譚啟東，張曉軒，叢 偉，殷銘陽(yáng)，秦思源，5，楊言川，徐前明，周東輝

（1.北京出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)物隔離場(chǎng)，北京　101312；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅蘭州　730046；3.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽合肥　230036；4.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，吉林長(zhǎng)春　130118；5.國(guó)家林業(yè)局野生動(dòng)物疫源疫病監(jiān)測(cè)總站，遼寧沈陽(yáng)　110034）

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我國(guó)西北地區(qū)奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)病血清流行病學(xué)調(diào)查及風(fēng)險(xiǎn)因素分析

譚啟東1，2，3，張曉軒2，4，叢 偉2，4，殷銘陽(yáng)2，秦思源2，4，5，楊言川2，徐前明3，周東輝2

（1.北京出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)物隔離場(chǎng)，北京101312；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅蘭州730046；3.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽合肥230036；4.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；5.國(guó)家林業(yè)局野生動(dòng)物疫源疫病監(jiān)測(cè)總站，遼寧沈陽(yáng)110034）

本研究旨在調(diào)查我國(guó)西北部的甘肅省和寧夏回族自治區(qū)奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染情況，分析影響其感染的風(fēng)險(xiǎn)因素。本次調(diào)查共采集奶牛血清1 657份，通過(guò)ELISA試劑盒檢測(cè)抗體，結(jié)果顯示總體感染率為8.09%。采用Logistic回歸分析，評(píng)估奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的風(fēng)險(xiǎn)因素，結(jié)果顯示奶牛所在的地區(qū)是影響奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的重要風(fēng)險(xiǎn)因素（P＜0.05）。本研究彌補(bǔ)了我國(guó)西北地區(qū)奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染數(shù)據(jù)的空白，對(duì)預(yù)防和控制雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染提供了幫助。

流行病學(xué)；雙芽巴貝斯蟲(chóng)；奶牛；ELISA；中國(guó)西北

牛巴貝斯蟲(chóng)病是一種蜱媒傳染病，主要通過(guò)牛巴貝斯蟲(chóng)和雙芽巴貝斯蟲(chóng)這兩種紅細(xì)胞內(nèi)寄生原蟲(chóng)傳播［1］。該病廣泛流行于熱帶和亞熱帶地區(qū)，可造成重大的經(jīng)濟(jì)損失［2］，已被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為須通報(bào)疫病。牛感染后的臨床癥狀主要表現(xiàn)為發(fā)熱、貧血、黃疸和血紅蛋白尿［3］。在我國(guó)，雙芽巴貝斯蟲(chóng)（B. bigemina）是引起牛巴貝斯蟲(chóng)病最主要的一個(gè)種屬［4］。雙芽巴貝斯蟲(chóng)可以通過(guò)牛蜱屬的許多種屬傳播。據(jù)報(bào)道，在我國(guó)，微小扇頭蜱是唯一可以感染牛的種屬［4］。

顯微鏡檢測(cè)曾被用于診斷牛巴貝斯蟲(chóng)病的感染，但此方法只適用于急性感染，具有一定的局限性［5］?，F(xiàn)如今，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）因其檢測(cè)特異性抗體的高敏感性而被廣泛用于診斷急慢性雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染［6］。

世界范圍內(nèi)許多國(guó)家已經(jīng)有關(guān)于奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的報(bào)道［1，7-9］。而在我國(guó)，關(guān)于奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的報(bào)道較少［10］。我國(guó)西北地區(qū)包括新疆維吾爾自治區(qū)、寧夏回族自治區(qū)、青海省、甘肅省和陜西省等是重要的畜牧養(yǎng)殖區(qū)，畜牧業(yè)是該地區(qū)經(jīng)濟(jì)的重要組成部分。然而目前除了在新疆有關(guān)于牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染情況的報(bào)道外［11］，在其它地區(qū)鮮有報(bào)道。因此，本研究的目的在于檢測(cè)寧夏回族自治區(qū)和甘肅省奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染情況，分析影響其感染的風(fēng)險(xiǎn)因素。

