張春暖，任洪濤，張紀(jì)亮，吳秋玨，高小蟬，劉文斌

(1.河南科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河南洛陽　471003;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，南京　210095)

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果寡糖對(duì)急性氨氮應(yīng)激下團(tuán)頭魴非特異性免疫指標(biāo)的影響

張春暖1，任洪濤1，張紀(jì)亮1，吳秋玨1，高小蟬1，劉文斌2

(1.河南科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河南洛陽471003;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，南京210095)

為研究氨氮應(yīng)激條件下果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)非特異免疫指標(biāo)的影響，試驗(yàn)選擇360尾初重為13.5 g的團(tuán)頭魴隨機(jī)分為3組，每組4個(gè)重復(fù)，每缸30尾魚，對(duì)照組投喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組分別投喂果寡糖(FOS)添加量為0.4%和0.8%的日糧，飼養(yǎng)8周，養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，用10 mg/L的NH4Cl對(duì)24尾魚進(jìn)行氨氮應(yīng)激試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，氨氮應(yīng)激前，0.4% FOS組的血液谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性顯著低于對(duì)照組和0.8% FOS組，在氨氮應(yīng)激后,0.4% FOS組的GOT活性有降低的趨勢(shì)，但僅在24 h時(shí)顯著低于0.8%組，0.8%組和對(duì)照組之間并無顯著差異；血清酸性磷酸酶、補(bǔ)體3(C3)、補(bǔ)體4(C4)、酚氧化酶都出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，分別在應(yīng)激后的3、24、12、12 h達(dá)到最大值。此外，應(yīng)激前0.4% FOS組補(bǔ)體C3、C4、酚氧化酶的活性都顯著高于對(duì)照組，應(yīng)激后0.4%FOS組C3在3 h處顯著高于對(duì)照組，但是在其它時(shí)間點(diǎn)各組差異并不顯著，果寡糖添加水平和采樣時(shí)間對(duì)這些免疫指標(biāo)都無顯著的交互作用。結(jié)果表明飼料中添加0.4%的果寡糖能夠提高團(tuán)頭魴的免疫力指標(biāo)活性，提高了團(tuán)頭魴抗氨氮應(yīng)激的能力。

團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)；果寡糖；氨氮應(yīng)激；免疫

氨氮是水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境中重要的污染脅迫因子之一，在水體中以離子氨(NH4+)和非離子氨(NH3)2兩種形態(tài)存在,它們之間可以相互轉(zhuǎn)換，其中非離子氨因?yàn)椴粠щ姾?，具有較強(qiáng)的脂溶性，能夠穿透細(xì)胞膜,表現(xiàn)出毒性效應(yīng)[1]。水體中過高的氨氮和亞硝酸鹽氮能對(duì)魚蝦產(chǎn)生直接毒害作用，因?yàn)橥饨绺邼舛劝钡?會(huì)使魚類血液中氨氮濃度迅速升高而對(duì)魚類產(chǎn)生很大的毒害[2]。池水積累一定量非離子氨會(huì)對(duì)魚鰓表皮細(xì)胞造成損傷而使魚的免疫力降低[3]，許多學(xué)者研究認(rèn)為在低于致死濃度的條件下，氨氮對(duì)魚、蝦鰓組織和生理功能(如氧消耗、氨排泄、滲透調(diào)節(jié)等)具有顯著影響[4]，近年來，由于高密度、集約化的養(yǎng)殖模式，水產(chǎn)動(dòng)物排泄物的氨化作用增強(qiáng)，餌料利用率低，殘餌剩余較多，再加上硬骨魚類對(duì)氨氮毒性又非常敏感[5]，容易造成免疫力下降，病原菌感染加劇，死亡率升高。

果寡糖(GPT)是蔗糖分子以β-1,2糖苷鍵結(jié)合幾個(gè)(8個(gè)以下)D-果糖而形成的寡糖，作為有益微生物的一種養(yǎng)分來源，它們可通過選擇性刺激腸道中原有或外來菌種的生長和活性來影響宿主，對(duì)動(dòng)物胃腸道微生物區(qū)系、免疫等功能有重要影響，在對(duì)三角魴(Megalobramaterminalis)、異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)等研究的結(jié)果表明果寡糖能顯著提高其白細(xì)胞吞噬活性、血清溶菌酶活力、血清超氧化物歧化酶活力和補(bǔ)體含量[6-8]，但研究果寡糖在應(yīng)激條件下，對(duì)魚類免疫狀況的影響至今還是空白。本實(shí)驗(yàn)以團(tuán)頭魴為研究對(duì)象，研究果寡糖在急性氨氮脅迫下對(duì)團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)非特異性免疫反應(yīng)的影響。為團(tuán)頭魴養(yǎng)殖水環(huán)境調(diào)控和病害防治提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)飼料

