羅娜，唐怡

·藥理毒理·

升麻柴胡復(fù)方對(duì)幼齡雌性小鼠性成熟的影響

羅娜，唐怡

目的：觀察升麻柴胡復(fù)方水提物對(duì)幼齡雌性小鼠性成熟的影響。方法：選用昆明種18～20日齡雌性小鼠，隨機(jī)分為生理鹽水組、戊酸雌二醇組及升麻柴胡復(fù)方水提物高、中、低劑量組。實(shí)驗(yàn)期間每天觀察小鼠陰道開(kāi)口情況，以陰道開(kāi)口情況確定給藥時(shí)間。處死動(dòng)物，稱取小鼠子宮、卵巢組織濕重，并作血清E2含量測(cè)定。結(jié)果：升麻柴胡復(fù)方水提物能提高幼齡小鼠陰道開(kāi)口率（p＜0.05），高、中劑量組能顯著提高幼齡小鼠子宮、卵巢組織濕重指數(shù)（p＜0.01），但對(duì)血清E2含量無(wú)明顯影響（p＞0.05）。結(jié)論：升麻柴胡復(fù)方水提物能促進(jìn)幼齡雌性小鼠性成熟，改善生殖機(jī)能。

升麻柴胡；生殖功能；實(shí)驗(yàn)研究

圍絕經(jīng)期是人體衰老過(guò)程中重要的生理階段，目前研究顯示卵巢功能的衰退是圍絕經(jīng)期變化最為明顯的表現(xiàn)。卵巢作為女性的重要內(nèi)分泌器官，在女性生理、生殖機(jī)能中發(fā)揮著極其重要的作用。多種原因引起的卵巢功能衰退，雌激素分泌下降，在臨床可出現(xiàn)許多與雌激素水平缺乏相關(guān)的癥狀，如潮熱汗出、月經(jīng)紊亂、陰道干澀及抑郁、焦慮等情緒改變；也可導(dǎo)致心血管疾病發(fā)病率上升，如高血壓、冠心病及靜脈血栓形成［1］，使婦女的生活質(zhì)量大大下降［2］。

現(xiàn)有國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)顯示，升麻、柴胡均具有一定改善更年期癥狀的作用，臨床已用于對(duì)女性圍絕經(jīng)期疾病的治療，但多為復(fù)方用藥［3～5］。然而古代文獻(xiàn)對(duì)升麻、柴胡在婦科領(lǐng)域的應(yīng)用記載不多。本研究運(yùn)用實(shí)驗(yàn)研究的手段，對(duì)升麻柴胡復(fù)方是否具有調(diào)節(jié)女性生殖功能進(jìn)行初步的考察，為升麻、柴胡的臨床用藥提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1試驗(yàn)藥物

升麻柴胡復(fù)方水提物：將升麻、柴胡藥材切碎，以3：2（升麻0.18 kg，柴胡0.12 kg）的比例混合，浸泡、煎煮、濃縮取液（相當(dāng)于6g原生藥/kg）；戊酸雌二醇片：由法國(guó)DELPHARM Lille S.A.S.生產(chǎn)，進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)：H20080108，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字J20080036。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種雌性小鼠81只，18～20日齡，體重11～13g。由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（動(dòng)物合格證號(hào)：川實(shí)動(dòng)管質(zhì)第7號(hào)）。

1.3主要測(cè)試儀器

1/10000電子分析天平（德國(guó)BP61）。

1.4方法

1.4.1動(dòng)物分組及處理 將81只雌性幼齡小鼠隨機(jī)分為5組，即生理鹽水組、戊酸雌二醇組、升麻柴胡復(fù)方高劑量組、升麻柴胡復(fù)方中劑量組、升麻柴胡復(fù)方低劑量組。其中生理鹽水組、戊酸雌二醇組每組各15只，其余每組17只。其中生理鹽水組灌胃給予生理鹽水0.1mL/10g/日；戊酸雌二醇組灌胃給予戊酸雌二醇懸濁液（0.2mg/kg·d）；升麻柴胡復(fù)方高、中、低劑量組分別灌胃給予升麻柴胡復(fù)方高劑量溶液（6.0g/kg·d）、升麻柴胡復(fù)方中劑量溶液（3.0g/ kg·d）、升麻柴胡復(fù)方低劑量溶液（1.5g/kg·d），連續(xù)5天。

1.4.2標(biāo)本的采集與處理方法 血清樣本制備：給藥的第6天，采用摘眼球取血法取血。常溫下靜置20分鐘后，分離血清。每組隨機(jī)選取12個(gè)血清樣本，采用放射免疫分析法（RIA），測(cè)定E2的含量。由四川省腫瘤醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科完成。

子宮、卵巢組織樣本制備：采用脊髓離斷法處死全部動(dòng)物，剖腹取出子宮、卵巢，分離周圍附著組織后，立即用1/10萬(wàn)電子分析天平稱取子宮、卵巢的重量。標(biāo)本制取處理后，分別計(jì)算子宮、卵巢組織濕重指數(shù)，即臟器重量指數(shù)=臟器重量/100g體重。

