針菇菇腳（Flammulina velutipes stembase，F(xiàn)VS）和菌糠可以提供優(yōu)質(zhì)的食物蛋白質(zhì)。同時有研究發(fā)現(xiàn)，金針菇菇腳中不僅含有降血脂的生物活性物質(zhì)——金針菇多糖，而且具有降低肥胖、便秘、糖尿病等慢性病發(fā)病率作用的膳食纖維也主要集中于金針菇菇腳中[9-11]。隨著我國金針菇栽培產(chǎn)業(yè)迅猛發(fā)展，到2010年，全國金針菇總產(chǎn)量已達184.8 萬t。金針菇生產(chǎn)過程中會產(chǎn)生大量的菇腳，目前尚未被合理利用，造成了嚴重的資源浪費問題[12]。本實驗室前期對FVS在Arbor Acres（AA）肉雞飼喂研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)VS不僅能提高肉雞的免疫功能，改善腸道微生態(tài)，同時還發(fā)現(xiàn)其可以降低肉雞腹脂率[13]。為此，本實驗以FVS作為飼料添加劑，研究FVS對AA肉雞血清生化指標、瘦素、腹脂沉積、肝臟以及肌肉中脂肪含量的影響，為其在肉雞生產(chǎn)中的合理應用提供理論基礎和實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

金針菇菇腳（FVS）由長春雪國高榕生物技術有限公司饋贈。金針菇的培育符合金針菇工廠生產(chǎn)標準化程序，新鮮期采摘，切割菇腳進行統(tǒng)一晾曬風干，60 ℃烘干至恒質(zhì)量，粉碎。對FVS的主要營養(yǎng)成分及有效活性成分進行了測定，結果詳見表1。

表1 FVS主要營養(yǎng)成分及有效活性成分含量Table 1 Main nutritional and active components of FVS

總膽固醇（total cholesterol，TC）試劑盒、甘油三酯（triglyceride，TG）試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）試劑盒 南京建成生物工程研究所；低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）試劑盒 北京北化康泰臨床實際有限公司；瘦素（leptin，LEP）酶聯(lián)免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒北京博奧拓達科技有限公司。

1.2 動物分組及處理

AA肉雞購自吉林省梅河口市德坤禽類食品有限公司。1 日齡健康、體質(zhì)量差異不顯著（P＞0.05）的AA肉雞270 只，隨機分為5 個處理組（每個處理組3 個重復，每個重復18 只）：空白組（飼喂基礎日糧）、抗生素組（基礎日糧＋5 mg/kg黃霉素）、3 個水平的FVS組（基礎日糧＋2%、4%、6% FVS，均為質(zhì)量分數(shù)，下同）。實驗前對雛舍及器具進行消毒，分籠飼養(yǎng)，自由采食和飲水，按常規(guī)飼養(yǎng)方法進行環(huán)境消毒、免疫接種與管理。雞舍溫度：第1周為32～35 ℃，第2周為27～30 ℃，第3周為22～25 ℃，第4周及以后為自然溫度（20～22 ℃）條件下飼養(yǎng)。第1周進行24 h光照，然后每天遞減1 h光照，直至每天光照時間為18 h，黑暗6 h。實驗在吉林農(nóng)業(yè)大學中藥材學院經(jīng)濟動物研究育雛室內(nèi)進行。飼喂日糧參照美國全國科學研究委員會（National Research Council，NRC）（1998）[14]中推薦的AA肉雞營養(yǎng)需要，分為1～21 、22～42 d兩個批次，不同劑量的FVS添加組按等蛋白質(zhì)、等能量的原則進行配制。肉雞的基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表2 日糧組成及營養(yǎng)水平Table 2 Composition and nutrient levels of basal diet

1.3 方法

1.3.1 樣品采集與制備

分別于實驗第21、42天08：00開始采樣，從每個處理隨機抓取9 只雞（每個重復3 只），稱體質(zhì)量后，割頸部動、靜脈屠宰采血，4 ℃、3 000×g離心15 min制備血清，后分裝于1.5 mL離心管中，－20 ℃冰柜保存，用于測定血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C、LEP含量。實驗期間每天記錄各組AA肉雞死亡只數(shù)，按照公式（1）計算肉雞成活率。

肉雞放血致死后，剖開腹腔，剝離腹脂稱質(zhì)量，按照公式（2）計算腹脂率。

將腹脂稱質(zhì)量后放于自封袋中，－20 ℃冰柜保存，用于測定激素敏感脂肪酶（hormone sensitive lipase，HSL）活力。摘取肝臟于－20 ℃冰柜保存，用于測定脂肪含量；在每只肉雞大約相同部位取相同大小的胸肌和腿肌樣品，用生理鹽水洗凈，濾紙吸干水分后剪碎，在60 ℃條件下烘干至恒質(zhì)量，粉碎后過40 目篩，用于測定脂肪含量。

