艾鑫衛(wèi)，胡思平，龔?qiáng)瑠S文鄴，楊潔球，王　力，廖照江，*

（1.三峽大學(xué)生物與制藥學(xué)院，湖北 宜昌 443000；2.宜昌人?？诜腆w制劑廠，湖北 宜昌 443000）

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定各生長(zhǎng)期紫蘇中酚類物質(zhì)的含量

艾鑫衛(wèi)1，胡思平1，龔?qiáng)瑠?，黃文鄴1，楊潔球2，王力1，廖照江1，*

（1.三峽大學(xué)生物與制藥學(xué)院，湖北 宜昌 443000；2.宜昌人?？诜腆w制劑廠，湖北 宜昌 443000）

目的：建立一種簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，同時(shí)分離與檢測(cè)紫蘇葉、莖和根中酚類化合物含量，探討紫蘇各部位酚類物質(zhì)的累積規(guī)律，為確定紫蘇各部位最佳采收時(shí)期提供依據(jù)。方法：對(duì)紫蘇進(jìn)行人工栽培，樣品分期采集，采集后的樣品經(jīng)乙醇提取，采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行分析，對(duì)影響色譜、質(zhì)譜的重要參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，通過對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時(shí)間及質(zhì)譜分析，確定相應(yīng)的化合物；通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，以其中13 種酚類化合物為主要參考指標(biāo)，觀察它們?cè)诟鞑课坏膭?dòng)態(tài)含量變化。結(jié)果：鑒定出化合物：咖啡酸、咖啡酸-3-O-葡萄糖苷、迷迭香酸、迷迭香酸-3-O-葡萄糖苷、木犀草素、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸、木犀草素-7-O-二葡萄糖苷酸、芹菜素、芹菜素-7-咖啡?；咸烟擒铡⑶鄄怂?7-O-二葡萄糖苷、野黃岑素-7-O-二葡萄糖苷、迷迭香酸甲酯，以上化合物中酚酸及其糖苷化合物含量呈先降低，至結(jié)果期急劇上升達(dá)到最大，黃酮及其糖苷化合物含量則遞增至結(jié)果期達(dá)到最大。其中鑒定出迷迭香酸和木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸分別在結(jié)果期達(dá)到最大，含量分別為21.41 mg/g和19.89 mg/g，結(jié)果期葉部位總酚類含量達(dá)到最大，含量為47.50 mg/g。結(jié)論：通過對(duì)紫蘇各個(gè)部位不同采收時(shí)期黃酮、黃酮糖基化、酚酸的動(dòng)態(tài)變化、總含量變化和部位成分分布的研究，對(duì)紫蘇酚類資源的利用提供參考依據(jù)。

紫蘇；酚類物質(zhì)；高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；動(dòng)態(tài)積累；最佳采收時(shí)期

紫蘇（Perilla frutescens），別名桂荏、白蘇、赤蘇等，為一年生草本植物，屬于唇形科。由于具有特有的活性物質(zhì)及營(yíng)養(yǎng)成分，紫蘇經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高，成為備受世界關(guān)注的植物，可以廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥和保健。紫蘇所含有的酚類物質(zhì)具有抗氧化活性、對(duì)酶的作用、止癢活性、抗腫瘤、保護(hù)肝臟和其他作用［1-5］。隨著對(duì)酚類化合物的深入研究和應(yīng)用不斷發(fā)展，人們將目光轉(zhuǎn)向?qū)ふ姨烊环宇惢衔铮宇惢衔镌谧咸K中分布比較廣泛，所以紫蘇對(duì)于人們的開發(fā)利用至關(guān)重要。

目前關(guān)于紫蘇酚類化合物的分離和檢測(cè)研究較多，如對(duì)紫蘇籽中的酚類抗氧化性研究［6］，迷迭香酸和迷迭香酸-3-O-葡萄糖苷的抗氧化活性比較［7］，紫蘇酚類化合物商業(yè)化［8］，對(duì)皮膚炎癥、皮膚疾病、帕金森癥、血管性癡呆、老年癡呆和抑制腦衰老的作用和功效［9］。由此可見，紫蘇的酚類化合物無論是在食用、藥用還是酚類的商業(yè)化產(chǎn)品發(fā)展都將具有著穩(wěn)定的發(fā)展趨勢(shì)。

