胡名娟，羅孟疌，王美超，江鶴靈，李國偉花都區(qū)人民醫(yī)院病理科，廣東廣州510800

Faasscciinn 在子宮內膜病變組織中的表達及臨床病理意義

胡名娟，羅孟疌，王美超，江鶴靈，李國偉
花都區(qū)人民醫(yī)院病理科，廣東廣州510800

目的通過檢測肌動蛋白聚合蛋白（Fascin）在不同類型子宮內膜病變的表達情況，評估其在子宮內膜增生性病變中的鑒別診斷意義和對子宮內膜樣腺癌預后評估的臨床價值。方法應用免疫組化Envision二步法檢測50例子宮內膜樣腺癌、20例子宮內非典型增生、20例不伴非典型性子宮內膜增生和20例增生期子宮內膜組織中Fascin的表達，并分析Fascin表達程度與子宮內膜樣腺癌臨床病理參數(shù)的相關性。結果Fascin在增生期子宮內膜組織和不伴非典型性子宮內膜增生組織中均不表達，在子宮內膜非典型增生組織中的少量表達（15%，3/20），但在子宮內膜樣腺癌組織中呈彌漫強陽性表達（72%，36/50）。Fascin在子宮內膜樣腺癌與其他內膜病變的表達差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。子宮內膜樣腺癌組織中Fascin的高表達與組織學分級、FIGO分期和肌層浸潤深度均密電碼切相關，但與淋巴結轉移無關（P＞0.05）。結論Fascin在表達有助于子宮內膜樣腺癌與其前驅病變的組織學鑒別診斷，并可能通過調控細胞侵襲遷移影響子宮內膜樣腺癌的發(fā)表和演進。

子宮內膜樣腺癌；肌動蛋白聚合蛋白；鑒別診斷；預后

子宮內膜癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一［1-2］，基于臨床病理和分子遺傳特性，可以將子宮內膜癌分為Ⅰ型和Ⅱ型，子宮內膜樣腺癌是Ⅰ型癌，為雌激素依賴，預后與組織分型、年齡、浸潤深度、子宮外及骨盆播散等相關。雖然幾種常見分子改變被確認為是子宮內膜癌的發(fā)病機制［3-5］，但仍需要其它的分子因素來預測腫瘤的具體行為。臨床研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤惡性轉化，侵襲及轉移與腫瘤細胞胞膜突起、細胞間黏著及連接喪失發(fā)揮著重要作用。Fascin是細胞骨架肌動蛋白的一種捆綁蛋白，參與細胞表面?zhèn)巫愫臀⒓男纬?，可能參與細胞運動及之間的粘附。因此，本文擬探討Fascin在不同類型子宮內膜病變組織中的表達及意義，為子宮內膜癌的發(fā)生發(fā)展的分子機制、診斷以及判斷子宮內膜癌的預后，以及提供靶向治療實驗依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料

收集2013年～2015年在廣州市花都區(qū)人民醫(yī)院婦科收治的子宮內膜病變患者的子宮內膜組織，所有病變均經(jīng)病理組織學確診。其中正常增生期形態(tài)子宮內膜20例；不伴非典型性子宮內膜增生20例；子宮內膜非典型增生例20例；子宮內膜樣腺癌50例。所有患者術前均未接受放射治療及化療。所有組織標本術后經(jīng)4%中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，制作石蠟組織塊并存檔。

1.2主要試劑及檢測方法

免疫組織化學染色采用ChemMate Envision/HRP試劑盒和二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色試劑盒（Dako公司，丹麥）。Fascin單克隆抗體（即用型）購自福州邁新生物技術有限公司。

選取組織標本均經(jīng)4%中性甲醛固定，石蠟包埋，作4 μm連續(xù)切片，分別進行HE染色及免疫組化染色。采用EnVision二步法檢測，具體步驟參照試劑盒說明書進行。Fascin染色分別以已知陽性的卵巢癌和乳腺癌作為陽性對照，PBS代替一抗作空白對照。