基礎(chǔ)日糧飼料配方及養(yǎng)分水平如表1所示。對(duì)照組投喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組飼料是在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.4%、0.8%的果寡糖,其中，果寡糖由日本明治集團(tuán)提供，果寡糖由蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)組成，且GF2+GF3+GF4≥95%，其它成分<5%；飼料原料購自江蘇帥豐飼料公司，原料粉碎后，均過60目篩，用逐級(jí)擴(kuò)大法混勻后制成直徑為1.5 mm的顆粒飼料，自然風(fēng)干后，放置于﹣20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

表1　基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Tab.1　Composition and nutrient levels of basal diets(air dry basis)　%

注：每千克飼料包含以下礦物質(zhì)和維生素：CuSO4·5H2O,20 mg;FeSO4·7H2O,250 mg;ZnSO4·7H2O,220 mg;MnSO4·4H2O,70 mg;Na2SeO3,0.4 mg;KI,0.26 mg;CoCl2·6H2O,1 mg;VA,9 000 IU;VD,2 000 IU;VE,45 mg;VK3,2.2 mg;VB1,3.2 mg;VB2,10.9 mg;煙酸 28 mg;VB5,20 mg;VB6,5 mg;VB12,0.016 mg;VC,50 mg;泛酸,10 mg;葉酸,1.65 mg;膽堿,600 mg。

1.2試驗(yàn)魚與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用魚團(tuán)頭魴由江蘇南京浦口基地提供。試驗(yàn)魚在網(wǎng)箱中馴養(yǎng)15 d 后，選擇體質(zhì)健壯，規(guī)格一致的幼魚，初始體質(zhì)量(13.5±0.5)g的團(tuán)頭魴360尾，隨機(jī)分成3組，其中1組為對(duì)照組，另外2組為試驗(yàn)組，每組4重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚，分別飼養(yǎng)于室外網(wǎng)箱(規(guī)格：1 m×1 m×1 m)中，每天投餌量為魚體重的3%～6%，根據(jù)吃食情況進(jìn)行適度調(diào)整，每天投喂3次，投喂時(shí)間分別為7:30、12:30、17:30，試驗(yàn)期間保持水體pH 7.0～8.0，溶氧>5.0 mg/L，氨氮<0.3 mg/L，亞硝酸鹽<0.1 mg/L，以保證水質(zhì)優(yōu)良。每天對(duì)天氣、水溫、攝食、死魚等情況進(jìn)行記錄，養(yǎng)殖周期為8周。

1.3氨氮應(yīng)激試驗(yàn)

飼養(yǎng)結(jié)束后，把魚轉(zhuǎn)移到水族箱中，穩(wěn)定2 d后，用氯化銨調(diào)制水中氨氮質(zhì)量濃度10 mg/L，氨氮濃度的測(cè)定用次溴酸鹽氧化法，每隔2 h測(cè)一次水中氨氮濃度和pH值，保證其基本穩(wěn)定，分別于應(yīng)激前0 h和應(yīng)激后3、6、12、24、48 h進(jìn)行采樣。

1.4樣品采集與測(cè)定

分別在應(yīng)激前后的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)從每缸中取3尾魚，用MS-222(100 mg/L)進(jìn)行麻醉，尾靜脈采血，放入用一定濃度的肝素鈉潤過的離心管中。血樣于4 ℃冰箱中靜置2 h，然后在4 ℃,3000 g離心10 min，上清液移置-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)的測(cè)定采用葡萄糖氧化酶法，堿性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)的測(cè)定采用比色法，補(bǔ)體3(C3)、補(bǔ)體4(C4)和酚氧化物酶(PO)含量的測(cè)定采用的酶聯(lián)免疫吸附法，以上試劑盒均購自南京建成生物有限公司，詳細(xì)操作步驟見說明書。

1.5數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行處理，用雙因素方差分析(Two-way ANOVA)的方法分析果寡糖水平和采樣時(shí)間是否存在交互作用，若交互顯著則采用Tukey′s多重比較法檢驗(yàn)各組間差異，P<0.05表示差異顯著。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SEM)表示。

2　結(jié)果

2.1果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

由圖1,2可知，在氨氮應(yīng)激下，各組團(tuán)頭魴血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)的活性呈升高趨勢(shì)。在應(yīng)激前，各組GOT水平的差異不顯著，GPT活性 0.4% FOS組顯著低于對(duì)照組和0.8%FOS組。應(yīng)激后，0.4%添加組的GPT活性有的趨勢(shì)，但僅在24 h時(shí)顯著低于0.8%組，0.8%組和對(duì)照組之間并無顯著差異，另外，F(xiàn)OS添加水平和采樣時(shí)間不存在交互作用。