目前，國(guó)內(nèi)外研究人員主要對(duì)紫蘇屬植物葉和種子的成分鑒定［10］、分離和化合物的表征［11］進(jìn)行研究。對(duì)紫蘇籽渣中的酚類物質(zhì)［12］、不同紫蘇葉中的迷迭香酸［13］，紫蘇籽主要成分［14］、總黃酮和總多酚含量進(jìn)行比較［15］。鮮見紫蘇4 個(gè)部位的酚類化合物及其糖苷的相關(guān)報(bào)道。

本研究基于紫蘇全部位不同時(shí)期的酚類化合物，采用快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、專屬性好、雙重檢測(cè)器表征的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry， HPLC-MS/ MS）法對(duì)紫蘇提取物進(jìn)行分離和表征，對(duì)于影響色譜、質(zhì)譜分離效果的重要因素，如進(jìn)樣量、流動(dòng)相的流速、流動(dòng)相中酸的添加量及多級(jí)質(zhì)譜參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，并應(yīng)用于紫蘇全部位不同時(shí)期酚類化合物含量測(cè)定?？蔀樽咸K酚類累積、各部位不同酚類采收時(shí)期、酚類資源合理利用，提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

紫蘇籽藥材購買于湖北，該樣本經(jīng)三峽大學(xué)王玉兵副教授鑒定為湖北紫蘇，標(biāo)本存放于三峽大學(xué)實(shí)驗(yàn)室。

標(biāo)準(zhǔn)品：迷迭香酸（含量：20 mg；批號(hào)：15030306）、木犀草素（含量：20 mg；批號(hào)：15030404）、芹菜素（含量：20 mg；批號(hào)：15060501）、野黃岑素（含量：20 mg；批號(hào)：15041311） 成都瑞發(fā)科技開發(fā)有限公司；咖啡酸（含量：20 mg；批號(hào)：EK140410） 上海伊卡生物技術(shù)有限公司；甲醇（色譜純） 美國(guó)Fisher公司；乙酸（分析純） 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；無水乙醇（分析純） 天津恒興化學(xué)試劑制造有限公司；其他試劑均為分析純。

1.2儀器與設(shè)備

1200 UPLC儀（配有電噴霧離子源及Hystar3.2數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)） 美國(guó)Agilent公司；Amazon SL MS聯(lián)用儀德國(guó)Brüker公司。

1.3方法

1.3.1樣品制備

將種子于2015年6月5日（150605）播種，直至2015年6月15日（150615）發(fā)芽長(zhǎng)出兩對(duì)葉片，小心對(duì)幼苗進(jìn)行移栽，每組幼苗隨機(jī)種植。種植到實(shí)驗(yàn)田后每隔20 d后按規(guī)則采樣（150705、150725、150815、150905、150925、151015），采樣方法為實(shí)驗(yàn)田對(duì)角線取樣，在實(shí)驗(yàn)田對(duì)角線上選定5 個(gè)取樣點(diǎn)，在每個(gè)取樣點(diǎn)上按規(guī)定的面積（50×50）cm內(nèi)采樣，每個(gè)點(diǎn)采取至少一株紫蘇，為全株采摘。根據(jù)植物生長(zhǎng)情況，根、莖、葉采摘分為營(yíng)養(yǎng)期、開花期、結(jié)果期。將新鮮的植株用清水除去表面的泥沙后將植株表面的水除去，自然陰干，備用。

精密稱取紫蘇根、莖、葉粉末各1.5 g，種子5.0 g（過40 目篩），種子進(jìn)行索氏提取，用石油醚65 ℃回流除去脂肪，將粉碎過目樣品加入50 mL乙醇（80∶20，V/V）溶液，超聲波輔助提取。重復(fù)3 次，合并提取液減壓蒸干。然后加入甲醇-水（80∶20，V/V）溶液定容。定容后過0.45 μm有機(jī)膜，進(jìn)樣5 μL。每期樣品分別重復(fù)3 次，并求得各部位酚類化合物的平均含量。

