黎日海， 劉建瑜， 莫慶森， 吳甲文， 程金玲

·論著·

骨科患者傷口膿液標(biāo)本分離菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析

黎日海， 劉建瑜， 莫慶森， 吳甲文， 程金玲

目的 了解桂平市人民醫(yī)院骨科患者傷口膿液標(biāo)本分離菌分布及其藥物敏感性，為臨床治療提供參考依據(jù)。方法 對(duì)2009—2013年骨科住院患者傷口膿液標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果回顧性統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 分離到2 544株細(xì)菌共73種，前6位分別是銅綠假單胞菌（17.9%）、腸桿菌屬（14.2%）、大腸埃希菌（10.5%）、不動(dòng)桿菌屬（9.6%）、克雷伯菌屬（9.0%）和金黃色葡萄球菌（金葡菌）（8.8%）。主要分離菌中，不動(dòng)桿菌屬對(duì)所有藥物敏感率＜75%。對(duì)不同年度的藥物敏感率分析：金葡菌對(duì)苯唑西林敏感率由2009-2012年度的78.6%下降為2013年的56.9%（P=0.002）；對(duì)左氧氟沙星敏感率由2009-2012年度的88.1%下降為2013年的70.8%（P=0.003）。銅綠假單胞菌對(duì)美羅培南敏感率由95.9%下降為86.9% （P=0.008），對(duì)哌拉西林-他唑巴坦的敏感率由75.4%上升為91.8%（P=0.007）。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)頭孢哌酮-舒巴坦和甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑敏感率由2009—2012年度的40.7%和20.6%上升為2013年的57.9%和52.6%（P = 0.000和0.003）。大腸埃希菌對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑敏感率由2009—2012年度的18.4%上升為2013年的38.9% （P=0.002）。肺炎克雷伯菌對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲口惡唑敏感率由2009—2012年度的43.2%下降為2013年的39.6%（P=0.000）。2009-2012年金葡菌中MRSA檢出率為21.4%，2013年則為43.1%。大腸埃希菌中ESBL檢出率為41.4%，對(duì)碳青霉烯類耐藥率0.5%；肺炎克雷伯菌ESBL檢出率為27.4%，耐碳青霉烯類占1.7%；陰溝腸桿菌耐碳青霉烯類占3.6%。結(jié)論 該院骨科患者傷口膿液標(biāo)本分離菌中不動(dòng)桿菌屬耐藥率較高，常規(guī)所選藥物敏感率均＜75%。不同年度藥物敏感性比較：金葡菌對(duì)苯唑西林、左氧氟沙星敏感率下降，銅綠假單胞菌對(duì)美羅培南敏感率下降，銅綠假單胞菌對(duì)哌拉西林-他唑巴坦敏感率上升。2013年MRSA發(fā)生率上升明顯。

骨科； 傷口分泌物； 藥物敏感試驗(yàn)

骨科創(chuàng)口的開放性及傷口接觸環(huán)境多樣性，使分離菌也呈多樣和復(fù)雜。給骨科創(chuàng)傷治療帶來許多困難。為更好了解骨科傷口膿液標(biāo)本分離菌的情況，對(duì)我院2009—2013年骨科送檢的傷口分泌物、膿液、切口分泌物培養(yǎng)分離菌及其藥敏進(jìn)行回顧性分析，以期揭示這幾年來骨科傷口膿液標(biāo)本分離菌及其藥敏情況，更好地為臨床服務(wù)。

1 材料與方法

1.1 資料來源

2009—2013年我院骨科送檢傷口分泌物（包括膿和術(shù)后切口）的細(xì)菌培養(yǎng)，共6 080例次，2 912份標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性，陽(yáng)性率47. 9%。收集有傷口紅腫或有分泌物流出、發(fā)熱等有傷口或切口的患者，并僅分析首次培養(yǎng)陽(yáng)性的樣本，共2 544份。

1.2 方法

1.2.1 菌株鑒定與藥敏試驗(yàn) 細(xì)菌鑒定應(yīng)用ATB Expression 半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)。藥敏試驗(yàn)用K-B 法。采用英國(guó) OXOID 公司生產(chǎn)的培養(yǎng)基及抗菌藥物紙片。質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、ATCC35218，糞腸球菌ATCC29212，銅綠假單胞菌 ATCC27853 和金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC25923。