圖1　氨氮應(yīng)激下果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血液 谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響Fig.1　Effects of FOS on plasma GOT levels of blunt snout bream under ammonia stress

大寫字母表示同一個(gè)組在不同時(shí)間點(diǎn)的變化情況，小寫字母表示同一時(shí)間點(diǎn)各組之間的差異。(注釋下同)

圖2　氨氮應(yīng)激下果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血液 谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響Fig.2　Effects of FOS on plasma GPT levels of blunt snout bream under ammonia stress

2.2果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血清堿性磷酸酶和酸性磷酸酶活性的影響

由圖3，4可知，在氨氮應(yīng)激下，各組血清堿性磷酸酶出現(xiàn)顯著降低趨勢(shì)，并在24～48 h幾乎趨于穩(wěn)定；而酸性磷酸酶出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，在3～6 h達(dá)到最高；飼料中添加FOS后，AKP、ACP活性都有所升高，但各組在采樣前后差異均不顯著，且雙因素分析得出果寡糖添加水平和采樣時(shí)間并無交互作用。

圖3　氨氮應(yīng)激下果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血液 堿性磷酸酶含量的影響Fig.3　Effects of FOS on plasma AKP levels of blunt snout bream under ammonia stress

圖4　氨氮應(yīng)激下果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血液 酸性磷酸酶活性的影響Fig.4　Effects of FOS on plasma ACP levels of blunt snout bream under ammonia stress

2.3果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血清補(bǔ)體C3、C4和酚氧化物酶的影響

由圖5，6可知，在氨氮應(yīng)激下各組血清補(bǔ)體C3在0～24 h呈升高趨勢(shì)，而C4在0～12 h呈升高趨勢(shì)，之后出現(xiàn)了降低趨勢(shì)；添加0.4% FOS組在應(yīng)激前C3、C4都顯著高于對(duì)照組，且0.8% FOS組C3出現(xiàn)相似結(jié)果，氨氮應(yīng)激后添加0.4%FOS組C3、C4都有升高趨勢(shì)，但是各組差異并不顯著；由圖7得出，氨氮應(yīng)激前，酚氧化物酶(PO)在0.4%組顯著高于對(duì)照組，而0.8%組和對(duì)照組無顯著差異，氨氮應(yīng)激后對(duì)照組呈先升高后降低的趨勢(shì)，但其它兩組并無顯著變化，且FOS水平和采樣時(shí)間對(duì)C3、C4和PO都無交互作用。

圖5　氨氮應(yīng)激下果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血液補(bǔ)體C3的影響Fig.5　Effects of FOS on plasma C3 levels of blunt snout bream under ammonia stress

圖6　氨氮應(yīng)激下果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血液補(bǔ)體C4的影響Fig.6　Effects of FOS on plasma C4 levels of blunt snout bream under ammonia stress

3　討論

3.1果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是在動(dòng)物組織細(xì)胞內(nèi)參與氨基酸合成與分解的重要氨基酸轉(zhuǎn)移酶，在谷氨酸和丙氨酸的轉(zhuǎn)化中起著催化劑的作用，對(duì)蛋白質(zhì)的代謝起著重要作用，它們的變化在一定程度上能夠反映機(jī)體肝細(xì)胞和心肌細(xì)胞的受損程度[9]，機(jī)體在正常情況下，血清中只有很少量的谷丙轉(zhuǎn)氨酶，但是但機(jī)體的肝組織受到損傷時(shí)，細(xì)胞膜的通透性會(huì)隨之增加，細(xì)胞漿內(nèi)的谷丙轉(zhuǎn)氨酶釋放到血液中，本研究得出谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶都隨著氨氮應(yīng)激時(shí)間的延長呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，并在應(yīng)激后的12 h達(dá)到最大值，這可能是由于高濃度的氨氮脅迫導(dǎo)致機(jī)體脂質(zhì)過氧化物增多，肝細(xì)胞受到損傷，影響了肝細(xì)胞的正常的生理功能，Jeney等[10]研究表明鯉(Cyprinuscarpio)受到高濃度氨氮脅迫后，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力出現(xiàn)類似的趨勢(shì)，胡毅等[11]的研究指出當(dāng)用10 mg/L或20 mg/L的氨氮脅迫青魚時(shí)，其血清也出現(xiàn)谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高的趨勢(shì)。這可能是因?yàn)殡S著應(yīng)激時(shí)間的延長，破壞魚類血清酸堿平衡和血清離子的衡態(tài)，影響了魚體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。非特異性免疫系統(tǒng)遭到破壞，免疫力下降，病原菌的易感染性也增強(qiáng)。但是在添加果寡糖0.4%組谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性與對(duì)照組相比，都有一定程度的降低，這表明果寡糖在氨氮應(yīng)激下有保護(hù)肝細(xì)胞和心肌細(xì)胞作用。

