魏 菁，姜 偉，王 琦，孫德剛，劉 釗，黃小丹，李廣興

（1. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，黑龍江哈爾濱　150030；2. 大連出入境檢驗(yàn)檢疫局，遼寧大連　116000；3. 黃島出入境檢驗(yàn)檢疫局，山東青島　266000；4. 遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，遼寧大連　116000）

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澳大利亞輸華活牛檢疫情況分析

魏 菁1，2，姜 偉2，王 琦2，孫德剛3，劉 釗4，黃小丹1，李廣興1

（1. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，黑龍江哈爾濱150030；2. 大連出入境檢驗(yàn)檢疫局，遼寧大連116000；3. 黃島出入境檢驗(yàn)檢疫局，山東青島266000；4. 遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心，遼寧大連116000）

摘 要：近年來我國從澳大利亞引進(jìn)種牛數(shù)量急劇增多。本文對近3年來部分口岸澳大利亞輸華活牛檢疫情況進(jìn)行整理和分析，以期為今后兩國間動(dòng)物貿(mào)易提供參考。按照中澳協(xié)定對2012－2014年間19 611份澳大利亞輸華活牛樣品進(jìn)行了6種傳染病的檢測并檢出105份陽性樣品，總陽性率為0.54%。其中藍(lán)舌病陽性樣品10份（0.05%）、副結(jié)核病13份（0.07%）、赤羽病57份（0.29%）、病毒性腹瀉25份（0.13%），未檢出牛地方流行性白血病和鹿流行性出血熱陽性樣品。2012—2014年，藍(lán)舌病和赤羽病陽性率先增高后下降，牛病毒性腹瀉陽性率呈持續(xù)增長趨勢。不同品種牛對各種疾病的易感性有一定差異，娟姍牛的赤羽病和病毒性腹瀉陽性率最高，荷斯坦牛和安格斯牛疾病陽性率均保持在較低水平，而海福特牛中未檢出陽性，只在荷斯坦牛中檢出藍(lán)舌病。夏季入境牛的疾病陽性率顯著高于其他季節(jié)，秋季均未檢出陽性牛。國家質(zhì)檢總局組織實(shí)施境外預(yù)檢工作制度對于篩選對口農(nóng)場及疾病控制取得明顯效果。分析表明，應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)對藍(lán)舌病、赤羽病、副結(jié)核病和牛病毒性腹瀉的檢疫力度，同時(shí)要考慮季節(jié)和牛品種因素，以保障種牛引進(jìn)安全。

關(guān)鍵詞：牛；疾病檢疫；樣品陽性率；品種；季節(jié)

近年來，受各種因素影響，我國從澳大利亞引牛增多。雖然澳大利亞已宣布消滅牛瘟、口蹄疫和布魯氏菌病，并且無瘋牛病、偽狂犬病、心水病和水泡性口炎的發(fā)生，但越來越頻繁的商貿(mào)往來大大增加了一些疫病的傳入風(fēng)險(xiǎn)。

目前，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）《陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典》和《中華人民共和國進(jìn)境動(dòng)物檢疫疫病名錄》規(guī)定須檢疫的牛疫病有：口蹄疫、藍(lán)舌病、牛海綿狀腦病、牛傳染性胸膜肺炎、牛結(jié)節(jié)疹、炭疽、心水病、副結(jié)核病、布魯氏桿菌病、鹿流行性出血熱、錐蟲病、牛地方流行白血病、牛傳染性鼻氣管炎、牛病毒性腹瀉、牛生殖道彎桿菌病、赤羽病、水泡性口炎［1-2］。澳大利亞也有藍(lán)舌病、赤羽病、副結(jié)核病、牛鞭蟲病、巴貝斯焦蟲病、囊尾蚴蟲病、牛地方性流行性白血病、傳染性鼻氣管炎、惡性卡他熱和牛毛滴蟲等病的發(fā)生。其中藍(lán)舌病不僅是OIE法定通報(bào)疫病，也被我國列為一類動(dòng)物疫病，在澳大利亞北部、昆士蘭沿岸地均有流行，特別在西澳續(xù)流行［3-4］。牛地方流行方性流行，新西蘭也曾有羽病在上世紀(jì)30年代即在部分地區(qū)也有發(fā)生［3，6］。分布于澳大利亞和新西蘭，嚴(yán)重流行時(shí)，發(fā)病率可達(dá)75%，死亡率在10%以下［7］。目前已知澳大利亞存在鹿流行性出血熱病毒6個(gè)血清型［8］。