1.3.2HPLC條件

色譜柱：Agligent C18液相色譜柱（150 mm× 2.1 mm，5 μm）；流速0.2 mL/min；柱溫40 ℃；進(jìn)樣量5 μL；流動(dòng)相：A為甲醇溶液；B為體積分?jǐn)?shù)0.01%醋酸溶液；流動(dòng)相洗脫程序如表1所示。

表1　HPLC梯度洗脫程序Table1　Gradient elution program of HPLC

1.3.3MS條件

電噴霧離子源；自動(dòng)二級(jí)質(zhì)譜模式；負(fù)離子模式掃描；毛細(xì)管電壓4 000 V；擋板電壓2 500 V；干燥氣流5 L/min；干燥氣壓力35 psi；干燥器溫度350 ℃；二級(jí)質(zhì)譜條件：MS/MS多級(jí)質(zhì)譜裂解能量1.00 V；離子肼離子數(shù)目30 000；最大積累時(shí)間300.00 ms；質(zhì)量掃描范圍m/z 100～1 200。

1.3.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)品咖啡酸、迷迭香酸、芹菜素、木犀草素、野黃岑素各5.00 mg，分別用甲醇溶解，定容10 mL，即得0.5 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，0 ℃保存。使用時(shí)分別用甲醇逐級(jí)稀釋，得到合適的線性范圍。線性方程及相關(guān)系數(shù)如表2所示。

表2　標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù)Table2　Standard curves with correlation coefficients as well as limits of detection and quantitation

2　結(jié)果與分析

本實(shí)驗(yàn)將根、莖、葉分為3 個(gè)時(shí)期：營(yíng)養(yǎng)期（0～60 d）、開花期（60～100 d）、結(jié)果期（100～120 d）。

2.1HPLC-MS條件的優(yōu)化

2.1.1HPLC條件的選擇

2.1.1.1流動(dòng)相的選擇

本實(shí)驗(yàn)考察甲醇-水、乙腈-水作為流動(dòng)相的分離效果，結(jié)果表明，所提取的酚類化合物在甲醇-水的體系能夠取得較好的分離效果。

2.1.1.2流速和進(jìn)樣量的選擇

本實(shí)驗(yàn)對(duì)于流動(dòng)相流速進(jìn)行優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)液相流速為0.2 mL/min時(shí)效果優(yōu)于0.3 mL/min；考察進(jìn)樣量分別為5、10、15 μL時(shí)效果，發(fā)現(xiàn)當(dāng)進(jìn)樣量為5 μL時(shí)，目標(biāo)峰峰形好，分離度好，如圖1所示。

圖1　紫蘇樣品酚類化合物色譜圖Fig.1　HPLC chromatograms of phenolic compounds in Perilla frutescens

2.1.2MS條件的選擇

本實(shí)驗(yàn)采用負(fù)離子模式監(jiān)測(cè)，對(duì)分子離子峰及其二級(jí)質(zhì)譜信號(hào)采集分別進(jìn)行優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)在多級(jí)質(zhì)譜裂解能量1.00 V；離子肼離子數(shù)目30 000；最大積累時(shí)間300.00 ms條件下，能夠保證離子化效率高、信號(hào)強(qiáng)且儀器分辨率正常，如圖2所示。

圖2　紫蘇樣品酚類化合物總離子流圖Fig.2　HPLC-MS/MS total ion chromatograms of phenolic compounds in Perilla frutescens

2.2酚類化合物時(shí)間變化規(guī)律

將不同采收時(shí)期根、莖、葉3 個(gè)部位醇提取物通過HPLC分離，初步鑒定其中13 種酚類化合物，分別為咖啡酸、咖啡酸-3-O-葡萄糖苷、迷迭香酸、迷迭香酸-3-O-葡萄糖苷、木犀草素、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸、木犀草素-7-O-二葡萄糖苷酸、芹菜素、芹菜素-7-O-咖啡?；咸烟擒?、芹菜素-7-O-二葡萄糖苷酸、野黃岑素-7-O-二葡萄糖苷酸、迷迭香酸甲酯。紫蘇各部位的酚類含量動(dòng)態(tài)變化如圖3A～F所示，紫蘇各部位的黃酮含量動(dòng)態(tài)變化如圖3G～O所示。