1.3.2 指標測定方法

1.3.2.1 肉雞血清生化指標及LEP含量測定

血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量均參照試劑盒說明書方法，用722分光光度計采用比色法測定。血清中LEP含量參照ELISA試劑盒說明書，用M2000 pro酶標儀測定。

1.3.2.2 肉雞肝臟、肌肉脂肪含量測定

采用索氏抽提法測定肉雞肝臟、胸肌、腿肌中的脂肪含量[15]。

1.3.2.3 肉雞腹脂中HSL活力測定

肉雞腹脂中HSL活力的測定參照金宗濂[16]的方法。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

實驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2007初步整理后，采用SPSS 17.0軟件中的單因素方差分析（one-way analysis of variance，one-way ANOVA）法和Duncan’s多重比較進行分析，實驗結果以±s 表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 FVS對肉雞血清生化指標及LEP含量的影響

實驗期間，空白組肉雞的成活率為94.4%，2%、4%、6% FVS組肉雞的成活率分別為100%、94.4%、96.3%，而5 mg/kg黃霉素組肉雞的成活率則為98.1%，各組肉雞的成活率均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 FVS對肉雞血清生化指標及LEP含量的影響Table 3 Effect of FVS on serum biochemical indexes and LEP of broiler

由表3可知，在21 日齡時，與空白組相比，各劑量的FVS及5 mg/kg的黃霉素均可顯著降低肉雞血清中的TC含量及提高LEP含量（P＜0.05），且各劑量FVS組肉雞血清中的TC含量均顯著低于5 mg/kg黃霉素組（P＜0.05），而除6% FVS組外，2%、4% FVS組肉雞血清中的LEP含量與5 mg/kg黃霉素組間無顯著差異（P＞0.05）；與空白組相比，各組肉雞血清中的LDL-C、HDL-C含量無顯著差異（P＞0.05）。

在42 日齡時，與空白組相比，各組肉雞血清中的TC、LDL-C、HDL-C含量均無顯著差異（P＞0.05）。與空白組相比，6% FVS組肉雞血清中的LEP的含量顯著升高（P＜0.05）。

與空白組相比，2%、6% FVS可顯著降低21 日齡和42 日齡肉雞血清中的TG含量（P＜0.05）。

2.2 FVS對肉雞脂肪沉積的影響

由表4可知，在21 日齡時，與空白組相比，各劑量的FVS和5 mg/kg的黃霉素均可顯著提高肉雞體質(zhì)量（P＜0.05），4%、6% FVS組肉雞的體質(zhì)量與5 mg/kg黃霉素組間無顯著差異（P＞0.05），而2% FVS組肉雞的體質(zhì)量甚至顯著高于5 mg/kg黃霉素組（P＜0.05）。與空白組相比，6% FVS可顯著降低肉雞腹脂率（P＜0.05）；各劑量的FVS對肉雞肝臟脂肪含量均無顯著影響（P＞0.05），但可顯著降低肉雞胸肌、腿肌脂肪含量（P＜0.05）。與空白組相比，2%、6% FVS組可顯著提高肉雞腹脂中的HSL活力（P＜0.05）。

表4 FVS對肉雞脂肪沉積的影響Table 4 Effect of FVS on fat deposition of broilers

在42 日齡時，與空白組相比，4%、6% FVS組和5 mg/kg的黃霉素組肉雞的體質(zhì)量均顯著升高（P＜0.05），且6% FVS組肉雞的體質(zhì)量顯著高于5 mg/kg黃霉素組（P＜0.05）。與空白組相比，4%、6% FVS組肉雞的腹脂率顯著降低（P＜0.05），而5 mg/kg的黃霉素組肉雞的腹脂率卻顯著升高（P＜0.05）；各劑量的FVS均可顯著降低肉雞肝臟、胸肌、腿肌脂肪含量（P＜0.05），而5 mg/kg黃霉素僅對肉雞胸肌脂肪含量的降低起到一定作用（P＜0.05）。與空白組相比，各組肉雞腹脂中的HSL活力無顯著差異（P＞0.05）。