為了保障引進(jìn)動(dòng)物安全，中澳兩國政府協(xié)商簽訂了《中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和澳大利亞農(nóng)漁林業(yè)部關(guān)于中國從澳大利亞輸入牛的檢疫和衛(wèi)生要求議定書》（簡稱議定書），在其中規(guī)定，澳大利亞輸華活牛必須進(jìn)行藍(lán)舌病、副結(jié)核病、赤羽病、牛病毒性腹瀉、牛地方流行性白血病和鹿流行性出血熱6種疾病的檢測［9］。本文收集整理了近三年來山東、遼寧口岸從澳大利亞進(jìn)口牛的19 611份血清檢測樣本，并對其總體疫病陽性率、各種疫病、不同入境年份、不同品種、不同季節(jié)的陽性率和陽性牛在境外農(nóng)場的分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以期為中澳活牛貿(mào)易領(lǐng)域的合作提供參考依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1被檢血清和病原樣品。采用無菌真空管針自牛尾靜脈采集澳大利亞輸華活牛血液（不含抗凝劑），待血液凝集后離心后收集血清，用于藍(lán)舌病、副結(jié)核、赤羽病、牛地方流行性白血病、鹿流行性出血熱抗體的檢測；同時(shí)采集全血（含抗凝劑），分離、裂解白細(xì)胞，用于牛病毒性腹瀉病原的檢測，各19 611份（表1），置- 20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

表1　澳大利亞輸華牛樣品

1.1.2檢測盒和相關(guān)試劑。牛藍(lán)舌病抗體檢測EXX公司）、副結(jié)核病抗體檢IDEXX公司）、赤羽病抗體檢IDVET公司）、牛病毒性腹瀉劑盒（IDEXX公司）、牛地方檢測ELISA試劑盒（IDEXX公血熱抗原及標(biāo)準(zhǔn)陰性和陽性血清（由遼寧、山東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心實(shí)驗(yàn)室提供）。

1.2方法

1.2.1ELISA檢測。根據(jù)議定書要求［9］，并按照中華人民共和國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（簡稱行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)）《藍(lán)舌病競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)操作規(guī)程》［10］《牛副結(jié)核病檢疫技術(shù)規(guī)范》［11］《赤羽病檢疫技術(shù)規(guī)范》［12］《牛病毒性腹瀉/粘膜病檢疫規(guī)范》［13］和《牛地方流行性白血病檢疫技術(shù)規(guī)范》［14］的操作技術(shù)要求，對牛藍(lán)舌病、副結(jié)核病、赤羽病、病毒性腹瀉和地方流行性白血病采用ELISA方法檢測。

1.2.2瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)。按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《鹿流行性出血病檢疫技術(shù)規(guī)范》［15］的操作技術(shù)要求對鹿流行性出血熱采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的方法進(jìn)行檢測。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

對血清樣本的總陽性率、各種疫病的陽性率、不同入境年份的陽性率、不同品種的陽性率、不同季節(jié)的陽性率和陽性牛在境外農(nóng)場的分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2　結(jié)果

2.1總體感染情況

從近三年澳大利亞輸華活牛采集的19 611份樣品中共檢出105份陽性樣品，總陽性率為0.54%。6種疫病的檢出情況見表2。

2.2年度分布情況

近三年來，澳大利亞輸華活牛藍(lán)舌病和赤羽病陽性率呈現(xiàn)先增高后下降的趨勢，但赤羽病始終保持在一個(gè)較高的水平；牛病毒性腹瀉陽性率呈持續(xù)增長的趨勢，牛副結(jié)核病陽性率呈持續(xù)下降趨勢，具體見圖1。

2.3品種分布情況

不同品種澳大利亞輸華活牛的疫病感染總體情況見表3，其發(fā)生趨勢如圖2所示，其中僅荷斯坦牛出現(xiàn)藍(lán)舌病陽性（0.07%），娟姍牛赤羽病和牛病毒性腹瀉陽性率顯著高于其他品種，分別為0.71%和0.43%；副結(jié)核病陽性率在不同品種牛中無顯著性差異。