圖7　氨氮應(yīng)激下果寡糖對(duì)團(tuán)頭魴血液酚氧化物酶的影響Fig.7　Effects of FOS on plasma PO levels of blunt snout bream under ammonia stress

3.2果寡糖對(duì)氨氮應(yīng)激下團(tuán)頭魴血清酸性磷酸酶和堿性磷酸酶活性的影響

酸性磷酸酶在體內(nèi)直接參與磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移和代謝，間接增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫能力，堿性磷酸酶是生物體內(nèi)的一種重要的代謝調(diào)控酶,直接參與磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移和鈣磷代謝,在魚類對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與利用過程中發(fā)揮著重要作用。另外，堿性磷酸酶能夠改變病原體的表面結(jié)構(gòu)，從而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)病原體的識(shí)別和吞噬能力[12]。本實(shí)驗(yàn)得出血清中酸性磷酸酶的活性呈先升高后下降的變化趨勢(shì)。堿性磷酸酶一直處于降化可能是因?yàn)轸~生活在氨氮濃度較高的環(huán)境中，機(jī)體會(huì)進(jìn)行一些適應(yīng)性調(diào)節(jié)。在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境脅迫下，可能會(huì)刺激一些酶活性的表達(dá)，酶的活性增強(qiáng)，但是隨著應(yīng)激時(shí)間的延長，某些酶的構(gòu)象會(huì)發(fā)生變化，不利于酶與底物的結(jié)合，從而導(dǎo)致活力下降，這說明機(jī)體對(duì)外界不良刺激的抵抗力下降，機(jī)體很容易受到外界不利因素的刺激而引發(fā)疾病，環(huán)境因子對(duì)組織中酶活性的影響及其作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。本研究得出在應(yīng)激前后血清酸性磷酸酶和堿性磷酸酶活性在0.4%果寡糖組顯著高于對(duì)照組和0.8%組，這表明果寡糖可以提高團(tuán)頭魴的非特異性免疫，增強(qiáng)其抵抗氨氮應(yīng)激的能力。這可能與果寡糖促進(jìn)了益生菌比如芽孢桿菌和乳酸菌的生長和增殖有關(guān)[8]，而這些細(xì)菌的細(xì)胞壁的組成成分比如一些脂多糖等都具有增強(qiáng)免疫功能并能刺激機(jī)體的免疫反應(yīng)，提高免疫力，另外，這些微生物能夠促進(jìn)免疫因子和免疫球蛋白的分泌，增強(qiáng)機(jī)體的免疫活性[13]。

3.3果寡糖對(duì)氨氮應(yīng)激下團(tuán)頭魴血清補(bǔ)體C3、C4和PO活性的影響

血清補(bǔ)體活性已被證實(shí)是一項(xiàng)非常重要的非特異性防御指標(biāo)，能夠保護(hù)機(jī)體抵御病原菌的感染[14]，補(bǔ)體C3、C4是補(bǔ)體系統(tǒng)中的固有成分，有調(diào)節(jié)機(jī)體非特異性免疫的功能[15]，本研究發(fā)現(xiàn)隨著應(yīng)激時(shí)間的延長，補(bǔ)體C3、C4都出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，這可能是因?yàn)轸~類在受到氨氮脅迫后，引起了魚體的急性應(yīng)激反應(yīng)[9]，其通過大量分泌皮質(zhì)醇來促進(jìn)糖的合成、脂肪降解以獲得能量，并通過增加特定蛋白(如溶菌酶、補(bǔ)體和C反應(yīng)蛋白等)的水平來增強(qiáng)機(jī)體的免疫力[9,16]，共同抵抗病原菌的侵襲，從而導(dǎo)致血清中某些蛋白的水平升高，當(dāng)應(yīng)激強(qiáng)度超出魚體防御機(jī)能時(shí)，這些蛋白的合成能力就會(huì)減弱，從而表現(xiàn)為某些酶的活性降低。周顯青等[17]研究結(jié)果表明，應(yīng)激能夠降低中華幼鱉補(bǔ)體活性和含量，魚類受到氨氮應(yīng)激后，魚體的免疫機(jī)能會(huì)受到影響，但是影響程度還會(huì)因種類的不同而有所差異[18]。