1.2.2 研究方法 統(tǒng)計(jì)2009-2013年骨科患者傷口膿液標(biāo)本分離菌的分布、主要分離菌藥敏和多重耐藥菌發(fā)生率。對(duì)分離菌前6位細(xì)菌（銅綠假單胞菌、陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌和金葡菌）進(jìn)行2013年度與2009-2012年度藥物敏感性對(duì)比分析。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)分析方法 采用IBM SPSS Statistics 22統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，主要為卡方獨(dú)立性檢驗(yàn)（Crosstabs）。藥敏結(jié)果用WHONET5.6統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果判斷采用2014年CLSI推薦標(biāo)準(zhǔn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.12009 -2013 年度骨科患者傷口膿液標(biāo)本細(xì)菌分布

在2 544株分離菌中，革蘭陽(yáng)性菌573株（22.5%），革蘭 陰性菌1 971株（77.5%）。分離的菌種見表1。

表1 2009—2013 年度骨科患者傷口膿液標(biāo)本細(xì)菌分布Table 1 Distribution of the pathogens isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients during the period from 2009 to 2013

表1（續(xù)）Table 1（continued）

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

本次分離細(xì)菌中銅綠假單胞菌對(duì)所測(cè)試的抗菌藥物敏感率均接近或超過70%。腸桿菌屬細(xì)菌對(duì)氨芐西林、阿莫西林-克拉維酸、頭孢西丁、頭孢呋辛和頭孢唑林為天然耐藥；對(duì)哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南、慶大霉素、阿米卡星和左氧氟沙星等藥物敏感率＞75%。大腸埃希菌對(duì)哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、頭孢西丁、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南和阿米卡星等藥物敏感率也＞75%。不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌對(duì)全部所測(cè)藥物的敏感率均＜75%?？死撞鷮賹?duì)哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、頭孢西丁、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南、阿米卡星和左氧氟沙星的敏感率均＞75%。主要革蘭陰性菌藥敏結(jié)果見表2。

表2 骨科患者傷口膿液標(biāo)本主要革蘭陰性菌藥敏結(jié)果Table 2 Susceptibility of the gram-negative bacteria isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients to antimicrobial agents （%）

表2（續(xù)）Table 2（continued）

金葡菌中甲氧西林耐藥株（MRSA）檢出率為27.7%（62/224），凝固酶陰性葡萄球菌中甲氧西林耐藥株（MRCNS）檢出率83.3%（160/192）。MRSA和MRCNS對(duì)β內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類和喹諾酮類等抗菌藥物的耐藥率均顯著高于甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）和凝固酶陰性葡萄球菌（MSCNS）。糞腸球菌對(duì)所測(cè)試的大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率均顯著低于屎腸球菌。骨科患者傷口膿液標(biāo)本主要革蘭陽(yáng)性分離菌的藥敏結(jié)果見表3。

表3 骨科患者傷口膿液標(biāo)本主要革蘭陽(yáng)性菌藥敏結(jié)果Table 3 Susceptibility of the gram-positive bacteria isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients to antimicrobial agents （%）

2.3 重要耐藥菌檢出情況

重要耐藥菌包括MRSA，耐萬(wàn)古霉素腸球菌（VRE），產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）腸桿菌，耐碳青霉烯類腸桿菌（CRE），耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌（CR-AB），耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌。骨科患者傷口膿液標(biāo)本主要分離的耐藥菌分別為：耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌（2.9%）；耐碳青霉烯類陰溝腸桿菌（3.6%）；產(chǎn)ESBL大腸埃希菌（41.4%）；耐碳青霉烯類大腸埃希菌（0.5%）；CR-AB（34.7%）；產(chǎn)ESBL肺炎克雷伯菌（27.4%）；耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（1.7%）；MRSA（27.7%）。

2.4 不同年度主要6種分離菌的藥物敏感率比較

金葡菌2013年與2009—2012年相比，苯唑西林（P=0.002）和左氧氟沙星（P=0.003）的敏感率下降均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余抗菌藥物的敏感率變化差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表4。