表2　2012－2014年澳大利亞輸華活牛疫病檢測結(jié)果

表3　不同品種輸華活牛疫病感染情況

圖1　澳大利亞輸華活牛疫病感染率變化趨勢

圖2　不同品種輸華活牛疫病感染情況

2.4季節(jié)分布情況

澳大利亞輸華活牛的入境時(shí)間分別為2012年11月12日、2013年 4月10日、2013年8月8日、2014年 1月23日、2014年8月13日和2014年12月24日，各種疫病陽性率在不同季節(jié)分布情況如圖3A。夏季入境并隔離檢疫的澳大利亞輸華活牛陽性率（0.72%）高于春季（0.42%）、秋季（0.11%）和冬季（0.47%），其中秋季最低。不同疫病陽性率在各季節(jié)中的分布情況分析表明，赤羽病和藍(lán)舌病的陽性率在夏季最高（0.51%和0.09%）、秋季和春季最低（0）；牛病毒性腹瀉陽性率在春季最高（0.35%）、秋季最低（0）；副結(jié)核病陽性率在入境季節(jié)分布中無顯著差異。具體見圖 3B。

圖3　輸華活牛疫病感染季節(jié)分布情況

2.5陽性活牛在境外農(nóng)場的分布情況

本次檢測的澳大利亞輸華活牛來自1 270個(gè)符合《中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和澳大利亞農(nóng)漁林業(yè)部關(guān)于澳大利亞藍(lán)舌病區(qū)域化合作協(xié)議》要求的澳大利亞農(nóng)場。105頭澳大利亞輸華陽性活牛分別來自97個(gè)境外農(nóng)場。其中有2個(gè)農(nóng)場的陽性牛分布比例為3%，4個(gè)農(nóng)場為2%，其他91個(gè)境外農(nóng)場均為1%。

3　討論

國際貿(mào)易中的動(dòng)物傳染病傳播風(fēng)險(xiǎn)已引起各國的高度重視。近年來我國從澳大利亞引入種牛的貿(mào)易量急劇增加，議定書為澳大利亞輸華活牛的安全性提供了有力保障。議定書規(guī)定澳大利亞輸華活牛均不得進(jìn)行藍(lán)舌病、副結(jié)核病、赤羽病、牛病毒性腹瀉疫苗免疫，并根據(jù)兩國疫病疫情現(xiàn)狀規(guī)定對6種特定疾病進(jìn)行檢驗(yàn)檢疫，以保障兩國間安全的經(jīng)貿(mào)活動(dòng)。

本研究從近三年澳大利亞輸華活牛采集的19 611份樣品中共檢出105份陽性樣品，總陽性率為0.54%。其中藍(lán)舌病陽性樣品10份（0.05%）、副結(jié)核病13份（0.07%）、赤羽病57份（0.29%）、病毒性腹瀉25份（0.13%）；而未檢出牛地方流行性白血病和鹿流行性出血熱陽性。2012－2014年度各種疾病陽性率分析表明，藍(lán)舌病和赤羽病陽性率呈現(xiàn)先增高后下降的趨勢，但赤羽病始終保持在一個(gè)較高的水平；牛病毒性腹瀉陽性率呈持續(xù)增長的趨勢，牛副結(jié)核病陽性率則呈持續(xù)下降趨勢。因此，建議加強(qiáng)對藍(lán)舌病、副結(jié)核病、赤羽病和牛病毒性腹瀉的檢疫力度，特別是藍(lán)舌病、赤羽病和牛病毒性腹瀉。

不同品種牛的疾病感染情況有一定的差異，其中娟姍牛的赤羽病和病毒性腹瀉陽性率顯著高于其他品種牛，荷斯坦牛和安格斯牛各種疾病陽性率均保持在一個(gè)較低水平，而在海福特牛中未檢出陽性，需要指出的是藍(lán)舌病只在荷斯坦牛中檢測出抗體陽性。對各種疾病在不同季節(jié)的分布分析中可以看出，夏季入境牛的陽性率顯著高于春季、秋季和冬季，其中赤羽病和藍(lán)舌病抗體陽性率在夏季最高（0.51%和0.09%）、牛病毒性腹瀉陽性率在春季最高（0.35%），在秋季均未檢出陽性牛。入境季節(jié)影響了輸華活牛疫病陽性情況，這可能與庫蠓、伊蚊等雙翅目吸血性媒介昆蟲的活動(dòng)規(guī)律有關(guān)。故引進(jìn)澳大利亞活牛時(shí)應(yīng)適當(dāng)結(jié)合牛的品種和季節(jié)選擇，規(guī)避疾病傳播的風(fēng)險(xiǎn)。

