文立波

(甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 蘭州 730046)

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甘肅省禽白血病感染狀況血清學(xué)分析

文立波

(甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 蘭州 730046)

為了了解規(guī)?；B(yǎng)雞場(chǎng)禽白血病感染情況，利用間接ELISA檢測(cè)試劑盒對(duì)采自14個(gè)市州規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)和野鳥(niǎo)棲息地458份棉拭子和10份野鳥(niǎo)糞進(jìn)行禽白血病抗原檢測(cè)。結(jié)果表明，個(gè)體陽(yáng)性率為2.62%，場(chǎng)群陽(yáng)性率為36.36%，野鳥(niǎo)糞便陽(yáng)性率為50.00%。因此，甘肅規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)禽白血病感染較為普遍，但個(gè)體感染率較低，泄殖腔棉拭子檢出率比咽喉拭子高。

甘肅??；禽白血??；間接ELISA；血清學(xué)調(diào)查

禽白血病是由禽白血病/肉瘤病毒群中的病毒引起的禽類多種種瘤性疾病的統(tǒng)稱，主要是淋巴白血病，其次是成紅細(xì)胞白血病、成髓細(xì)胞白血病，骨髓細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤、骨石病、血管瘤、肉瘤和內(nèi)皮瘤等。本病發(fā)生率通常在3%～30%之間。由于本病在全身很多器官中產(chǎn)生腫瘤性病灶，死亡率高，危害嚴(yán)重。同時(shí)該病毒具有垂直傳播性，因此對(duì)養(yǎng)禽業(yè)危害巨大。但該病臨床特征不明顯，極易與馬立克氏病等其他疾病混淆。甘肅省禽白血病的診斷以臨床診斷為主，鮮見(jiàn)有關(guān)本病的報(bào)道。為了解掌握甘肅省禽白血病的感染情況，本研究對(duì)采自規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)和野鳥(niǎo)棲息地的咽喉、泄殖腔棉拭子野鳥(niǎo)糞便進(jìn)行了禽白血病感染情況檢測(cè)。

1　材料與方法

1.1被檢樣品

采自14個(gè)市州22個(gè)規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)和1個(gè)野鳥(niǎo)棲息地的468份雞咽喉、泄殖腔棉拭子和10份新鮮野鳥(niǎo)糞便。

1.2檢測(cè)方法

所用檢測(cè)方法為間接ELISA，按如下方法操作。

1.2.1加樣每孔加入50 μL棉拭子PBS析出液，用封閉膜封板室溫作用30 min。

1.2.2洗板按每孔加400 μL洗滌液洗滌5次，第五次洗完后排干。

1.2.3加酶結(jié)合物加50 μL酶標(biāo)二抗，室溫作用30 min；同1.2.2法洗板5次。

1.2.4加底物每孔加底物液50 μL，室溫避光顯色20 min。

1.2.5加終止液每孔加終止液50 μL，測(cè)定各孔OD405值。

1.2.6結(jié)果判定當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD405值減去陰性對(duì)照孔平均OD405值≥0.5，陰性對(duì)照OD405值<0.15時(shí)，試驗(yàn)成立。S/P≥0.3，被檢樣品為陽(yáng)性；S/P<0.2，被檢樣品為陰性。

1.3試劑來(lái)源

試劑盒購(gòu)自北京世紀(jì)元亨有限公司，為荷蘭BioChek有限公司生產(chǎn)的禽白血病(p27)檢測(cè)試劑盒。

2　結(jié)果與分析

檢測(cè)采自14個(gè)市州22個(gè)規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)和1個(gè)野鳥(niǎo)棲息地的咽喉、泄殖腔棉拭子野鳥(niǎo)糞便468份和野鳥(niǎo)糞便10份。8個(gè)市州的8個(gè)規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)檢出陽(yáng)性樣品12份，個(gè)體陽(yáng)性率為2.62%，場(chǎng)群陽(yáng)性率為36.36%，市州檢出率為57.14%，糞便陽(yáng)性5份，陽(yáng)性率為50.00%(詳見(jiàn)表1)。