1.3結果判斷

腺細胞的細胞膜和/或細胞漿顯示彌漫性棕黃色細顆粒為陽性染色。沒有發(fā)現(xiàn)陽性細胞為陰性（-），陽性細胞＜25%為弱陽性（+），陽性細胞占25%～50%為陽性（++），陽性細胞＞50%為強陽性（+++）。結果判斷由2位不知道患者資料的高年資病理醫(yī)師一起獨立觀察每張切片后進行陽性細胞記數(shù)及背景評判，如有異議由第3位病理醫(yī)師判決。

1.4統(tǒng)計方法

采用SPSSl3.0統(tǒng)計軟件，各組資料采用χ2檢驗分析，以P＜0.05作為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

Fascin在不同類型子宮內膜病變組織中的表達水平變化結果：Fascin蛋白的陽性信號位于子宮內膜腺體、間質和內皮細胞圖1 Fascin在不同子宮內膜組織中的免疫組織化學染色情況EnVision二步法，中倍放大；圖1A示正常增生期子宮內膜腺上皮陰性表達，但在微血管內皮細胞及間質細胞中表達；圖1B示子宮內膜增生，增生上皮呈陰性表達，但在微血管內皮細胞及間質細胞中表達；圖1C示子宮內膜非典型增生，增生的異型上皮細胞胞質及胞膜呈局灶陽性表達而且染色較弱；圖1D示子宮內膜樣腺癌，癌細胞胞質及胞膜染色深而且呈彌漫陽性表達。但在增生期子宮內膜和不伴非典型性子宮內膜增生組織中，F(xiàn)ascin均未在腺上皮內表達，子宮內膜非典型增生組織中僅有少數(shù)病例表現(xiàn)為腺體表達（3/20）。子宮內膜樣腺癌組織中Fascin的表達明顯增多（35/50），與其它病變中Fascin的表達出現(xiàn)顯著性差異（P＜0.05）。Fascin在子宮內膜樣腺癌組織的表達與FIGO臨床分期、組織學分級和肌層浸潤深度均密切相關（P＜0.05），但與淋巴結轉移狀態(tài)無關（P=0.287，表1）。

表1　Fascin表達與子宮內膜病變特征的關系（n）

3　討論

目前普遍學者認為，腫瘤細胞侵犯正常組織的能力是惡性腫瘤的標志，初始階段的轉移過程是個復雜的事件，包括細胞間失粘附、破壞基底膜和細胞外的基質成分，改變細胞胞質的交換以及細胞遷移的基本模式，然后向周圍組織侵襲，進入血管及淋巴管內而進一步向遠處轉移。隨著對腫瘤細胞粘附性認識的提高，人們對Fascin的研究最近受到了相當大的關注。

人類Fascin蛋白為肌動蛋白結合蛋白家族中的一員，又稱聚束蛋白，是一種具有特殊結構且進化保守的細胞骨架肌動蛋白微絲之間的一種捆綁蛋白［6］，是定位于染色體7q22，其相對分子質量為55 000，參與細胞膜表面絲狀偽足和微棘的形成，細胞內Fascin基因的上調表達可導致細胞膜突起增多，細胞間連接發(fā)生解離，細胞運動能力提高［7］，使細胞之間的連接性大大降低，促進腫瘤細胞侵襲與轉移。因此，F(xiàn)ascin蛋白可能參與細胞遷移、細胞黏附以及細胞間信息交流等過程中發(fā)揮作用［8］，這是腫瘤早期發(fā)生浸潤及轉移的重要原因之一，也是惡性腫瘤的本質特性和致死原因，尋求轉移早期潛在的標志物極其重要。子宮內膜樣腺癌是發(fā)生在子宮內膜的一組上皮性的惡性腫瘤，其原因考慮可能與雌激素有關，以直接蔓延和淋巴結轉移為主，但發(fā)病和轉移機制仍有待進一步研究。