圖3　各生長(zhǎng)期紫蘇根、莖、葉部位酚酸化合物含量（A～F）和黃酮化合物含量（G～O）Fig.3　Dynamic changes in the contents of phenolics in roots， stems，and leaves of Perilla frutescens at different growing periods

根據(jù)圖3可以看出，不同采收時(shí)期的根、莖、葉三部位13 種主要成分分析顯示，紫蘇的莖、葉部位黃酮化合物總含量從營(yíng)養(yǎng)期到開花期逐漸增加，到結(jié)果期達(dá)到最大，含量分別為7.99 mg/g和25.86 mg/g。紫蘇莖、葉部位的酚酸從營(yíng)養(yǎng)期到開花期略有降低，但在結(jié)果期含量反彈到最大，含量分別為1.66 mg/g和21.42 mg/g。紫蘇莖、葉部位的總酚類含量在結(jié)果期達(dá)到最大，含量分別為9.65 mg/g和47.50 mg/g。

木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸為紫蘇中黃酮化合物最主要成分，均在莖、葉的開花初期和開花期形成，隨著植物代謝增強(qiáng)，含量急劇上升以結(jié)果期達(dá)到最大，含量分別為3.88 mg/g和19.88 mg/g。迷迭香酸為紫蘇中酚酸化合物最主要成分，其在營(yíng)養(yǎng)初期就存在于紫蘇的根、莖、葉3 個(gè)部位，迷迭香酸含量在營(yíng)養(yǎng)初期較大，隨后到開花期含量急劇降低，但到了結(jié)果期達(dá)到最大。根部位迷迭香酸含量在營(yíng)養(yǎng)期和開花期均比其他部位要高，在營(yíng)養(yǎng)初期根部位含量最高為3.10 mg/g，含量最低為莖部位為0.24 mg/g。紫蘇在開花期，代謝更加旺盛，其中根部位與莖、葉部位迷迭香酸含量相比較而言，含量更高于這2 個(gè)部位，根部位含量最高為1.24 mg/g，大約為莖部位的18 倍。到了結(jié)果期，葉片作為植物最主要器官，為整個(gè)植株提供營(yíng)養(yǎng)成分，葉部位迷迭香酸含量增加到最大，含量由開花期的0.045 mg/g急劇增加到21.40 mg/g，均遠(yuǎn)高于其他3 個(gè)部位，分別是莖、根部位的13.51 倍和31.88 倍。

紫蘇葉、籽等部位的酚酸類物質(zhì)國(guó)內(nèi)外已有多篇文獻(xiàn)報(bào)道，最主要的酚酸類物質(zhì)為迷迭香酸［16］。本實(shí)驗(yàn)將紫蘇根、莖、葉、種子4 個(gè)部位的提取物采用HPLCMS/MS法分析，檢測(cè)到紫蘇莖、葉部位迷迭香酸在結(jié)果期含量達(dá)到最大，葉部位含量為21.41 mg/g，種子部位含量為5.02 mg/g，同時(shí)也檢測(cè)到葉部位化合物含量可達(dá)19.89 mg/g。而芹菜素-7-咖啡?；咸烟擒蘸颓鄄怂?7-O-二葡萄糖苷的含量在開花期達(dá)到最大，以開花期為最佳采收時(shí)期。紫蘇4 個(gè)部位的酚類含量差異很大，很可能是紫蘇本身的酚酸合成和在植物體內(nèi)代謝、體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)有很大的關(guān)系，Liu Jing等［17］研究了12 種紫蘇莖、葉、種子部位的迷迭香酸的含量，結(jié)果表明：紫蘇葉部位迷迭香酸含量在8.33～14.98 mg/g之間，莖部位含量在0.34～3.08 mg/g之間，種子部位含量在1.03～3.30 mg/g之間。購買于四川、廣西、香港等大多數(shù)樣品葉部位迷迭香酸含量較高，而北京、湖北、江蘇等樣品種子部位含量遠(yuǎn)高于葉片。本實(shí)驗(yàn)為人工栽培湖北紫蘇，迷迭香酸含量與文獻(xiàn)［17］購買于香港的品種相類似，種子部位含量高于文獻(xiàn)［17］種子部位的含量。江安娜［18］研究了不同紫蘇葉片總黃酮含量的變化，其中營(yíng)養(yǎng)期到開花期總黃酮含量呈上升態(tài)勢(shì)，隨后逐漸遞增，在結(jié)果期達(dá)到最大，本實(shí)驗(yàn)紫蘇總黃酮變化與文獻(xiàn)［18］所報(bào)道的4 種紫蘇變化趨勢(shì)一致。

