史傳道，張榮強，張志剛，樊曉晨（.陜西中醫(yī)藥大學，陜西 咸陽 7046；.陜西省西安市紅十字會醫(yī)院，陜西 西安）

抗疏健骨顆粒急性毒性實驗研究

史傳道1，張榮強1，張志剛1，樊曉晨2
（1.陜西中醫(yī)藥大學，陜西 咸陽 712046；2.陜西省西安市紅十字會醫(yī)院，陜西 西安）

［摘 要］目的：通過對抗疏健骨顆粒的小鼠灌胃急性毒性實驗研究，初步評價其安全性。方法：將抗疏健骨顆粒以最大濃度給SPF級昆明種小鼠灌胃給藥后，小鼠未出現(xiàn)死亡，未測出LD50，測其最大給藥量。結(jié)果：抗疏健骨顆粒最大給藥量為96g/kg，無動物死亡，其全身狀況、飲食、攝水和體質(zhì)量增長均正常。結(jié)論：抗疏健骨顆粒具有較好的安全性。

［關(guān)鍵詞］抗疏健骨顆粒；急性毒性實驗；昆明種小鼠

抗疏健骨顆粒由淫羊藿、丹參、杜仲、懷牛膝、白術(shù)、骨碎補等中藥組成，具有補腎、健脾，活血的功效，臨床用于防治骨質(zhì)疏松癥。為了保證臨床用藥的安全性， 以及為進一步的作用機制研究提供客觀依據(jù)，我們對此方進行急性毒性研究， 現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

實驗動物。SPF級昆明種小鼠60只，雌雄各半，體質(zhì)量18～22g， 由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心提供［動物合格證號SCXK（陜）2012-003］。

實驗藥物。抗疏健骨顆粒：由淫羊藿、丹參、杜仲、懷牛膝、白術(shù)、骨碎補等中藥制成的顆粒劑（陜西省中藥基礎(chǔ)與新藥研究重點實驗室提供），規(guī)格為每袋10g，相當于生藥量13.5g。臨床擬用量為每日3次，每次2袋。實驗給藥前用飲用水配置成相應濃度的混懸液備用。

實驗條件。小鼠飼養(yǎng)于陜西省中藥基礎(chǔ)與新藥研究重點實驗室SPF級小鼠實驗室，溫度為22～24℃，濕度為40%～60%。自由飲水和每天飼喂滅菌的標準顆粒飼料［1-2］。

1.2 實驗方法

預實驗。取適應飼養(yǎng)6日后的昆明小鼠20只，雌雄各10只，禁食不禁水12h，依性別體質(zhì)量分4組，每組5只。對照組以蒸餾水40mL/kg灌胃1次；給藥組以最高濃度80%，最大給藥體積40mL/kg體質(zhì)量灌服抗疏健骨顆?；鞈?次。隨后觀察小鼠的外觀、行為、活動、精神活動、食欲、大小便及其顏色體質(zhì)量變化以及死亡情況；死亡動物及時尸檢，發(fā)現(xiàn)病變器官作病理組織學檢查；連續(xù)觀察14d，給藥后動物無異常發(fā)生，也不引起小鼠死亡，無法測出LD50，因此進行最大給藥量試驗。

最大給藥量測定實驗。取適應飼養(yǎng)3日的昆明小鼠40只，雌雄各半，禁食不禁水12h，依性別體質(zhì)量分4組，每組10只。對照組以蒸餾水40mL/kg灌胃3次，給藥組以最高濃度80%，最大給藥體積40mL/kg體質(zhì)量灌服抗疏健骨顆粒混懸3次，每次間隔6h，灌胃后每天3次觀察小鼠的外觀，行為活動，精神狀況，食欲，呼吸，大小便及其顏色，體質(zhì)量變化以及死亡情況；死亡動物及時尸檢，發(fā)現(xiàn)病變器官作病理組織學檢查，連續(xù)觀察14d。