最近在上皮性腫瘤中，F(xiàn)ascin在成年人體組織的血管內皮細胞、神經(jīng)元、成纖維細胞、樹突細胞表達，而不在正常和成熟分化的上皮細胞表達［9］。但在上皮性惡性腫瘤中表達上調，上調表達的分子機制尚不十分清楚，可能存在著多條途徑調節(jié)Fascin的表達。有文獻報道，F(xiàn)ascin在多種癌組織如胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌和食管鱗癌等腫瘤組織中均出現(xiàn)高頻率的陽性表達，且隨腫瘤惡性程度的增加而表達增高［10-14］，提示Fascin在腫瘤中的表達上調可能具有普遍性，預后均較差，并與腫瘤侵襲和轉移有關。Fascin蛋白表達增高與腫瘤的臨床病理密切相關［15］。但目前Fascin基因在子宮內膜組織病變中的表達研究報道甚少。黃嶺等［16］觀察Fascin在子宮內膜樣腺癌中的表達率（71.74%）明顯高于子宮內膜增生癥組（15.79%）及正常內膜（5.88%），三者之間比較差異有顯著性（P＜0.01），且Fascin在子宮內膜樣腺癌中的表達隨臨床分期的進展及組織分化程度的降低而增強，本研究結果顯示，F(xiàn)ascin蛋白在子宮內膜樣腺癌組織中的陽性表達明顯高于正常增生期子宮內膜、子宮內膜增生及子宮內膜非典型增生組織，且其陽性表達與病理分級有關，提示Fascin基因可能參與了子宮內膜癌的惡性轉化，但其如何發(fā)揮作用機制以及通過何種途徑調節(jié)細胞間的相互作用還需要進一步研究。本研究結果還顯示，F(xiàn)ascin蛋白在20例正常增生期子宮內膜及子宮內膜增生上皮中不表達，但在固有層中微血管內皮細胞、淋巴細胞及間質細胞中呈陽性表達，見圖1A及B，而在子宮內膜非典型增生及子宮內膜樣腺癌中間質表達減少，而上皮表達上調，見圖1C及D提示Fascin在子宮內膜腫瘤的生成和維持方面有能動作用［17］，是與既往文獻結果一致，這說明Fascin在正常增生期子宮內膜及子宮內膜增生中仍處在靜止狀態(tài)，而在子宮內膜癌變過程中出現(xiàn)比較晚，起到不可逆轉的作用，但這一推測任然需要更多的研究證實。

本研究分析了Fascin蛋白在正常增生期子宮內膜-子宮內膜增生-子宮內膜非典型增生-癌序列中的差異表達，F(xiàn)ascin陽性患者其浸潤率高，提示其局部侵襲能力強于Fascin陰性患者，而肌層浸潤深度高則提示Fascin陽性患者其腫瘤細胞運動能力增強使其易于逃離原發(fā)病灶。在子宮內膜樣腺癌的多步發(fā)生過程中，F(xiàn)ascin蛋白的異常表達表達看來是一早期事件，通常在癌中表達上調，與腫瘤組織學分級、臨床分期及肌層浸潤深度相關，因此以Fascin蛋白為靶點也許能為子宮內膜樣腺癌的病變機制、早期診斷、預后評價及新的治療提供新的思路。

［1］Siegel R，Naishadham D，Jemal A.Cancer statistics，2013［J］.CA Cancer J Clin，2013，63（1）:11-30.

［2］Jeong NH，Lee JM，Lee SK.Current status in the management of uterine corpus cancer in Korea［J］.J Gynecol Oncol，2010，21（3）: 151-62.

［3］Stewart CJ，Crook ML，Leung YC，et al.Expression of cell cycle regulatory proteins in endometrial adenocarcinoma:variations in conventional tumor areas and in microcystic，elongated and fragmented glands［J］.Mod Pathol，2009，22（5）:725-33.

［4］K?bel M，Langhammer T，Hüttelmaier S，et al.Ezrin expression is related to poor prognosis in FIGO stage I endometrioid carcinomas ［J］.Mod Pathol，2006，19（4）:581-7.

［5］Salvesen HB，Akslen LA.Molecular pathogenesis and prognostic factors in endometrial carcinoma［J］.APMIS，2002，110（10）: 673-89.

［6］Jayo A，Parsons M.Fascin:a key regulator of cytoskeletal dynamics ［J］.Int J Biochem Cell Biol，2010，42（10）:1614-7.