1　材料與方法

1.1調(diào)查區(qū)域

本研究選取寧夏回族自治區(qū)吳忠市、青銅峽市，以及甘肅省榆中縣作為調(diào)查對(duì)象。吳忠市（35o14′～39o23′ N，104o17′～107o39′ E）坐落于寧夏中部地區(qū)，屬溫帶大陸性半干旱季風(fēng)氣候，年平均氣溫為9.4 ℃。青銅峽市（37o36′～38o15′ N，105o21′～106o21′ E）為縣級(jí)市，氣候與吳忠市相仿，年平均氣溫為9.2 ℃。榆中縣（35o34′～36o26′ N，103o49′～104o34′ E）位于甘肅省中部，大陸性氣候顯著，年平均氣溫為6.7 ℃。奶牛養(yǎng)殖業(yè)在這些區(qū)域的畜牧業(yè)中占有重要地位。

1.2血清樣品

2013年分別在甘肅榆中（751份），寧夏青銅峽（450份）、吳忠（456份），采集1 657份奶牛血清樣品。血清樣品經(jīng)4 000 r/min離心10 min后轉(zhuǎn)移到新的離心管中，于-20 ℃保存待用。記錄奶牛的年齡、胎次等重要信息。

1.3血清學(xué)檢測(cè)

血清樣品采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)雙芽巴貝斯蟲(chóng)抗體。試劑盒為瑞典Svanova生物科技生產(chǎn)的雙芽巴貝斯蟲(chóng)抗體檢測(cè)ELISA商品試劑盒。按照說(shuō)明書(shū)操作［12］，每板設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照。若有可疑孔，則進(jìn)行復(fù)檢。

1.4數(shù)據(jù)分析

本研究采用二元logistic回歸分析方法，研究采樣地區(qū)、年齡和胎次等3個(gè)與雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染有關(guān)的潛在風(fēng)險(xiǎn)因素，以P＜0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的判斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)所有的數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件PASW Statistics 18.0（SPSS Inc.，IBM Corporation，Somers，NY）進(jìn)行分析，并提供結(jié)果的優(yōu)勢(shì)比（OR）和95%的置信區(qū)間（CI）。OR值等于1，表示該因素對(duì)疾病的發(fā)生不起作用；OR值大于1，表示該因素是一個(gè)危險(xiǎn)因素；OR值小于1，表示該因素是一個(gè)保護(hù)因素。

2　結(jié)果

研究顯示，在1 657份奶牛血清樣品中，共檢測(cè)出134份雙芽巴貝斯蟲(chóng)陽(yáng)性樣品，總體陽(yáng)性率為8.09%，其中青銅峽市、吳忠市和榆中縣的感染率分別為3.78%、7.68%和10.92%。本研究將年齡分為yr≤3和yr＞3兩組，其陽(yáng)性率分別為6.09%和11.69%，從中可以看出成年奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染率高于犢牛和青壯年牛。胎次方面，本研究將胎次同樣分為兩組，分別為≤1胎和≥2胎，其陽(yáng)性率分別為6.23%和10.56%，說(shuō)明奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染率隨胎次的增加而增高（表1）。

運(yùn)用Logistic回歸分析評(píng)估影響奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的風(fēng)險(xiǎn)因素，結(jié)果顯示奶牛所處的地區(qū)是影響雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的一個(gè)重要風(fēng)險(xiǎn)因素，年齡和胎次并不是顯著風(fēng)險(xiǎn)因素。吳忠市（OR=2.118，95% CI=1.168～3.838，P=0.013） 和榆 中 縣（OR=3.122，95% CI=1.826～5.337，P＜0.001）的奶牛相對(duì)于青銅峽市的奶牛來(lái)說(shuō)，面臨著更高的雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染風(fēng)險(xiǎn)（表2）。

表1　不同地區(qū)、年齡和胎次的奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)的血清陽(yáng)性情況

表2　地區(qū)因素作為影響奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的風(fēng)險(xiǎn)因素優(yōu)勢(shì)比

3　討論

在本研究中，共有134份血清樣品檢出雙芽巴貝斯蟲(chóng)抗體，總體感染率為8.09%。這一結(jié)果顯著低于與我國(guó)相鄰的泰國(guó)（69.1%）［1］和越南（54%）［8］的感染率，同時(shí)也低于坦桑尼亞（34.9%）［9］和巴西（34%）［7］。和國(guó)內(nèi)一些省份的報(bào)道相比，這一陽(yáng)性率同樣低于貴陽(yáng)奶牛的感染率（34.03%）［10］，但是比新疆的略高一些（7.17%）［11］。引起這些差異的原因可能歸結(jié)于媒介蜱的地區(qū)分布、氣候條件，以及檢測(cè)方法的敏感性等。

