劉錦波，楊　杰，郝建璽，劉作喜（.江蘇省蘇州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院醫(yī)學(xué)部，蘇州 5；.內(nèi)蒙古呼倫貝爾生態(tài)產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院，海拉爾 0008；.黑龍江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，哈爾濱 50080）

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天麻種子共生菌
—萌發(fā)菌生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)

劉錦波1，楊杰2，郝建璽2，劉作喜3
（1.江蘇省蘇州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院醫(yī)學(xué)部，蘇州 215123；2.內(nèi)蒙古呼倫貝爾生態(tài)產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院，海拉爾 021008；3.黑龍江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，哈爾濱 150080）

摘要：天麻（Ggstrodia elata Bl）是傳統(tǒng)名貴中藥材，治療心腦血管，頑固性頭痛，四肢麻木，口眼歪斜，肺癆咳嗽等疾病具有特效。文章介紹紫萁小菇（Mycena osmundicola Lange）萌發(fā)菌的關(guān)鍵技術(shù)，該技術(shù)是保障天麻種子及其箭麻、白麻、米麻的質(zhì)量和產(chǎn)量的一項重要創(chuàng)新技術(shù)，是廣大城鄉(xiāng)農(nóng)村林區(qū)脫貧致富奔小康的一項重要產(chǎn)業(yè)。

關(guān)鍵詞：紫萁小菇（Mycena osmundicola Lange） 箭麻（Mature） 菌材

1　紫萁小菇（萌發(fā)菌）的生長發(fā)育條件

紫萁小菇屬擔(dān)子菌綱小菇屬 ［Mycena］中的一個真菌品種，以菌絲形態(tài)侵入天麻種胚，提供營養(yǎng)，成倍提高種子萌發(fā)率，故稱紫萁小菇等真菌為天麻種子共生菌—萌發(fā)菌；對多株萌發(fā)菌篩選，在其中GSF—8104號菌株是萌發(fā)菌中最優(yōu)良的菌株。（1）腐生。萌發(fā)菌，能分泌出酶，對木質(zhì)素纖維素有很強的分解能力。不僅能腐生在枯枝落葉，及一些植物的腐根上，而且又能侵入具有生命力的天麻種子中，與種子共生萌發(fā)，有利提高種子發(fā)芽率。（2）好氣性。萌發(fā)菌是一種好氣性真菌類；在培養(yǎng)料壓得過緊就會影響它的菌絲體生長發(fā)育。培養(yǎng)萌發(fā)菌要注意通風(fēng)換氣。（3）發(fā)熒光。在黑暗的空間培養(yǎng)紫其小菇（萌發(fā)菌），有時會發(fā)現(xiàn)它能發(fā)出微弱的熒光，但發(fā)熒光強度比蜜環(huán)菌差一點。（4）萌發(fā)菌對天麻塊莖無侵染能力，是屬寄生菌，只能從天麻種子柄狀細胞侵入種胚，當(dāng)蜜環(huán)菌侵入原球莖分化出的營養(yǎng)繁殖莖后，紫萁小菇和蜜環(huán)菌同時存在于同一個營養(yǎng)繁殖莖中，逐漸被蜜環(huán)菌代替，它不會侵入天麻各類塊莖造成病害，它不是天麻塊莖繁殖的致害菌。（5）溫度。目前，天麻種子共生菌萌發(fā)菌菌絲體GSF-8102號，GSf-8103號，一般在15～28℃溫度范圍內(nèi)均能生長。以25℃生長適宜，而GSF-8107在20～25℃生長適宜，以20℃生長最佳。（6）基質(zhì)含水量對萌發(fā)菌生長的影響。實踐中發(fā)現(xiàn)有的菌株如GSF-8103號，807-05號，均以98%含水量菌絲體生長最好，而GSF-8104號菌絲體的生長隨著基質(zhì)含水量增加而加快，最適宜含水量為基質(zhì)重量的85%～95%。（7）pH值。萌發(fā)菌的菌絲體生長是一般在培養(yǎng)基呈中性及偏微酸性條件均能生長，但生長最適宜的pH值是5.0～5.5；若pH值在7.3～7.5的堿性條件不利于菌絲體生長。（8）營養(yǎng)物質(zhì)。雜木屑與麥麩按著一定比例（或體積3∶1）配制的培養(yǎng)基，對各類萌發(fā)菌的菌株，在適宜溫度條件下，對菌絲生長都有促進作用，菌絲生長快而又旺盛。在液體培養(yǎng)基中，以葡萄糖作為碳源的，供試菌株的菌絲體生長最佳，尤其對GSF-8103號，GSF-8104號作用更為明顯，菌球稠密，菌絲潔白旺盛，在以葡萄糖為基礎(chǔ)的培養(yǎng)液內(nèi)，分別加入一定量花生餅粉，及麥麩對紫萁小菇和GSF-8103號菌絲體生長效果最好，菌絲多而稠密，對其它萌發(fā)菌也有一定促進作用。

2　原種配方及生產(chǎn)種

2.1原種配方

雜木屑（闊葉樹）73%、麥麩23%、玉米粉2%、CaS04·2H20 1%、葡萄糖1%、含水量60%～65%，滅菌后pH值為5.5～6.0。制作方法：將原材料和藥品按比例，秤量準(zhǔn)確；先干拌料，再濕拌，拌料要均勻一致，調(diào)節(jié)含水量做到濕度均勻一致，在60%～65%，和pH值要均勻一致，在6.5～7.0后，進行裝袋或裝瓶（500～750 m1）進行徹底滅菌消毒之后，冷卻在30℃以下，按無菌條件進行嚴(yán)格接種。

