沈利民

(江蘇省鹽城市大豐人民醫(yī)院檢驗科　224100)

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·臨床研究·

出血熱抗體聯(lián)合外周血異型淋巴細胞檢測診斷流行性出血熱

沈利民

(江蘇省鹽城市大豐人民醫(yī)院檢驗科224100)

目的探討出血熱抗體聯(lián)合外周血異型淋巴細胞檢測在流行性出血熱診斷中的應(yīng)用。方法選取該院出血熱患者155例，采用金標法檢測出血熱抗體免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)，同時使用外周血涂片染色鏡檢分類異型淋巴細胞。 結(jié)果出血熱抗體陽性患者153例，陽性率98.7%。異型淋巴細胞患者152例，檢出率98.1%。結(jié)論出血熱抗體聯(lián)合外周血異型淋巴細胞檢測可明顯提高流行性出血熱診斷的準確性和及時性，尤其對輕型和非典型更有診斷價值，為臨床診治提供可靠依據(jù)。

流行性出血熱；出血熱抗體；異型淋巴細胞

流行性出血熱(EHF)又稱腎綜合征出血熱(HFRS)，其病變可累及全身臟器，臨床癥狀復(fù)雜，合并癥較多，以高熱、休克、出血、急性腎衰竭為主要癥狀，延誤治療可導(dǎo)致生命危險，因此對該病的及時、準確診斷非常重要[1]。實驗室檢查該病可見白細胞總數(shù)升高，出現(xiàn)異型淋巴細胞，血小板減少，尿蛋白陽性，腎功能損害，血清特異性抗體陽性等[2]。其中外周血涂片見異型淋巴細胞及血清出血熱抗體檢測在診斷中具有重要的指導(dǎo)作用?，F(xiàn)探討外周血涂片分類異型淋巴細胞及血清出血熱抗體聯(lián)合檢測的結(jié)果，報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選取該院2012年4月至2016年3月收治的流行性出血熱患者155例，男102例，女53例。

1.2試劑漢坦病毒抗體檢測試劑盒(膠體金法)，廈門波生生物技術(shù)有限公司提供，瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液，珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。

1.3方法(1)EDTA抗凝全血涂片干燥后，瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液染色15 min，晾干后油鏡下分類200個白細胞，計算異型淋巴細胞百分比。(2)出血熱抗體檢測嚴格按照試劑盒說明書操作。血清標本采用標本稀釋液1∶50稀釋，在反應(yīng)板加樣孔中加入稀釋好的標本70 μL，20 min后觀察結(jié)果。結(jié)果判定：對照線出現(xiàn)紫紅色線，免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)處出現(xiàn)紫紅色線為陽性；無紫紅色線為陰性。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率表示，兩兩比較使用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1155例患者出血抗體檢測結(jié)果比較見表1。

表1　　155例出血熱抗體檢測結(jié)果比較

2.2外周血涂片異型淋巴細胞檢測結(jié)果155例患者出血熱檢出異型淋巴細胞152例(98.1%)。異型淋巴細胞占10.0%以上在各型出血熱：輕型28例(93.3%)，中型65例(100.0%)，重型35例(100.0%)，危重型6例(100.0%)，非典型15例(93.8%)。另外輕型和非典型共有3例異型淋巴細胞比例，占5%～10%。各型間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

3　討　　論

異型淋巴細胞是在病毒感染、藥物反應(yīng)、結(jié)締組織病、免疫系統(tǒng)強應(yīng)激狀態(tài)或過敏原等因素刺激下，淋巴細胞增生并發(fā)生形態(tài)變化，表現(xiàn)為胞體增大，胞質(zhì)量增多，嗜堿性增強，細胞核母細胞化[3]。異型淋巴細胞已被證實主要為多克隆T淋巴細胞，少數(shù)為B 淋巴細胞，EHF致病過程存在細胞免疫反應(yīng)，CD8+T細胞為主要參與細胞，因而異型淋巴細胞可為其診斷提供依據(jù)[4]。異型淋巴細胞常分為3個型別：Ⅰ型(空泡型)，Ⅱ型(不規(guī)則型)，Ⅲ型(幼稚型)[5]。本研究155例中98.1%的患者可見異型淋巴細胞，以Ⅱ型為最多，Ⅰ型次之，Ⅲ型最少，多數(shù)患者各型同時存在。本組有2例患者在發(fā)熱初期外周血分類以中性粒細胞增多為主，未見異型淋巴細胞，第2天復(fù)查時可見。有研究表明異型淋巴細胞大于10%有臨床意義[6]。本研究雖有3例，但比例不到10%,還有2例未見，但是結(jié)合其他檢查仍能為臨床診斷提供參考。本組結(jié)果顯示，異型淋巴細胞的比例和形態(tài)與病情輕重無相關(guān)性，與有關(guān)報道不一致[7]。異型淋巴細胞的出現(xiàn)與多種病毒感染有關(guān)，所以外周血涂片提示異型淋巴細胞增多時，必須鑒別診斷，以防誤診[4]。

出血熱抗體檢測方法有多種，金標法是成熟的實驗診斷技術(shù)，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于臨床診斷和免疫抗體監(jiān)測，該方法簡便、快速、不受條件限制，適合基層單位使用。與免疫熒光法比較，膠體金法檢測EHF抗體的靈敏性和特異性分別為96.71%和98.72%，符合率為97.66%[8]。本組患者有2例EHF抗體檢測始終為陰性，可能引起感染的出血熱病毒主要有漢坦病毒和漢城病毒等[9]。由于本組試劑盒只檢測漢坦病毒抗體，患者可能感染了其他病毒，還可能與免疫應(yīng)答機制有關(guān)[10]。本組2例外周血涂片均見異型淋巴細胞，有2 例發(fā)熱初期檢測EHF抗體陰性，第3天檢測EHF抗體IgM弱陽性，所以對疑似患者要動態(tài)復(fù)查EHF抗體。對臨床癥狀不典型患者，異型淋巴細胞和出血熱抗體也有較高的檢出率[11]。

綜上所述，異型淋巴細胞雖然不是EHF所特有，但有極高的陽性率，金標法檢測EHF抗體具有較高的靈敏性和特異性，所以兩者結(jié)合可提高HFRS準確性和及時性，尤其對輕型和非典型出血熱更有臨床診斷價值。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.048

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2016-05-15)