本研究表明，在調(diào)查區(qū)域，雙芽巴貝斯蟲(chóng)病廣泛流行于奶牛中，同時(shí)揭示了地區(qū)因素是影響奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的重要風(fēng)險(xiǎn)因素。Logistic回歸分析顯示，榆中縣奶牛感染雙芽巴貝斯蟲(chóng)病的風(fēng)險(xiǎn)是青銅峽市的3.12倍，而吳忠市則是青銅峽市的2.12倍。由于被調(diào)查地區(qū)的氣候條件相似，因此推測(cè)流行情況存在顯著地區(qū)差異的原因可能歸結(jié)于農(nóng)場(chǎng)管理，比如環(huán)境衛(wèi)生、草料情況，以及蜱的防控情況等。

年齡分組中，yr＞3年齡段的奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染率最高，為11.69%，高于yr≤3的犢牛和青壯年牛的感染率（6.09%）。這表明3歲以上的成年奶牛相對(duì)于3歲以下的奶牛有著更高和相對(duì)穩(wěn)定的陽(yáng)性率。這可能是由于犢牛攜帶母源抗體［13］，有著更強(qiáng)的抵抗力。這與之前的報(bào)道相一致［14］。然而，雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染與年齡之間并無(wú)顯著聯(lián)系。

本研究結(jié)果顯示，雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染率隨著胎次的增加而增高。這與年齡分組的結(jié)果基本一致，因奶牛隨著年齡的增長(zhǎng)其產(chǎn)仔次數(shù)也在增加。同樣，雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染與胎次之間無(wú)顯著聯(lián)系，這表明胎次因素并不是影響奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)感染的風(fēng)險(xiǎn)因素。

總之，本研究結(jié)果反應(yīng)了甘肅省和寧夏回族自治區(qū)普遍存在奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染，應(yīng)采取有效防控手段和管理方法，控制該地區(qū)奶牛雙芽巴貝斯蟲(chóng)的感染。

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（責(zé)任編輯：朱迪國(guó)）

Seroepidemiological Survey and Risk Factors Analysis of Babesia bigemina Infection in Dairy Cattle in Northwest China

Tan Qidong1，2，3，Zhang Xiaoxuan2，4，Cong Wei2，4，Yin Mingyang2，Qin Siyuan2，4，5，Yang Yanchuan2，Xu Qianming3，Zhou Donghui2
（1. Animal Quarantine Station of Beijing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau，Beijing 101312；2. State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology，Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province，Lanzhou Veterinary Research Institute，CAAS，Lanzhou，Gansu 730046；3. College of Animal Science and Technology，Anhui Agricultural University，Hefei，Anhui 230036；4. College of Animal Science and Technology，Jilin Agricultural University，Changchun，Jilin 130118；5. General Station for Surveillance of Wildlife Diseases & Wildlife Borne Diseases，State Forestry Administration（SFA），Shenyang，Liaoning 110034）

To investigate Babesia bigemina infection and to assess associated risk factors in dairy cattle in northwest China of Gansu Province and Ningxia Hui Autonomous Region， a total of 1 657 serum samples were collected and examined for the specific antibodies to B. bigemina by commercial available ELISA kits. The overall B. bigemina seroprevalence was 8.09%（134/1 657）. Risk factors associated with B. bigemina infection were evaluated by multivariate logistic regression analysis，and the results showed that the geographical region was regarded as an important risk factor with B. bigemina infection in the present study（P＜ 0.05）. This study filled the blanks of epidemiological data about B. bigemina infection and would be helpful to prevent further B. bigemina infection in dairy cattle in northwest China.

seroprevalence；Babesia bigemina；dairy cattle；ELISA；northwest China

S858.23

B

1005-944X（2016）09-0020-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2016.09.007

國(guó)家科技支撐計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目（2012BAD12B07）；甘肅省創(chuàng)新研究小組科學(xué)基金（1210RJIA0 06）

周東輝