秦靜英

（南寧市衛(wèi)生學(xué)校，廣西 南寧 530031）

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)乙肝兩對(duì)半的教學(xué)體會(huì)

秦靜英

（南寧市衛(wèi)生學(xué)校，廣西 南寧 530031）

為達(dá)成我校以學(xué)生的發(fā)展為本，提高學(xué)生的就業(yè)競(jìng)爭(zhēng)能力、升學(xué)競(jìng)爭(zhēng)能力和可持續(xù)發(fā)展能力的辦學(xué)目標(biāo)，免疫學(xué)檢驗(yàn)課程制訂專業(yè)課教學(xué)與臨床崗位零距離對(duì)接的教學(xué)目標(biāo)。結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)乙肝兩對(duì)半的理論及實(shí)驗(yàn)教學(xué)談?wù)劷虒W(xué)體會(huì)。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；乙肝兩對(duì)半；免疫學(xué)檢驗(yàn)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）由于具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，在臨床免疫檢驗(yàn)診斷中廣泛應(yīng)用。乙肝兩對(duì)半的檢測(cè)常用ELISA法，該實(shí)驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目多，步驟繁瑣，操作上涉及靜脈采血技術(shù)，血清稀釋，洗板機(jī)、酶標(biāo)儀、離心機(jī)、水浴箱的使用［1］，實(shí)驗(yàn)診斷受到抗原抗體濃度、酶結(jié)合物濃度以及質(zhì)量控制等因素的影響。

為達(dá)成我校以學(xué)生的發(fā)展為本，提高學(xué)生的就業(yè)競(jìng)爭(zhēng)能力、升學(xué)競(jìng)爭(zhēng)能力和可持續(xù)發(fā)展能力的辦學(xué)目標(biāo)，免疫檢驗(yàn)課程通過制訂專業(yè)課教學(xué)與臨床崗位零距離對(duì)接的教學(xué)目標(biāo)，實(shí)施學(xué)生自主學(xué)習(xí)—教師點(diǎn)撥輔導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式。按照免疫檢驗(yàn)臨床實(shí)際的工作流程和質(zhì)量管理，我們對(duì)ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半進(jìn)行相應(yīng)教學(xué)設(shè)計(jì)，將理論知識(shí)和技術(shù)應(yīng)用能力的訓(xùn)練滲透到實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中，便于學(xué)生牢固地掌握理論知識(shí)，讓學(xué)生學(xué)有所得、學(xué)有所思、學(xué)有所用，以下談?wù)劰P者的教學(xué)體會(huì)。

1　采用的教法、學(xué)法

以往的理論授課采用傳統(tǒng)的講授法，由于受到課堂規(guī)則、心理環(huán)境、激勵(lì)機(jī)制等因素的影響，教師在課堂講授過程中存在許多不盡如人意的地方。如ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半涉及雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法原理，內(nèi)容上有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)南到y(tǒng)性和組織性，授課中若只是簡(jiǎn)單地將知識(shí)點(diǎn)堆積，沒有講清知識(shí)之間的內(nèi)在聯(lián)系，會(huì)在一定程度上影響課堂教學(xué)的實(shí)際效果。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備、儀器的準(zhǔn)備及調(diào)試、標(biāo)本及試劑的處理等工作基本上是由指導(dǎo)教師包辦，實(shí)驗(yàn)的許多中間環(huán)節(jié)學(xué)生沒有親自參與，因而在教學(xué)任務(wù)完成后，部分學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的原理、操作還是一知半解，更談不上能力的鍛煉和培養(yǎng)。我們根據(jù)學(xué)生的學(xué)習(xí)特點(diǎn)和認(rèn)知規(guī)律，通過優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容，注重理論聯(lián)系實(shí)際，在教法上采用任務(wù)驅(qū)動(dòng)法、直觀教學(xué)法、討論教學(xué)法及實(shí)驗(yàn)教學(xué)法等，激發(fā)學(xué)生進(jìn)一步探究問題、積極參與教學(xué)活動(dòng)的欲望。

實(shí)驗(yàn)過程中注重培養(yǎng)學(xué)生的職業(yè)能力，提高學(xué)生分析問題、解決問題的能力，因而采用自主學(xué)習(xí)法、合作探究法、分析討論法等。如在教學(xué)準(zhǔn)備環(huán)節(jié)，將學(xué)生分組（5人/組），指定各組組長(zhǎng)，布置以下學(xué)習(xí)任務(wù)：（1）乙肝兩對(duì)半包括哪些項(xiàng)目？（2）常見的乙肝兩對(duì)半檢測(cè)結(jié)果是哪些？有何臨床意義？（3）應(yīng)用了ELISA的什么原理？（4）接觸血液、分離血清標(biāo)本需實(shí)施哪些安全保護(hù)措施？（5）實(shí)驗(yàn)用品的準(zhǔn)備和注意事項(xiàng)有哪些？