2.3糖基化隨時(shí)間變化規(guī)律

紫蘇根、莖、葉三部位的酚類糖基化化合物為：咖啡酸-3-O-葡萄糖苷、迷迭香酸-3-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸、木犀草素-7-O-二葡萄糖苷酸、芹菜素、芹菜素-7-咖啡?；咸烟擒铡⑶鄄怂?7-O-二葡萄糖苷、野黃岑素-7-O-二葡萄糖。由圖3可以看出，紫蘇莖、葉部位酚酸、黃酮的糖基化均在開花期被檢測(cè)到，葉片在營(yíng)養(yǎng)期出現(xiàn)少量的黃酮糖苷，由于植物體內(nèi)相關(guān)酶的活性變化導(dǎo)致相關(guān)酚類化合物變化來滿足植物本身的生理需求［19-20］，酚類化合物在酶的作用下通過生物合成改變本身的結(jié)構(gòu)，如糖基化、基化?；图谆@些改變對(duì)于植物體累化合物的溶解性、穩(wěn)定性和降低毒性都至關(guān)重要［21-23］，所以隨著植物的生長(zhǎng)、新陳代謝逐步增強(qiáng)，糖基化的種類和含量也逐漸增多，含量和種類均到結(jié)果期達(dá)到最大，種子部位酚酸和黃酮的糖基化物質(zhì)相對(duì)于莖、葉部位要少。酚酸的糖基化主要以葡萄糖苷形式存在，黃酮主要以葡萄糖苷、苷酸、二苷酸形式存在。

營(yíng)養(yǎng)期：葉中木犀草素、芹菜素主要以其葡萄糖苷酸和葡萄糖苷形式存在，且葡萄糖苷酸占主要成分，黃酮化合物均為7號(hào)位上；莖部位糖基化總類和含量少，根部位未檢測(cè)到相關(guān)糖苷。

開花期和結(jié)果期：莖、葉部位木犀草素主要以葡萄糖苷、葡萄糖苷酸和二葡萄糖苷酸存在，葡萄糖苷酸占主要成分，芹菜素主要以二葡萄糖苷酸和咖啡酰基糖苷存在，二葡萄糖苷酸占主要成分，野黃岑素主要以二葡萄糖苷酸存在。種子部位木犀草素主要以葡萄糖苷形式存在，芹菜素主要以咖啡?；擒沾嬖?，莖、葉和種子三部位的咖啡酸和迷迭香酸分別以糖苷形式存在，且種子部位酚酸糖苷含量要高于其他部位，黃酮化合物的糖苷均為7號(hào)位，酚酸化合物的糖苷均為3號(hào)位，根部位未檢測(cè)到相關(guān)糖苷的存在。

3　結(jié) 論

本研究表明，紫蘇酚類含量較高的化合物是迷迭香酸和木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸。根部位迷迭香酸累積峰值出現(xiàn)在營(yíng)養(yǎng)期，而葉部位為落葉期，主要以迷迭香酸形式存在，糖苷較少。木犀草素累積最高主要是在葉部位的落葉期，主要存在的形式為木犀草素-7-O-葡萄糖苷酸。紫蘇特征酚酸的最佳采收時(shí)期為落葉期，主要積累在落葉期葉片中，含量可達(dá)21.41 mg/g。黃亮輝等［13］研究不同紫蘇葉的迷迭香酸采收時(shí)期為8月，江安娜［18］研究了紫蘇葉部位總黃酮含量，認(rèn)為結(jié)果期為最佳采收時(shí)期，該結(jié)論與本實(shí)驗(yàn)相符合，不同的植物其總黃酮含量變化不同，植物體內(nèi)的黃酮酚酸抗紫外、外部環(huán)境變化有很密切的關(guān)系［24-25］。本研究實(shí)現(xiàn)了高靈敏度、高效率、低成本、準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì)，為全面認(rèn)識(shí)紫蘇各部位的酚類化合物組成及其含量動(dòng)態(tài)變化提供了依據(jù)，同時(shí)也為紫蘇的品質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)功能提供了必要的基礎(chǔ)。還需結(jié)合相關(guān)合成黃酮的酶進(jìn)行研究，從而能夠解釋這些化合物的動(dòng)態(tài)變化，也更能夠?yàn)檫@些化合物的合成提供重要的依據(jù)。