在21 日齡和42 日齡時，與空白組相比，各組肉雞的糞便脂肪含量均無顯著差異（P＞0.05）。

3 討論與結論

AA肉雞為美國愛拔益加公司產(chǎn)品。AA肉雞具有生長速率快、適應性強、飼料轉化率高等特點，適合肉用仔雞商品化、產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和農(nóng)村專業(yè)戶養(yǎng)殖。根據(jù)聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織的統(tǒng)計，目前世界上的商品肉雞大部分是42～48 d出欄，且肉雞體質(zhì)量可達到2.42 kg。本實驗中，空白組肉雞的成活率為94.4%，2%、4%、6% FVS組肉雞的成活率分別為100%、94.4%、96.3%，而5 mg/kg黃霉素組肉雞的成活率為98.1%；同時，各劑量的FVS均可明顯增加肉雞體質(zhì)量，即FVS的添加在增加肉雞體質(zhì)量的同時對肉雞的成活率無影響。

血清中TG、TC、HDL-C和LDL-C的含量都與脂類代謝狀況相關。TG、TC含量的高低反映了脂類代謝的吸收狀況，HDL-C、LDL-C含量反映了脂類在體內(nèi)的轉運狀況[17]。目前已發(fā)現(xiàn)多種食藥用真菌多糖具有降血脂功效[18]：金針菇多糖能有效降低體內(nèi)血脂水平，預防動脈粥樣硬化，增進人體血液循環(huán)[19]。占建波[20]在成功提取金針菇多糖后，建立高脂小鼠模型，最終模型結果表明金針菇多糖可以降低血脂。陳旭健等[18]證明紅菇多糖可使小鼠血液中TC、TG、LDL-C水平顯著降低，HDL-C顯著水平升高。Zhu Min等[21]報道，香菇多糖可降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平，提高HDL-C水平。本實驗結果表明，日糧中添加2%和6%的FVS可明顯降低肉雞血清中的TG、TC含量，這可能是FVS中金針菇多糖發(fā)揮作用的結果。肉雞血清中的LDL-C和HDL-C含量也分別有降低和升高趨勢，但未達到前人報道的差異程度，還需要進一步研究。

LEP是由白色脂肪細胞分泌的多肽激素，可影響機體許多生理和代謝過程[22]。有文獻報道，金針菇中有較高含量的鋅[23]；同時有文獻報道，膳食中鋅含量的增加會促進血清瘦素水平升高[24]。本實驗結果表明，日糧中添加FVS可明顯提高肉雞血液中LEP含量，這可能是由于FVS中的鋅增加促進了LEP的分泌，進而加速了脂肪的分解，減少了脂肪的沉積。

顧志良等[25]研究發(fā)現(xiàn)，初生雛雞自由采食1 周后，腿部、頸部、胸部皮下開始出現(xiàn)脂肪，腹部脂肪一般在2 周齡左右出現(xiàn)，在2～7 周齡間也呈上升趨勢。同時，肉雞的體脂形成表現(xiàn)出一定的規(guī)律性，會隨著生長發(fā)育的推進而呈現(xiàn)出脂肪總蓄積量上升的趨勢，且受到脂肪合成和分解的動態(tài)調(diào)控[26]。肉雞的脂肪代謝及調(diào)控特點與哺乳類動物不同，肉雞脂肪酸合成的主要場所是肝臟，雞體脂肪沉積所需的脂肪酸大多來自于肝臟合成的脂肪酸，因此，肉雞肝臟脂肪含量也是反映肉雞脂肪代謝狀況的重要指標[3]。動物體內(nèi)脂肪代謝始終處于動態(tài)平衡之中，肝臟、脂肪組織和血漿中的脂質(zhì)水平是相互聯(lián)系、相互影響的[27]。家禽脂肪組織發(fā)育和脂肪沉積取決于血漿中TG的水平[28]。Chen Jingjing等[29]研究表明杏鮑菇、香菇、側耳、金針菇等7 種蘑菇多糖可顯著降低脂質(zhì)堆積。本實驗結果表明，日糧中添加不同水平的FVS可明顯降低肉雞肝臟、胸肌和腿肌脂肪含量，可能是由于血清中TG含量的降低和FVS中降脂活性成分共同作用導致了肉雞的體脂沉積減少。

腹部是肉雞沉積脂肪的主要部位，肉雞腹脂約占體脂總量的22%。因此，腹脂沉積量可以在一定程度上反映肉雞機體脂肪代謝狀況[30]。尚紅梅等[31]研究表明，日糧中添加一定水平的小刺猴頭菌發(fā)酵浸膏多糖可降低肉雞的腹脂沉積，但不影響肉雞的生產(chǎn)性能。HSL是最早被發(fā)現(xiàn)和克隆的脂肪細胞內(nèi)分解TG的脂肪酶，是動物脂肪分解代謝的限速酶，并在脂質(zhì)代謝的多個環(huán)節(jié)發(fā)揮作用[32]。有研究發(fā)現(xiàn)，血清中的LEP含量與腹脂率成極強負相關[3]，且高濃度的LEP可增加HSL mRNA的表達[33]。在本實驗中，2%和6%的FVS可提高肉雞腹脂中的HSL活力，降低腹脂率，這表明FVS可能通過促進LEP分泌提高了HSL活力，進而降低了肉雞腹脂率。