國家質(zhì)檢總局為更加科學(xué)高效地保障從澳大利亞引進(jìn)活牛的安全性，建立并實(shí)施了境外預(yù)檢工作制度，對澳大利亞當(dāng)?shù)剞r(nóng)場牛疾病發(fā)生等相關(guān)情況進(jìn)行審核、調(diào)查和監(jiān)督。此次檢出的6種疾病在境外農(nóng)場的分布結(jié)果表明，其工作運(yùn)轉(zhuǎn)效率和效果良好，為下一步引進(jìn)澳大利亞活牛提供了針對性指導(dǎo)。

針對上述分析結(jié)果，在入境活牛檢疫監(jiān)管方面建議：重點(diǎn)加強(qiáng)對牛病毒性腹瀉的檢疫，根據(jù)入境活牛陽性率增長趨勢及時(shí)調(diào)整檢疫重點(diǎn)，防止外來疫病的侵入；加強(qiáng)境外預(yù)檢措施，重點(diǎn)甄別赤羽病感染的活牛，并適當(dāng)調(diào)整境外隔離時(shí)間，增加淘汰剔除次數(shù)，排除潛伏期干擾，徹底剔除藍(lán)舌病和赤羽病血清學(xué)陽性活牛；建議我國活牛進(jìn)口企業(yè)盡量選擇感染率低的牛種進(jìn)口，并加強(qiáng)對娟姍品種牛赤羽病和病毒性腹瀉的檢疫措施，降低疫病發(fā)生和傳播的風(fēng)險(xiǎn)；在夏季傳播藍(lán)舌病、赤羽病等媒介昆蟲活動(dòng)頻繁時(shí)不進(jìn)口，或在必要進(jìn)口時(shí)加強(qiáng)對這些疾病的檢疫和防疫管理，同時(shí)加強(qiáng)對隔離檢疫場欄舍和運(yùn)輸工具的清洗和消毒，刈短隔離檢疫場附近的雜草和灌木，對隔離場檢疫欄舍和運(yùn)輸工具進(jìn)行防蟲和滅蟲，減少夏季媒介昆蟲的孳生，降低疫病感染幾率；對來自輸出陽性活牛數(shù)量相對較多農(nóng)場的活牛進(jìn)行重點(diǎn)檢疫。

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（責(zé)任編輯：杜憲）

中圖分類號(hào)：S851.34

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1005-944X（2016）04-0028-05

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.04.009

基金項(xiàng)目：“十二五”國家科技支撐計(jì)劃（2013BAD12B04）

通訊作者：李廣興

Infectious Disease Quarantine Analysis and its Prevention for Australian Living Cattle Exported to China

Wei Jing1，2，Jiang Wei2，Wang Qi2，Sun Degang3，Liu Zhao4，Huang Xiaodan1， Li Guangxing1
（1. College of Veterinary Medicine， Northeast Agricultural University， Harbin，Heilongjiang 150030； 2. Dalian Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau， Dalian， Liaoning 116000；3. Huangdao Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau，Qingdao，Shandong 266000；4. Liaoning Inspection and Quarantine Bureau Technical Center， Dalian， Liaoning 116000）

Abstract：In recent years， the number of imported cattle from Australia has been increasing rapidly. The infectious disease quarantine information was collected and analyzed， in order to provide reference for the development of the Sino-Australian animal trade. According to the agreement between two countries， 19 611 cattle samples were analyzed for 6 kinds of infectious diseases from 2012 to 2014， and 105 samples were positive with the total ratio of 0.54%，including 10 samples for bluetongue disease （BTD， 0.05%）， 13 samples for paratuberculosis （BJD， 0.07%）， 57 samples for Akabane disease （AD， 0.29%） and bovine viral diarrhea （BVD， 0.13%）. However， no positive sample was found for enzootic bovine leucosis （BL） and epizootic haemorrhagic disease of deer （EHDV）. From 2012 to 2014，the positive rates of BTD and AD decreased after increasing， and AD increased persistently. The positive ratios for different diseases were different of different breeds of cattle. For Jersey cattle， the positive ratios of AD and BVD were the highest. For Holstein and Angus cattle， the positive ratios of various diseases were lower. For Holstein cattle， no positive ratio was found， except for Bluetongue. The positive ratio was much higher in summer compared with those in other seasons.However， no positive sample was found in autumn. Overseas engineering work system， organized and executed by National Bureau of Quality Inspection of China， was very effective to farm screening and disease prevention. Suggestions of strengthening the monitoring efforts of BTD， AD， BJD and BVDV， and considering the factors of seasons and breed， were put forward.

Key words：cattle； infectious disease quarantine； antibody positive ratio； breed； season