2 實驗結(jié)果

連續(xù)觀察14d，動物未出現(xiàn)震顫、抽搐、共濟失調(diào)、麻痹，肌張力反應正常，植物神經(jīng)反應、呼吸、皮膚顏色正常，飲食無異常，小鼠活動自如，未見叫聲異常、驚厥、運動失調(diào)、流涎、流淚、流鼻涕、呼吸困難、腹瀉、便秘、腸脹氣等現(xiàn)象發(fā)生。動物皮毛光澤，給藥后14d內(nèi)小鼠未見死亡［3］。見表1、表2。

表1 預試驗小鼠體質(zhì)量及中毒反應變化 （g，±s）

表1 預試驗小鼠體質(zhì)量及中毒反應變化 （g，±s）

注：與對照組雌性比較，at=1.398，P=0.235；與對照組雄性比較，bt=1.579，P=0.200；與對照組雌性比較，ct=0.496，P=0.657；與對照組雌性比較，dt=1.523，P=0.203。

雄　32.0　5　20.6±1.0b31.5±1.5d組別　性別　劑量雄　0.0　5　20.5±1.2　30.5±1.1給藥組　雌　32.0　5　18.7±0.7a27.9±1.1c無明顯中毒反應亦無動物死亡（g/kg）　n　　體質(zhì)量變化　　中毒反應0d　7d對照組　雌　0.0　5　18.6±0.6　27.8±1.2無明顯中毒反應亦無動物死亡

表2 正式試驗小鼠體質(zhì)量及中毒反應變化 （g，±s）

表2 正式試驗小鼠體質(zhì)量及中毒反應變化 （g，±s）

注：與對照組雌性比較，at=1.765，P=0.091；與對照組雄性比較，bt=1.056，P=0.421；與對照組雌性比較，ct=0.596，P=0.513；與對照組雌性比較，dt=1.563，P=0.198。

組別　性別　　劑量（g/kg）　n　　體質(zhì)量變化　　中毒反應0d　14d雄　96.0　10 20.5±1.1b31.3±1.5d對照組　雌　0.0　10 19.2±0.7 27.4±1.6無明顯中毒反應亦無動物死亡雄　0.0　10 20.0±1.0 31.2±1.1給藥組　雌　96.0　10 19.0±1.1a27.5±1.2c無明顯中毒反應亦無動物死亡

抗疏健骨顆粒的小鼠最大給藥劑量為4 0 m L/ kg×80g/100mL×3=96g/kg，相當于70kg成人日用量60g的112倍。

3 討 論

抗疏健骨顆粒的急性毒性實驗結(jié)果顯示，受試小鼠在觀察14d內(nèi)無1例死亡，行為活動正常，飲食正常，毛發(fā)光澤，尿糞性狀無異常。小鼠最大給藥量為96g/kg，相當于臨床70kg體質(zhì)量人的用藥劑量112倍，說明該藥無明顯毒理反應，安全可靠。

［參考文獻］

［1］ 中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局.中藥新藥研究指南（藥學藥理學毒理學）［M］.北京：人民衛(wèi)

［2］ 陳奇等.中藥藥理研究方法學［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：119.

［3］ 王北嬰.中藥新藥研制與申報［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，1995：251.

［中圖分類號］R285.5

［文獻標識碼］B

［文章編號］1004-2814（2016）06-0521-02

［基金項目］陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計劃項目（2012KTCL03-22）；陜西省中醫(yī)管理局中醫(yī)藥科研項目（2013-LC069）；陜西省教育廳科研項目（2011JK0674）生出版社，1994：203-204.

［收稿日期］2016-01-20

［Abstract］Objective：To preliminary evaluate the safety of Kangshu Jiangu Granule according to the acute toxicity experiment research through taking gavage methods to the mice. Method: After the SPF Kunming mice were given Kangshu Jiangu Granule of maximum concentration by gavage methods， there was no mice dead and LD50 was not detected. Then， the maximum tolerance dose was detected.Result：The maximum dosage of Kangshu Jiangu Granule was 96g/kg. There was no mice dead and all the mice’s systemic conditions， food and fluid intake and weight gain was normal. Conclusion：Kangshu Jiangu Granule has good safety.

［Key Words］Kangshu Jiangu Granule；Acute toxicity experiment；Kunming mouse