綜合以上實驗結果表明，日糧中FVS的添加使肉雞血液中TG、TC含量和腹脂率降低以及胸肌、腿肌、肝臟中脂肪沉積的減少。這可能是瘦素含量的提高增加了脂解酶的活性，同時血清中脂質(zhì)水平的減少，降低了其在肝臟以及機體循環(huán)過程中的沉積。針對2%、6% FVS組較4% FVS組效果更為理想的結果，本課題組擬在后期進行脂肪分解、脂肪酸合成等脂代謝相關關鍵酶基因表達量的檢測，進行進一步的分析。

綜上所述，在AA肉雞的基礎日糧添加不同質(zhì)量分數(shù)的金針菇菇腳，可降低肉雞血液中TG、TC含量，提高LEP含量及HSL活力，降低肉雞肝臟、胸肌、腿肌脂肪含量。上述結果對金針菇菇腳的合理開發(fā)利用有一定的指導意義，金針菇菇腳降低肉雞體內(nèi)脂肪沉積的機理值得進一步研究。

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Effect of Flammulina velutipes Stembase on Serum Biochemical Indices and Fat Deposition in Broilers

LIANG Feng1, SONG Hui1,2,*, ZHOU Jiasheng1, GUO Chao1, ZHEN Dong1, ZHANG Tongyao1, ZENG Qiaoli1, ZHANG Ailong1
(1. College of Life Science, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China; 2. Engineering Research Center of Chinese Ministry of Education for Edible and Medicinal Fungi, Changchun 130118, China)

Experiments were conducted to study the effect of Flammulina velutipes stembase (FVS) on serum biochemical indexes, abdominal fat, and lipid c ontents in liver and muscle of broilers. A total of 270 one-day-old Arbor Acres broilers were randomly divided into 5 groups with 3 replicates of 18 chickens each: control group (basal diet), antibiotic group (basal diet + 5 mg/kg fl avomycin), and FVS groups at 3 levels (basal diets containing 2%, 4% and 6% FVS). The experimental period lasted 42 days. The results showed that: 1) dietary supplementation with 2% and 6% FVS signifi cantly decreased serum triglyceride (TG) (P < 0.05); 2) FVS at each concentration significantly reduced serum total cholesterol (TC) (P < 0.05), and increase the content of leptin (LEP) in serum (P < 0.05), although having no obvious effect on high density lipoprotein (HDL-C) or low density lipoprotein (LDL-C) (P > 0.05); 3) different treatment groups revealed a signifi cant increase in the body weight of broilers (P < 0.05) and a reduction of lipid contents in liver, thigh muscle, and breast muscle although no signifi cant effect on the excreta of broiler was found (P > 0.05); 4) the abdominal fat deposition was signifi cantly reduced in the broilers fed with 4% and 6% FVS (P < 0.05), and the activity of HSL was signifi cantly enhanced in the broilers fed with 2% and 6% FVS (P < 0.05). These results suggested that FVS could reduce serum lipid and lipid deposition in broilers.

Flammulina velutipes stembase (FVS); broiler; serum biochemical indexes; fat deposition

10.7506/spkx1002-6630-201611040

Q591.5

A

1002-6630（2016）11-0226-05

梁鳳, 宋慧, 周家生, 等. 金針菇菇腳對肉雞血清生化指標和脂肪沉積的影響[J]. 食品科學, 2016, 37(11): 226-230. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201611040. http://www.spkx.net.cn

LIANG Feng, SONG Hui, ZHOU Jiasheng, et al. Effect of Flammulina velutipes stembase on serum biochemical indices and fat deposition in broilers[J]. Food Science, 2016, 37(11): 226-230. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201611040. http://www.spkx.net.cn

2015-07-08

吉林省經(jīng)濟菌物創(chuàng)新平臺項目（2014-2016）

梁鳳（1988—），女，碩士研究生，研究方向為生物大分子功能與結構。E-mail：lfkaoyanbs@163.com

*通信作者：宋慧（1958—），女，教授，博士，研究方向為菌物生物化學。E-mail：songhuinongda@163.com