許春燕，宋陽(yáng)*，李坤寅，關(guān)永格，范為之

（1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州 510405；2.廣州中醫(yī)藥第一附屬醫(yī)院，廣州 510405）

?

薄型子宮內(nèi)膜模型的動(dòng)物選擇及其造模方法改進(jìn)

許春燕1，宋陽(yáng)1*，李坤寅1，關(guān)永格2，范為之1

（1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州 510405；2.廣州中醫(yī)藥第一附屬醫(yī)院，廣州 510405）

【摘要】薄型子宮內(nèi)膜是影響體外受精-胚胎移植的一個(gè)重要因素，而目前對(duì)于薄型子宮內(nèi)膜的治療缺乏有效的治療手段。探討穩(wěn)定有效的薄型子宮內(nèi)膜的動(dòng)物模型，可為探索薄型子宮內(nèi)膜疾病發(fā)病機(jī)制及治療研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。本文從國(guó)內(nèi)外多種動(dòng)物子宮內(nèi)膜損傷模型造模方法進(jìn)行分析探討，總結(jié)出大鼠宮腔內(nèi)注射95%乙醇是目前比較適合用于薄型子宮內(nèi)膜模型的建立，并在該法基礎(chǔ)提出一些經(jīng)驗(yàn)總結(jié)和改進(jìn)的方法。

【關(guān)鍵詞】薄型子宮內(nèi)膜；動(dòng)物模型；造模方法

薄型子宮內(nèi)膜是指子宮內(nèi)膜厚度低于能夠獲得妊娠的閾厚度［1］。各種因素引起的薄型子宮內(nèi)膜影響子宮內(nèi)膜容受性，導(dǎo)致體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）失敗，不能維持妊娠，目前是生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的難題之一。有效的薄型子宮內(nèi)膜動(dòng)物模型可以為研究其病理特點(diǎn)及探索有效治療方法提供實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)。子宮內(nèi)膜損傷引起的薄型內(nèi)膜是生殖醫(yī)生臨床上經(jīng)常遇到的問(wèn)題，其治療目的就是要促進(jìn)子宮內(nèi)膜再生、修復(fù)，增加子宮內(nèi)膜厚度，從而提供妊娠成功率。但對(duì)于因重度或廣泛的損傷而引起薄型內(nèi)膜患者，各種治療方法效果較差，子宮內(nèi)膜厚度難以增加，這是臨床治療上常見(jiàn)的棘手難題。由于倫理問(wèn)題等，某些實(shí)驗(yàn)性治療方法及病理機(jī)制的探討等難以直接在病人體內(nèi)進(jìn)行。所以需要建立一種薄型內(nèi)膜的動(dòng)物模型進(jìn)行研究。目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)于建立薄型子宮內(nèi)膜的動(dòng)物模型的均有一定的研究和報(bào)道，簡(jiǎn)述如下。

1　國(guó)內(nèi)外子宮內(nèi)膜損傷模型

1.1 大鼠

大鼠是醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)用最多、應(yīng)用領(lǐng)域最為廣泛的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之一，在子宮內(nèi)膜損傷的模型中主要有三種方式，包括子宮全層損傷模型，子宮缺血模型和子宮內(nèi)膜化學(xué)損傷模型。具體造模方法簡(jiǎn)述如下：

1.1.1 子宮全層損傷模型

子宮全層損傷的大鼠模型［2］，是對(duì)麻醉后的大鼠，開(kāi)腹，子宮中段子宮系膜對(duì)側(cè)緣縱形剪開(kāi)子宮，將（0.5～1.5）cm ×0.5 cm大小的子宮組織剪掉，6-0錦綸線(xiàn)標(biāo)記創(chuàng)緣。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，損傷后大鼠子宮內(nèi)膜上皮具有較強(qiáng)的再生能力，術(shù)后1周，約經(jīng)歷兩個(gè)動(dòng)情周期后，不同損傷范圍（0.5 cm ×0.5 cm ～1.5 cm ×0.5 cm）子宮內(nèi)膜上皮層均可完全愈合，呈單層柱狀上皮細(xì)胞，排列緊密，與其下內(nèi)膜固有層界限清晰。該造模方法可以使子宮全層損傷的子宮內(nèi)膜薄弱，但僅手術(shù)區(qū)域的子宮內(nèi)膜偏薄，與臨床上人的子宮內(nèi)膜整體偏薄的情況不同，此造模方法將局部子宮內(nèi)膜及肌層同時(shí)損傷，很難做到大鼠整體的內(nèi)膜偏薄，可用于薄型子宮內(nèi)膜局部組織修復(fù)重建等方面研究。