2　使用多媒體信息技術(shù)手段輔助教學(xué)

2.1登錄網(wǎng)站搜集資料，建立QQ、微信討論組

乙肝兩對(duì)半檢測(cè)與實(shí)際生活聯(lián)系較為密切，學(xué)生對(duì)于乙肝病毒的傳染性、病毒攜帶者、“大三陽”等知識(shí)有所了解，但學(xué)生對(duì)乙肝病毒采用的檢測(cè)方法及原理、臨床意義缺乏認(rèn)識(shí)。教學(xué)設(shè)計(jì)中，我們注重理論聯(lián)系實(shí)際，讓學(xué)生感到所思考的問題是熟悉的、常見的，同時(shí)又是新奇的、富有挑戰(zhàn)性的，激發(fā)學(xué)生探究問題、尋找答案的欲望。教師布置學(xué)習(xí)任務(wù)后，學(xué)生通過查閱書籍、登錄網(wǎng)站搜集資料，并結(jié)合自己或家人曾經(jīng)到醫(yī)院檢驗(yàn)科化驗(yàn)檢查的結(jié)果來獲取乙肝兩對(duì)半檢測(cè)的相關(guān)知識(shí)。通過QQ、微信的形式建立討論組，針對(duì)ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半的相關(guān)知識(shí)進(jìn)行討論，分享學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)，教師及時(shí)跟進(jìn)、指導(dǎo)，在討論組實(shí)現(xiàn)師生、生生討論。

2.2Flash動(dòng)畫及圖片的應(yīng)用

ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半涉及雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法原理，抽象難懂，通過Flash動(dòng)畫、圖片演示，把實(shí)驗(yàn)原理直觀形象地展示出來，可以增強(qiáng)教學(xué)內(nèi)容的可讀性和可接受性，解決內(nèi)容單調(diào)乏味、難以接受的問題。教師針對(duì)重要知識(shí)點(diǎn)提問，由此突破教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)，可達(dá)到預(yù)期的教學(xué)效果。

2.3教學(xué)錄像、視頻的應(yīng)用

教學(xué)過程中，以學(xué)生的學(xué)為中心，以符合學(xué)生的認(rèn)知規(guī)律為前提，為使學(xué)生對(duì)操作步驟有感性認(rèn)識(shí)，我們?cè)O(shè)計(jì)、制作適合于教學(xué)對(duì)象的教學(xué)錄像、視頻，使得操作更為直觀［2］，促使學(xué)生對(duì)原有知識(shí)進(jìn)行回顧和鞏固，培養(yǎng)學(xué)生的思維能力、記憶力、主動(dòng)學(xué)習(xí)能力。如通過視頻導(dǎo)入教學(xué)，視頻內(nèi)容為某患者出現(xiàn)了肝炎的臨床癥狀，血清乙肝兩對(duì)半檢測(cè)結(jié)果為HBsAg（+）；HBeAg（-）；抗-HBs（-）；抗-HBe（-）；抗-HBc（-），提出問題：（1）乙肝兩對(duì)半常用何種方法檢測(cè)；（2）患者的檢測(cè)結(jié)果如何分析？有何意義？從一開始上課就牢牢地吸引學(xué)生的注意力，加深學(xué)生對(duì)乙肝兩對(duì)半檢測(cè)意義的理解。

此外，我們自制了乙肝兩對(duì)半檢測(cè)的教學(xué)錄像、洗板機(jī)及酶標(biāo)儀的編程錄像。教師針對(duì)性地對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)如操作步驟、結(jié)果觀察、注意事項(xiàng)進(jìn)行重點(diǎn)講解，激發(fā)學(xué)生參與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的熱情，增強(qiáng)學(xué)生做好實(shí)驗(yàn)的自信心。

2.4計(jì)算機(jī)交互平臺(tái)的應(yīng)用

為了檢驗(yàn)學(xué)生對(duì)ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半的理論掌握程度、提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技能、完善學(xué)生免疫檢驗(yàn)課程成績(jī)?cè)u(píng)價(jià)體系，我們對(duì)學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)考核，采取以考促學(xué)的手段，加大ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半的訓(xùn)練力度，包括理論考核（30分）和操作考核（70分）。