［7］Yamashiro S，Yamakita Y，Ono S，et al.Fascin，an actin-bundling protein，induces membrane protrusions and increases cell motility of epithelial cells［J］.Mol Biol Cell，1998，9（5）:993-1006.

［8］Sch?fer C，F(xiàn)aust U，Kirchgessner N，et al.The filopodium:a stable structure with highly regulated repetitive cycles of elongation and persistence depending on the actin cross-linker fascin［J］.Cell Adh Migr，2011，5（5）:431-8.

［9］Zhang FR，Tao LH，Shen ZY，et al.Fascin expression in human embryonic，fetal，andnormaladulttissue［J］.JHistochem Cytochem，2008，56（2）:193-9.

［10］Swierczynski SL，Maitra A，Abraham SC，et al.Analysis of novel tumor markers in pancreatic and biliary carcinomas using tissue microarrays［J］.Hum Pathol，2004，35（3）:357-66.

［11］Crothey A，Hashizume R，Sahin AA，et al.Fascin，an actinbundling protein associated with cell motility，is upregulated in hormone receptor negative breast Cancer［J］.Br J Cancer，2000，83（5）:870-3.

［12］Hu W，Mecrea PD，Deavers M，et al.Increased expression of fascin ［J］.motility associated protein，in cell cultures derived from ovariancancer and in borderline and carcinomatous ovarian tumors. ClinExp Metastasis，2000，18（7）:83-8.

［13］Pelosi G，Pastorino U，Pasini F，et al.Independent prognostic value of fascin immunoreactivity in stage I nonsmall cell lung cancer［J］. Br J Cancer，2003，88（4）:537-47.

［14］Hashimoto Y，Ito T，Inoue H，et al.Prognostic significance of fascin overexpression in human esophageal squamous cell carcinoma［J］. Clin Cancer Res，2005，11（7）:2597-605.

［15］Hashimoto Y，Kim DJ，Adams JC.The roles of fascins in health and disease［J］.J Pathol，2011，224（3）:289-300.

［16］黃嶺，馬曉欣，舒紅.fascin在子宮內膜病變中的表達及意義［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志，2008，18（2）:198-201.

［17］Kabukcuoglu S，Oner U，Ozalp SS，et al.Prognostic significance of fascin expression in endometrioid carcinoma［J］.Eur J Gynaecol Oncol，2006，27（5）:481-6.

Expression of Fascin in endometrial lesions and its clinicopathological significances

HU Mingjuan，LUO Mengjie，WANG Meichao，JIANG Heling，LI Guowei
Department of Pathology，Huadu District People's Hospital of Guangzhou City，GuangZhou 510800，China

Objective To investigate the expression of Fascin in varied endometrial lesions of uterus and to evaluate its clinicopathological significances in histoloical diagnosis and prognosis prediction of lesions.Methods Fifty endometrioid adenocarcinomas（EA），20 atypical hyperplasia of endometrium（AH），20 endometrial hyperplasia without atypia（HWA）and 20 proliferative phase of endometrium（PPE）were collected.Fascin expression was detected in these lesions by immunohistochemical staining.The relationship between Fascin expression and clinicopathological parameters of lesions was statistically analyzed.Results There was no expression of Fascin in PPE and HWA and AH showed Fascin expression（15%，3/ 20）.Fascin could be detected strongly and diffusely in the most of EA（72%，36/50）.There was a significant difference between EA and other lesions in Fascin expression（P＜0.05）.In EAs，F(xiàn)ascin expression was closely correlated with tumor histological grading，F(xiàn)IGO staging，and depth of myometrial invasion，respectively.There was no correlation found between Fascin expression and lymph node metastasis（P＞0.05）.Conclusion Fascin might be an important molecular marker for differential diagnosis between EA and its precursor lesions.Furthermore，F(xiàn)ascin might play a critical role in development and progression of ES by modulating tumor cell invasion and migration.

Endometrioid adenocarcinoma；Fascin；differential diagnosis；prognosis

2016-04-21

廣州市花都區(qū)科技計劃項目（13-HDWS-003）

胡名娟，主治醫(yī)師，本科，E-mail:694777171@qq.com