2.2生產(chǎn)菌種

在無菌條件下，用每瓶原種接生產(chǎn)種45瓶（500 ml），接種后在20～25℃的空間培養(yǎng)，空間濕度在60%～70%，保持空氣新鮮，在微光或黑暗的條件下培養(yǎng)30～40 d左右，菌絲長滿瓶，可用來拌播天麻種子的生產(chǎn)菌種。

3　萌發(fā)菌拌播天麻種子

3.1天麻種子采收

在6～7月上中旬是天麻種子成熟期，蒴果成熟一個采收一個，天麻種子壽命不長，不宜久放，種子采收后，應(yīng)立即播種，最好邊收邊播，會提高種子的發(fā)芽率。因故不能馬上播種，可將種子放入紙袋中，可放在3～5℃的冰箱中保存，保存不能超過12 d。

3.2三級樹葉（柞樹葉）播種

將培養(yǎng)好萌發(fā)菌樹葉栽培種，從菌瓶取出，放在較大的干凈容器中，將成熟的天麻種子輕輕均勻的撒在菌葉上，邊撒邊拌防止種子集堆在一個或幾個菌葉上，做到均勻一致。

3.3具體播種方法

圖1　天麻異株異花授粉

（1）菌床接菌播種。先培養(yǎng)好蜜環(huán)菌床，播種時挖開菌床取出菌棒，在菌床底部，先鋪一層青杠樹，柞樹的樹葉（約1.6 cm厚），樹葉事先浸泡一下水為好。然后將己拌好菌葉天麻種子，分成兩部分，一部分撒鋪在底層，在底層上擺好蜜環(huán)菌棒，棒間留有2～2.5 cm的間距，填腐殖土至棒平，其上鋪一層樹葉后，再將另一部分菌葉撒鋪其上，放置蜜環(huán)菌棒后覆腐殖土4～5 cm厚，其上覆蓋3 cm厚的枯枝落葉保濕。

（2）創(chuàng)新菌枝播種法。關(guān)鍵是全用新木棒，播種時挖寬70 cm，長100 cm，深20～30 cm的畦床，鋪上一層樹葉，撒上一層拌種菌葉后，擺上新棒，兩棒間距在2 cm左右，用三級菌瓶，每瓶里約有30根左右蜜環(huán)菌菌枝，在兩棒之間和棒頭放5～6根小菌枝，即可蓋土至棒平用同法播上層，畦床最頂部覆土l0 cm其上覆一層枯枝落葉保濕。該法的特點是菌材新鮮，營養(yǎng)豐富，蜜環(huán)菌生命力強無雜菌，促使蜜環(huán)菌菌絲體和萌發(fā)菌生長旺盛，種子發(fā)芽率高，箭麻塊莖增多提高天麻產(chǎn)量，是最佳的一種創(chuàng)新播種方法。

4　播種后菌床的管理

4.1調(diào)節(jié)溫度

天麻種子發(fā)芽的適宜溫度是22～25℃，若溫度低，可覆蓋草簾子保持或提高溫度。當(dāng)高溫時，要在菌床上搭棚遮蔭等措施促使降溫，防止高溫出現(xiàn)。有條件可設(shè)自動調(diào)溫系統(tǒng)，保持溫度穩(wěn)定。

4.2控制好濕度

保持菌床內(nèi)的濕度60%～65%，滿足天麻種子萌發(fā)生長，秋天雨水過多時，應(yīng)適當(dāng)搭遮雨棚，挖好排水溝，及時排水。不能積水，防止?fàn)€麻產(chǎn)生。

5　采收時間與標(biāo)準(zhǔn)

5.1天麻采收期

天麻種子播下后，不能隨意翻動，防止錯位，影響種子萌發(fā)和幼麻的生長發(fā)育。

翌年春季，畦床內(nèi)米麻和白麻生長速度較快，此時床內(nèi)的蜜環(huán)菌已供給天麻的有機營養(yǎng)物質(zhì)。到了11月天麻進入第二次休眠時，便可以采收，其間經(jīng)歷的時間為1年半，即前一年5～7月播種，翌年11月份采收。采收可用專用自動采麻機木制的工具，取出大小天麻，去掉粘附的泥土，采收完一處后再取出菌材，繼續(xù)采收剩余的天麻，直到畦床（窖）全部采收干凈為止。

圖2　生產(chǎn)天麻的優(yōu)質(zhì)菌種

5.2采收標(biāo)準(zhǔn)

采收的天麻，按標(biāo)準(zhǔn)大小分級，頂端有芽類似鸚哥嘴的稱箭麻，比較小的，在15 g以上稱白頭麻，在2～10 g為小白麻，似黃豆粒大小的在2 g以下為小米麻。相當(dāng)于拇指般大?。?～10 g），頂端看不到明顯的芽稱小白頭麻，類似黃豆粒大小稱小米麻（2 g以下）。首先將箭麻應(yīng)加工成商品麻。白頭麻和米麻置于室內(nèi)陰暗潮濕處，通風(fēng)良好的空間，用細砂土蓋縫隙埋好，妥善貯藏作種栽。

6　結(jié)論

該文天麻種子共生菌—萌發(fā)菌生產(chǎn)的創(chuàng)新關(guān)鍵技術(shù)，能提高天麻產(chǎn)品，箭麻（商品麻）的產(chǎn)量約占總產(chǎn)量的30%左右。白麻（immature tuber）和米麻（juvenile tuber）各占35%。不僅為治療疾病提供名貴的中醫(yī)藥材，為持續(xù)發(fā)展天麻有性繁殖和無性繁殖提供大量的標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)質(zhì)種源?？蛇M行大面積規(guī)模化，周期性循環(huán)套式畦床箱栽天麻（Gastrodia elata Bl.），包括精深加工一體化，可獲豐厚的經(jīng)濟效益達數(shù)千萬元以上。

參考文獻

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