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Quantitation of Phenolic Compounds in Perilla frutescens at Different Growing Stages Using HPLC-MS/MS

AI Xinwei1， HU Siping1， GONG Hengheng1， HUANG Wenye1， YANG Jieqiu2， WANG Li1， LIAO Zhaojiang1，*
（1. College of Biological and Pharmaceutical， China Three Gorges University， Yichang 443000， China；2. Yichang Humanwell Oral Solid Dosage Plant， Yichang 443000， China）

Purpose: To establish a simple， rapid， accurate high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （HPLC-MS/MS） for the simultaneous separation and determination of phenolic compounds in leaves， stems and roots of Perilla frutescens and further to examine the accumulation patterns of phenolics in different plant parts during the growing period for the purpose of determining the optimal harvest time for Perilla frutescens. Methods: Samples of cultivated Perilla frutescens were collected at three different growing stages and extracted with ethanol for HPLCMS analysis. The important chromatographic and mass spectrometric parameters were optimized. The identification of phenolic compounds was done by retention time comparison with reference standards and quantitation was performed using calibration curves. Moreover， changes in the contents of 13 major phenolic compounds in various parts of Perilla frutescens at different growing stages were observed. Results: The following compounds were identified: caffeic acid， caffeic acid-3-O-glucoside， rosmarinic-acid， rosmarinic-acid-3-O-glucoside， luteolin， luteloin-7-O-glucoside， luteloin-7-O-diglucuronide，luteloin-7-O-glucuronide， apigenin， apigenin-7-O-caffeoyglucoside， apigenin-7-O-diglucuronide and scutellarein-7-O-diglucuronide. Among these， the contents of rosmarinic acid and its glucoside derivatives decreased initially and then sharply increased to the maximum at the fruiting stage， while the flavonoids and their glucoside derivatives gradually increased until reaching the maximum at the fruiting stage. The contents of rosmarinic acid and luteloin-7-O-glucuronide in leaves at the fruiting stage were the highest， reaching 21.41 mg/g and 19.89 mg/g， respectively. Furthermore， leaves at the fruiting stage had the highest total phenol content of 47.50 mg/g among the various parts examined. Conclusions: The results of ourpresent work may provide a good reference for the utilization of Perilla frutescens as a phenolics resource.

Perilla frutescens； phenolics； high performance liquid chormatography-tandem mass spectrometry （HPLC-MS/MS）；accumulation； optimal harvest time

10.7506/spkx1002-6630-201618021

TS255.7

A

1002-6630（2016）18-0126-07

艾鑫衛(wèi)， 胡思平， 龔?qiáng)瑠?等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定各生長(zhǎng)期紫蘇中酚類物質(zhì)的含量［J］. 食品科學(xué)， 2016，37（18）: 126-132. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201618021. http://www.spkx.net.cn

AI Xinwei， HU Siping， GONG Hengheng， et al. Quantitation of phenolic compounds in Perilla frutescens at different growing stages using HPLC-MS/MS［J］. Food Science， 2016， 37（18）: 126-132. （in Chinese with English abstract）DOI:10.7506/spkx1002-6630-201618021. http://www.spkx.net.cn

2016-03-12

三峽大學(xué)科學(xué)基金項(xiàng)目（KJ2013B070）；宜昌市科技局自然基礎(chǔ)科學(xué)研究與應(yīng)用專項(xiàng)（A15-302-a05）

艾鑫衛(wèi)（1990—），男，碩士研究生，研究方向?yàn)楝F(xiàn)代儀器分析及應(yīng)用。E-mail：392589019@qq.com

廖照江（1964—），男，副教授，博士，研究方向?yàn)闊o機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)。E-mail：Liaozhaojiang@163.com