表1　甘肅省雞白血病病原檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表　 份，%

檢測(cè)咽喉拭子127份，泄殖腔拭子331份，其中咽喉拭子檢出陽(yáng)性3份、泄殖腔拭子檢出陽(yáng)性9份；咽喉拭子陽(yáng)性率為2.36%，泄殖腔拭子陽(yáng)性率為2.72%。

3　討論

甘肅省雞禽白血病感染較為普遍，個(gè)體感染率較低。從檢測(cè)結(jié)果看，14個(gè)市州中8個(gè)市州的規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)戶存在雞禽白血病存在感染帶毒現(xiàn)象。22個(gè)規(guī)模雞場(chǎng)戶中有8個(gè)場(chǎng)戶檢出陽(yáng)性樣品，場(chǎng)群陽(yáng)性率為36.36%；平均個(gè)體陽(yáng)性率為3.63%，除1個(gè)場(chǎng)戶個(gè)體陽(yáng)性為10%外，其余7個(gè)場(chǎng)戶陽(yáng)性率均在5%以下。泄殖腔棉拭子比檢出率比咽喉拭子高。從檢測(cè)樣品分析檢測(cè)結(jié)果，8個(gè)檢測(cè)陽(yáng)性場(chǎng)戶中，7個(gè)場(chǎng)戶只從泄殖腔棉拭子檢出陽(yáng)性樣品，其中2個(gè)場(chǎng)戶同時(shí)從咽喉棉拭子和泄殖腔棉拭子檢出陽(yáng)性樣品，僅1個(gè)場(chǎng)戶從咽喉拭子檢出陽(yáng)性樣品。

建議養(yǎng)殖戶提高防范意識(shí)，加強(qiáng)流行病學(xué)監(jiān)測(cè)，為本病凈化奠定基礎(chǔ)。本次調(diào)查為我省近年第一次。初步掌握了我省的感染情況。盡管個(gè)體感染率較低，但感染較為普遍。由于本病毒具有垂直傳播性，發(fā)病時(shí)形成全身器官中產(chǎn)生腫瘤性病灶，死亡率高，而臨床特征不明顯，發(fā)病極易與馬立克氏病等其他疾病混淆，但因基層檢測(cè)手段缺乏和發(fā)病率低而被忽視，很難做到早發(fā)現(xiàn)。2014年開(kāi)始農(nóng)業(yè)部把該病納入到國(guó)家主要規(guī)模禽場(chǎng)主要?jiǎng)游镆卟艋》N。因此，我省廣大養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)該抓住這個(gè)機(jī)遇和個(gè)體感染率低這一特點(diǎn)。積極開(kāi)展以流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)，及時(shí)淘汰陽(yáng)性禽群的禽白血病凈化工作。

野禽感染本病毒。此次調(diào)查我們對(duì)隨機(jī)采集于某野禽棲息地的10份野禽糞便做了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)5份樣品為陽(yáng)性。關(guān)于野禽感染本病的報(bào)道很少，有待相關(guān)研究人員進(jìn)一步研究。

Serological Analysis of Avian Leukosis Infection in Gansu Province

WEN Li-bo

(GansuAnimalDiseasePreventionandControlCenter,LanzhouGansu730046China)

In order to observe the situation of Avian leucosis (AL) of farm in Gansu province, this study detected 10 feces of wild birds and 458 cotton swabs which were collected from wild bird habitat and farms of 14 states in Gansu province by using indirect ELISA test kits. The result showed that the individual positive rate reached 2.62%, the positive rate of group reached 36.36%, and positive rate of feces was 50.00%. In conclusion, although the individual positive rate was still running at a comparatively low level, this disease was currently widely spread over Gansu province. Using cloacal swabs rather than throat swabs improves AL detection rates.

Gansu province; avian leucosis; indirect-ELISA; serological detection

2016-03-04

文立波(1971-)，男，甘肅蘭州人，本科，獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病防控與研究工作。 E-mail:541424956@qq.com

S 855.3

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1004-6704(2016)05-0098-02