不同年度銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌的藥物敏感率比較見表5。

表4 不同年度金葡菌的敏感率比較Table 4 Susceptibility of Staphylococcus aureus to antimicrobial agents compared between two time periods

表5 不同年度銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)抗菌藥物敏感率比較Table 5 Susceptibility of P. aeruginosa and A. baumannii to antimicrobial agents compared between two time periods

金葡菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌 2009—2012年與2013年度的藥物敏感率結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的是：金葡菌對(duì)苯唑西林（頭孢西丁）敏感率由78.6%下降為56.9%；對(duì)左氧氟沙星敏感率由88.1%下降為70.8%。銅綠假單胞菌對(duì)美羅培南敏感率由95.9%下降為86.9%；對(duì)哌拉西林-他唑巴坦的敏感率由75.4%上升為91.8%。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)頭孢哌酮-舒巴坦和甲氧芐啶-磺胺甲唑敏感率由40.7%和20.6%上升為57.9%和52.6%。大腸埃希菌對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲唑敏感率由18.4%上升為38.9%。肺炎克雷伯菌對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲唑敏感率由43.2%下降為39.6%。見表6。

表6 不同年度大腸埃希菌、陰溝腸桿菌、肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物敏感率比較Table 6 Susceptibility of Enterobacteriaceae species E. coli， E. cloacae and K. pneumoniae to antimicrobial agents compared between two time periods

3 討論

骨科患者傷口接觸環(huán)境多種多樣，分離的細(xì)菌種類也呈現(xiàn)多樣性。給骨科患者傷口經(jīng)驗(yàn)治療帶來困難。

骨科患者傷口標(biāo)本分離菌分離率排位各地報(bào)道不一，王燕等［1］報(bào)道占分離菌前6位分別是銅綠假單胞菌15.4%、表皮葡萄球菌15.2%、金葡菌14%、大腸埃希菌13.3%、腸桿菌屬8.1%和腸球菌8.1%。而我院骨科患者傷口膿液標(biāo)本分離菌依次是銅綠假單胞菌17.9%、腸桿菌屬14.2%、大腸埃希菌10.5%、不動(dòng)桿菌屬9.6%、克雷伯菌屬9.0%和金葡菌8.8%。

在排前6位分離菌中，腸桿菌屬、大腸埃希菌、克雷伯菌屬對(duì)哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南和阿米卡星敏感率＞75%，可推薦為疑腸桿菌傷口感染的經(jīng)驗(yàn)治療用藥［2-3］。排位第1的銅綠假單胞菌對(duì)除頭孢哌酮-舒巴坦外所測(cè)抗菌藥物敏感率均＞75%，這些藥物均可作為疑銅綠假單胞菌傷口感染的經(jīng)驗(yàn)治療用藥。不動(dòng)桿菌屬作為醫(yī)院感染主要菌對(duì)美羅培南、亞胺培南、米諾環(huán)素、甲氧芐啶-磺胺甲唑、頭孢哌酮-舒巴坦敏感率較高，可選用這些藥物聯(lián)合治療［4］。從本統(tǒng)計(jì)分析看，骨科患者傷口分離的金葡菌主要是MSSA，治療可考慮苯唑西林。而對(duì)MRSA，可選用萬(wàn)古霉素、利奈唑胺，它們敏感率均100%。

2013年度與2009—2012年的藥敏結(jié)果比較顯示：金葡菌對(duì)苯唑西林和左氧氟沙星、銅綠假單胞菌對(duì)美羅培南和哌拉西林-他唑巴坦、鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)頭孢哌酮-舒巴坦和甲氧芐啶-磺胺甲唑、大腸埃希菌對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲唑、肺炎克雷伯菌對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲唑敏感率均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。金葡菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對(duì)其他藥物敏感率變化不大（P＞0.05）。

［1］王燕，劉文良，王春娟. 2007-2009年骨折患者創(chuàng)面感染病原菌分布及耐藥性監(jiān)測(cè)［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2013，23 （23）：5866-5868.