理論考核采用本教研室的計(jì)算機(jī)交互平臺(tái)進(jìn)行，根據(jù)教學(xué)內(nèi)容的特點(diǎn)，理論考核我們進(jìn)行這樣的設(shè)計(jì)：首先收集乙肝兩對(duì)半檢測(cè)相關(guān)試題共25題，內(nèi)容涉及實(shí)驗(yàn)原理、操作、材料、結(jié)果觀察及臨床意義。如：（1）乙肝兩對(duì)半檢測(cè)涉及ELISA的哪些原理？分別檢測(cè)什么項(xiàng)目？（2）通過各反應(yīng)孔顯色，如何判斷疫苗接種者、病毒攜帶者、“大三陽”、“小三陽”？（3）手工洗滌有何要求？（4）加終止液的目的是什么？（5）ELISA常用的酶是哪種？其底物是什么？考慮到學(xué)生對(duì)理論考核容易產(chǎn)生畏難情緒，在題型上設(shè)有填充題、標(biāo)示題、連線題及填空題等，內(nèi)容直觀、清晰，以PPT形式組卷，使學(xué)生“寓考于樂”，輕松愉快地完成理論考核。從試題庫集中抽題組卷，考核內(nèi)容及題型見表1，共組10套試卷。學(xué)生抽簽后通過計(jì)算機(jī)交互平臺(tái)進(jìn)行考試，本教研室的計(jì)算機(jī)交互平臺(tái)可實(shí)現(xiàn)全班學(xué)生同時(shí)測(cè)試及無紙化考試。

表lELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半理論考核內(nèi)容及題型

圖1　ELISA雙抗體夾心法測(cè)HBsAg

2.5開放式微生物教學(xué)系統(tǒng)的應(yīng)用

ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半在內(nèi)容上與醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、生物化學(xué)密切相關(guān)。開放式微生物教學(xué)系統(tǒng)操作簡(jiǎn)單、直觀，同時(shí)具有良好的交互界面、動(dòng)態(tài)效果，能夠從視覺上、聽覺上吸引學(xué)生的注意力，為學(xué)生提供自主學(xué)習(xí)的平臺(tái)，擴(kuò)充相關(guān)學(xué)習(xí)內(nèi)容。學(xué)生在課后可進(jìn)入開放式微生物教學(xué)系統(tǒng)，通過觀看視頻，針對(duì)乙肝病毒的內(nèi)容進(jìn)行學(xué)習(xí)。該教學(xué)系統(tǒng)能幫助學(xué)生復(fù)習(xí)、鞏固相關(guān)知識(shí)，并能重復(fù)學(xué)習(xí)。

3　督導(dǎo)實(shí)驗(yàn)，及時(shí)進(jìn)行總結(jié)

乙肝兩對(duì)半共有5個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，目前多采用商品化的ELISA試劑盒，需用到5種試劑盒，各個(gè)項(xiàng)目的操作步驟不同，實(shí)驗(yàn)中若不細(xì)心就容易出錯(cuò)。在學(xué)生操作過程中，教師巡視指導(dǎo)，督導(dǎo)每位學(xué)生的操作。此外，每個(gè)小組由小組長(zhǎng)協(xié)助監(jiān)督，及時(shí)發(fā)現(xiàn)錯(cuò)誤并糾正，以免影響結(jié)果。

由于學(xué)生用的是自體標(biāo)本，實(shí)驗(yàn)態(tài)度與參與積極性明顯提高，且操作認(rèn)真。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，學(xué)生很急切地想要知道自己的檢測(cè)方法對(duì)不對(duì)，結(jié)果與預(yù)計(jì)的是否符合。在教師的組織下，學(xué)生對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行分析及總結(jié)，可加深對(duì)乙肝和ELISA檢測(cè)法的認(rèn)知。如本次課學(xué)會(huì)了什么？有何體會(huì)？總結(jié)成功的經(jīng)驗(yàn)、失敗的經(jīng)驗(yàn)、容易出錯(cuò)的環(huán)節(jié)等。每組學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)過程和實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行整理和綜合分析，每名學(xué)生完成一份實(shí)驗(yàn)報(bào)告。通過總結(jié)，進(jìn)一步加深學(xué)生對(duì)乙肝兩對(duì)半檢測(cè)相關(guān)知識(shí)的理解，加深對(duì)免疫學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)技能的認(rèn)知。