1.5統(tǒng)計(jì)方法

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，檢驗(yàn)水平α=0.05。

2 結(jié)果

2.1各組小鼠實(shí)驗(yàn)前后體重比較

表1　各組小鼠實(shí)驗(yàn)前后體重比較（x±S）

2.2各組小鼠陰道開(kāi)口動(dòng)物數(shù)比較

表2　各組小鼠陰道開(kāi)口動(dòng)物數(shù)比較（x±S）

注：與生理鹽水組比較，※P＜0.05，與生理鹽水組比較，※※P＜0.01

2.3各組小鼠子宮、卵巢組織濕重指數(shù)比較

表3　各組小鼠子宮、卵巢濕重指數(shù)比較（x±S）

2.4各組小鼠血清E2含量比較

表4　各組小鼠血清E2含量比較（x±S）

3 討論

升麻、柴胡作為傳統(tǒng)中藥使用歷史悠久。《神農(nóng)本草經(jīng)》載升麻：“味甘辛。主解百毒，殺百老物殃鬼，辟溫疾，障邪毒蠱。久服不夭?！辈窈骸拔犊啵?。主心腹，去腸胃中結(jié)氣，飲食積聚，寒熱邪氣，推陳致新。久服，輕身、明目、益精”?，F(xiàn)在中藥學(xué)教材普遍描述它們具有解表退熱，升舉陽(yáng)氣，透疹解毒等功效，主要用于治療外感表證，中氣下陷等病證。

升麻、柴胡在婦科方面的應(yīng)用，文獻(xiàn)記載極為有限。如張介賓的《景岳全書(shū)》一書(shū)中記載了升麻配合溻腫湯盥洗，能治療婦人陰內(nèi)膿水淋漓，或癢或痛的病癥。傅青主將其用于治療婦科胎位不正之難產(chǎn)。甄權(quán)認(rèn)為柴胡能“除虛勞，散肌熱”，治“婦人產(chǎn)前產(chǎn)后諸熱，心下痞，胸脅痛”等。古代文獻(xiàn)并沒(méi)有升麻、柴胡對(duì)女性圍絕經(jīng)期疾病治療的記載。然而近年來(lái)文獻(xiàn)報(bào)道，升麻、柴胡能改善圍絕經(jīng)期癥狀，臨床已用于對(duì)本病的治療。故本研究選擇未成熟小鼠作為實(shí)驗(yàn)的模型，采用子宮、卵巢濕重與體重之比的百分?jǐn)?shù)，及血清雌二醇含量作為評(píng)價(jià)藥物作用的指標(biāo)，來(lái)初步探討升麻柴胡對(duì)女性生殖功能的影響作用。結(jié)果顯示升麻柴胡復(fù)方水提物能促進(jìn)未成熟小鼠陰道開(kāi)口，提高未成熟小鼠子宮、卵巢濕重指數(shù)，故升麻柴胡復(fù)方對(duì)生殖機(jī)能具有肯定的促進(jìn)作用，但對(duì)血清雌激素水平?jīng)]明顯影響。因本研究周期較短，其具體作用機(jī)制還有待進(jìn)一步探討。

［1］ 王玉香.圍絕經(jīng)期綜合征的針灸治療［J］.天津中醫(yī)藥，2012，29 （1）：86.

［2］ Kaias N A，Sifakis S，Koumantakis E.Contraception during perimenopausel ［J］.Eur J Contracept Reprod Health Care，2005，10（1）：19.

［3］ 周亮，楊峻山.升麻族植物中的三萜皂苷及其藥理作用［J］.國(guó)外醫(yī)藥·植物藥分冊(cè)，2005，20（4）：149.

［4］ 吳德才.升麻藥理活性研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2009，15（6）：918.

［5］ 彭姝峰，魏華，姚靜，等.柴胡桂枝龍骨牡蠣湯加減治療更年期綜合征58例［J］.光明中醫(yī)，2007，22（9）：53.

（責(zé)任編輯：陳思敏）

The effects of Shenma Caihu compound on sexual maturity in young female mice /

LUO Na， TANG Yi//（School of Pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Chengdu 611137， Sichuan）

Objective: To observe water extract of Shenma Caihu compound on sexual maturity in young female mice. Method: 18～20 days female mice of Kun Ming strain was selected and randomly divided into the saline group， estradiol valerate group and Shenma Caihu compound water extraction of high， medium and low dose group. The vaginal opening situation was observed every day to decide the delivery time. Then wet uterus and ovarian tissue weight were weighted and E2 content in serum was measured after animals were sacrificed. Result: Shenma Caihhu compound water extract could increase the rate of young mice vaginal opening （p ＜ 0.05）. High and middle dose could significantly improve young mice wet weight index of uterus and ovarian tissue （p ＜ 0.01）， but had no obvious effect on serum E2 levels （p ＞ 0.05）. Conclusion: Shenma Caihu compound water extract can promote young female mice sexual maturity and improve reproductive function.

Shenma Caihu compound； reproductive function； experiment research

A

1674-926X（2016）03-017-03

四川省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)研究（編號(hào)：2012JY0040）；四川省教育廳課題（112A068）

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，四川 成都 611137

羅娜，在讀碩士研究生，主要從事中藥學(xué)基礎(chǔ)研究 Tel：18384253125 Email：1138043638@qq.com

唐怡，副教授，主要從事中藥學(xué)研究Tel：18280091885 Email： 513691715@qq.com

2015-08-27