［2］周樂飛，陳利珍，丁雅萍，等.骨科患者傷口分泌物病原菌分布及藥敏277例分析［J］.浙江中醫(yī)藥大學(xué)報(bào)，2014，38（4）：445-336.

［3］王殷紅，陳俊華，李錫生.創(chuàng)傷骨科患者醫(yī)院感染的病原菌分布及藥敏分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（2）：332-336.

［4］王娜，李少俠，張莎莎，等.骨科患者傷口感染的病原菌分布及耐藥性分析［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（7）：1603-1605.

Antimicrobial susceptibility of the bacterial strains isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients

LI Rihai， LIU Jianyu， MO Qingsen， WU Jiawen， CHENG Jinling. （Department of Laboratory Medicine，Guiping People′s Hospital， Guigang Guangxi 537200， China）

Objective To investigate the distribution and antimicrobial susceptibility of pathogenic bacteria isolated from pus and wound secretion in orthopedic patients for better clinical treatment. Methods The bacterial strains were isolated from pus or wound secretion during the period from 2009 to 2013. Bacterial identification and susceptibility testing were conducted routinely. The data were analyzed retrospectively. Results A total of 2 544 strains of pathogenic bacteria were collected， belonging to 73 species. The top six pathogens were P. aeruginosa （17.9%）， Enterobacter spp. （14.2%）， Escherichia coli （10.5%）， Acinetobacter spp. （9.6%）， Klebsiella spp. （9.0%） and Staphylococcus aureus （8.8%）. Less than 25% of the Acinetobacter strains were susceptible to any of the antimicrobial agents tested. The susceptibility rate of S. aureus to oxacillin declined from 78.6% during 2009-2012 to 56.9% in 2013 （P=0.002）. The susceptibility rate of S. aureus to levofloxacin decreased from 88.1% during 2009-2012 to 70.8% in 2013 （P=0.003）. The susceptibility rate of of P. aeruginosa to meropenem declined from 95.9% to 86.9% （P=0.008）， while the susceptibility rate to piperacillin-tazobactam increased from 75.4% to 91.8% （P=0.007）. The percentage of theAcinetobacter baumannii strains susceptible to cefoperazone-sulbactam and trimethoprim-sulfamethoxazole increased from 40.7% and 20.6% during 2009-2012 to 57.9% and 52.6% in 2013 （P = 0.000， P = 0.003）. The susceptibility rate of the E. coli strains to trimethoprim-sulfamethoxazole increased from 18.4% during 2009 - 2012 to 38.9% in 2013 （P = 0.002）. The susceptibility rate of the K. pneumoniae strains to trimethoprim-sulfamethoxazole decreased from 43.2% during 2009 - 2012 to 39.6% in 2013 （P = 0.000）. The prevalence of MRSA in S. aureus was 21.4% duirng the period from 2009 to 2012 and 43.1% in 2013. About 41.4% of the E. coli isolates were ESBLs-producing strains， 0.5% were carbapenem-resistant Enterobacteriaceae （CRE）. And 27.4% of the K. pneumoiae strains were ESBLs-producing， and 1.7% were CRE. A few （3.6%） of the Enterobacter cloacae strains were CRE. Conclusions The top six pathogenic bacteria isolated from pus and wound secretion are P. aeruginosa， Enterobacter spp.， E. coli， Acinetobacter spp.， S. aureus and Klebsiella spp. The Acinetobacter strains were highly resistant to the antimicrobial agents tested. The susceptibility rate of S. aureus to oxacillin and levofloxacin， P. aeruginosa to meropenem has declined from 2009 to 2013， while the susceptibility rate of P. aeruginosa to piperacillin-tazobactam increased. The prevalence of MRSA increased significantly in 2013 relative to the prevalence in previous years.

orthopedics； wound secretion； antimicrobial susceptibility

R63

A

1009-7708（2016）02-0221-06

10.16718/j.1009-7708.2016.02.017

2015-01-24

2015-10-23

桂平市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西貴港 537200。

黎日海（1964—），男，大學(xué)?？疲鞴軝z驗(yàn)技師，主要從事醫(yī)學(xué)微生物檢驗(yàn)工作。

黎日海，E-mail：L6909370@163.com。