4　重視人文關(guān)懷，拓展知識(shí)，做好防治

我國(guó)人群中乙肝病毒感染率為10%，醫(yī)學(xué)生是未來的醫(yī)務(wù)人員，是高危人群，醫(yī)院內(nèi)污染的器械、血標(biāo)本及各種不規(guī)范操作均可引起感染。ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半所用的標(biāo)本為學(xué)生自體血清標(biāo)本，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，絕大多數(shù)學(xué)生為健康人，乙肝兩對(duì)半5項(xiàng)全陰性的學(xué)生要求在實(shí)習(xí)前完成乙肝疫苗的全程接種，通過接種疫苗關(guān)愛自己，保護(hù)他人［3］。對(duì)乙肝病毒感染的可疑標(biāo)本，由指導(dǎo)教師復(fù)查，以確定是否具有傳染性，以便讓學(xué)生及時(shí)到?？圃\治，對(duì)感染了乙肝病毒的學(xué)生，教師要保護(hù)學(xué)生的隱私，指導(dǎo)學(xué)生以正確的態(tài)度去面對(duì)，不要產(chǎn)生心理負(fù)擔(dān)，同時(shí)要重視乙肝的防治。

通過觀看乙肝宣傳片，完成乙肝手抄報(bào)作業(yè)，加深學(xué)生對(duì)乙肝流行情況、臨床表現(xiàn)、臨床類型、檢測(cè)方法及防治原則的認(rèn)知，積累自我保護(hù)經(jīng)驗(yàn)。在集體生活環(huán)境中注意個(gè)人衛(wèi)生，不用他人的生活用品，養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣［4］。在實(shí)際工作中，樹立防范意識(shí)，在微生物檢驗(yàn)、生物化學(xué)檢驗(yàn)、臨床檢驗(yàn)等專業(yè)課程開設(shè)的實(shí)驗(yàn)中正確處理血標(biāo)本、血污染物品，規(guī)范操作，避免意外感染的發(fā)生。

5　制訂切實(shí)可行的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

結(jié)合本課題的教學(xué)目標(biāo)、教學(xué)內(nèi)容和學(xué)生的學(xué)習(xí)環(huán)境以及學(xué)生個(gè)體差異等制訂切實(shí)可行的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。設(shè)計(jì)了教師評(píng)價(jià)、小組評(píng)價(jià)及個(gè)人評(píng)價(jià)，從各個(gè)角度對(duì)本課題的實(shí)施情況進(jìn)行評(píng)價(jià)。以2014級(jí)86位學(xué)生為例，評(píng)價(jià)結(jié)果見表2。通過評(píng)價(jià)，有助于學(xué)生反思和調(diào)控自己的學(xué)習(xí)過程，讓每名學(xué)生都能體驗(yàn)到成功的樂趣，非常有利于學(xué)生更好地認(rèn)識(shí)自我，樹立自信。

免疫學(xué)檢驗(yàn)課程實(shí)踐性強(qiáng)，理論內(nèi)容抽象不易學(xué)習(xí)。實(shí)驗(yàn)前，學(xué)生對(duì)ELISA夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法等概念及原理存在模糊、混淆的情況。教師應(yīng)在ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半的理論和實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中強(qiáng)調(diào)理論聯(lián)系實(shí)際，對(duì)教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)環(huán)節(jié)進(jìn)行精心設(shè)計(jì)，使學(xué)生很快掌握該實(shí)驗(yàn)的原理、操作、結(jié)果判斷及分析，對(duì)乙肝的傳播途徑、致病性、防治方法及免疫有一定的認(rèn)知，使專業(yè)技能得到進(jìn)一步提高，為實(shí)習(xí)及將來的工作打好基礎(chǔ)。

表2　ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半的小組評(píng)價(jià)結(jié)果

［1］田兆菊.綜合性實(shí)驗(yàn)在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用及體會(huì)［J］.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35（2）：250-251.

［2］石云.多媒體教學(xué)在臨床免疫學(xué)及檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2011，15（2）：1379-1380.

［3］鄧青.乙肝疫苗免疫效果評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)，2010，27（4）：388-389.

［4］程君平.在微生物與免疫實(shí)驗(yàn)教學(xué)中開展ELISA檢測(cè)乙肝的意義［J］.衛(wèi)生職業(yè)教育，2004，22（18）：108-109.■

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1671-1246（2016）16-0053-03