酚氧化酶是重要的免疫應(yīng)答因子，在異物識(shí)別中起到重要作用。它在機(jī)體受到外界異物侵襲或者外界環(huán)境發(fā)生變化時(shí)，細(xì)胞會(huì)通過胞吐作用把酚氧化酶原釋放到周圍介質(zhì)中，從而使酚氧化酶被激活，活性升高[19]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明酚氧化酶隨著應(yīng)激時(shí)間的延長呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，在應(yīng)激后的12 h出現(xiàn)最大值，這表明氨氮急性應(yīng)激刺激機(jī)體發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)分泌生物胺等內(nèi)分泌因子，誘發(fā)啟動(dòng)了proPO系統(tǒng)，酚氧化酶原系統(tǒng)釋放到周圍的細(xì)胞間質(zhì)中，出現(xiàn)酶活性升高的現(xiàn)象，這與投喂芽孢桿菌的斑節(jié)對(duì)蝦在注射嗜水氣單胞菌后血液酚氧化酶活性有升高的現(xiàn)象相似。但是隨著應(yīng)激時(shí)間的增長，酶活性出現(xiàn)下降趨勢(shì)，這可能是由于長時(shí)間的氨氮應(yīng)激對(duì)酚氧化酶原的顆粒細(xì)胞造成了損傷[20]，導(dǎo)致PO活性的降低，黃鶴忠等[21]研究表明高濃度的氨氮隨著脅迫時(shí)間的延長，中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)血液中溶菌酶、酚氧化酶和超氧化酶的活性都出現(xiàn)下降的趨勢(shì)，機(jī)體的非特異免疫系統(tǒng)遭到損害，機(jī)體的細(xì)胞和組織都受到一定程度的損傷，由以上結(jié)果可以得出，氨氮對(duì)酚氧化酶的影響是一個(gè)比較復(fù)雜的過程，在一定程度上反映了機(jī)體的健康狀況，其作用機(jī)制還需進(jìn)一步的研究。

飼料中0.4%的果寡糖提高了血清中C3、C4的含量和酚氧化物酶的活性，增強(qiáng)了團(tuán)頭魴的免疫功能，并提高了抗氨氮應(yīng)激的能力。

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(責(zé)任編輯：鄧薇)

Effects of fructooligosaccharide on nonspecific immunity of blunt snout bream (Megalobrama amblycephala) under high ammonia stress

ZHANG Chun-nuan1,REN Hong-tao1,ZHANG Ji-liang1,WU Qiu-jue1,GAO Xiao-chan1,LIU Wen-bin2

(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,HenanUniversityofScientificandTechnology,Luoyang471003,Henan,China;2.CollegeofAnimalScienceandTechnology,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)

This study aimed to determine the effects of fructooligosaccharide (FOS) on immune response of blunt snout bream (Megalobramaamblycephala) under high ammonia stress.A total of 360 fish were randomly distributed into three groups (each with four replicates) and were fed three levels of FOS (0,0.4% and 0.8%) for 8 weeks.After the feeding trial,24 fish per tank were exposed to ammonia at 10 mg/L.From the results,we found that Glutamic Pyruvic Transaminase (GPT) levels of fish fed 0.4% FOS were all significantly lower than that of the other groups at 0h and 24 h.After stress,Plasma acid phosphatase (ACP),complement 3 (C3),complement 4 (C4) and phenoloxidase (PO) activities all increased significantly with the maximum levels being attained at 3,24,12 and12 h,respectively.Thereafter,these parameters all decreased significantly.In addition,fish fed 0.4% FOS showed higher C3,C4and PO compared to that of control group before stress.Whereas,only the C3of fish fed 0.4% FOS showed higher than that of control group at 3 h after stress.There was no significant difference at other times and there was no significant interaction between the FOS levels and the time.The results indicated that the supplementation of 0.4% FOS could increase the non-specific immunity of blunt snout bream,and enhance its resistance to high ammonia stress.

Megalobramaamblycephala;fructooligosaccharide;ammonia stress;immunity

2015-12-16；

2016-06-20

國家大宗淡水魚類產(chǎn)業(yè)體系-鯉和團(tuán)頭魴營養(yǎng)與飼料崗位(CARS-46-20)

張春暖(1987-)，女，河南平頂山人，講師，從事水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料的研究。E-mail:zhangchunnuan12@163.com

劉文斌。E-mail:wbliu@njau.edu.cn

S963.73

A

1000-6907-(2016)05-0064-06