1.1.2 子宮缺血模型

薄型子宮內(nèi)膜發(fā)病機(jī)制至今尚不明確，但有研究［3］指出子宮內(nèi)膜供血減少可能和薄型子宮內(nèi)膜的發(fā)病有關(guān)。因此部分研究者［4］提出了通過(guò)夾閉SD大鼠子宮動(dòng)脈來(lái)實(shí)現(xiàn)薄型子宮內(nèi)膜動(dòng)物模型。其具體方法是麻醉大鼠后，開(kāi)腹暴露子宮，結(jié)扎雙側(cè)子宮角動(dòng)脈，術(shù)后3個(gè)月，于發(fā)情期處死大鼠取子宮組織，發(fā)現(xiàn)SD大鼠子宮內(nèi)膜缺血過(guò)后，子宮內(nèi)膜變薄，子宮內(nèi)膜腺體減少，腺上皮細(xì)胞受損。該造模方法術(shù)后3個(gè)月才成模，成模時(shí)間過(guò)長(zhǎng)及大鼠的老齡化均可能對(duì)實(shí)驗(yàn)研究存在一定的影響。后有研究者［5］使用這個(gè)模型造子宮內(nèi)膜缺血再灌注損傷模型，進(jìn)行夾閉子宮動(dòng)脈的時(shí)間控制在30 min或60 min，這樣的短暫夾閉也對(duì)子宮內(nèi)膜造成一定的損傷，但是其損傷的程度及子宮內(nèi)膜自我修復(fù)時(shí)間不明確，模型成功率及模型穩(wěn)定性有待進(jìn)一步探討。

1.1.3 子宮內(nèi)膜化學(xué)損傷模型

該造模方法通過(guò)使用95%乙醇對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜進(jìn)行化學(xué)損傷，主要利用無(wú)水乙醇對(duì)組織、細(xì)胞的脫水作用，以及可使蛋白質(zhì)變性的特點(diǎn)。具體造模方法［6-8］為大鼠麻醉后，依次切開(kāi)皮膚、腹壁各層；分離子宮，一側(cè)子宮近端和遠(yuǎn)端分別用個(gè)血管夾輕輕夾住，用無(wú)齒鑷輕輕把子宮拉直，無(wú)菌鹽水紗布保護(hù)周?chē)M織以防無(wú)水乙醇外溢損傷；注射器針頭進(jìn)入宮腔，且保持其與子宮縱軸平行，于子宮一端緩慢注入無(wú)水乙醇，保持宮腔處于充盈狀態(tài)，針頭停留4～5 min緩慢取出；輕輕擠壓出殘留的無(wú)水乙醇，再用生理鹽水沖洗次，松開(kāi)血管夾；另一側(cè)子宮采用同樣方法處理。為防止粘連，腹腔用生理鹽水沖洗，并用無(wú)菌紗布吸干，把子宮恢復(fù)至正常位置后逐層關(guān)腹。后測(cè)量子宮內(nèi)膜厚度、觀察形態(tài)學(xué)特點(diǎn)以及檢測(cè)角蛋白、波形蛋白和子宮內(nèi)膜容受性標(biāo)志蛋白整合素β3的表達(dá)情況來(lái)評(píng)估造模情況，認(rèn)為95%乙醇宮腔內(nèi)注射可成功有效建立薄型子宮內(nèi)膜薄型。該造模方法經(jīng)濟(jì)、成模時(shí)間短，模型穩(wěn)定，比較適合用于藥物療效及機(jī)制探討的薄型子宮內(nèi)膜動(dòng)物模型，本課題組亦沿用此模型，實(shí)踐中總結(jié)了一些經(jīng)驗(yàn)及方法，后面詳述。

1.1.4 其他造模方法

國(guó)外學(xué)者Guney［8-16］做過(guò)多種方法致大鼠子宮內(nèi)膜損傷的動(dòng)物模型的研究，氟化物加入大鼠飲用水中，使用甲基對(duì)硫磷或者敵敵畏（有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑）灌胃，通過(guò)900兆電磁輻射影響等，主要是觀察這些損傷引起氧化應(yīng)激反應(yīng)而導(dǎo)致大鼠子宮內(nèi)膜的損傷。但這些方法或不能形成薄型子宮內(nèi)膜，或損傷過(guò)大，或操作復(fù)雜，均不宜作為薄型子宮內(nèi)膜的動(dòng)物模型方法的首選。

1.2 小鼠

利用小鼠來(lái)進(jìn)行子宮內(nèi)膜損傷模型的建立，常見(jiàn)的是熱損傷和機(jī)械損傷兩種造模方法。曲軍英等［17］利用水熱損傷的方法來(lái)造子宮內(nèi)膜損傷的動(dòng)物模型，其主要是利用宮腔導(dǎo)管貫穿小鼠Y型宮腔的一側(cè)，給予預(yù)溫85℃流動(dòng)熱水經(jīng)80 s熱損傷小鼠子宮內(nèi)膜組織，達(dá)到子宮內(nèi)膜廣泛剝脫目的，來(lái)建立子宮內(nèi)膜損傷的動(dòng)物模型，可使子宮宮腔變狹窄、瘢痕與粘連。后路平等［18］研究小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的相關(guān)作用研究，繼續(xù)參考該法進(jìn)行子宮內(nèi)膜損傷模型的制作，選擇100℃水源，計(jì)時(shí)10 s停止。胡曉曉［19］釆用電熱損傷模型方法，使得該法更具可控性，溫度損傷維持可恒定，選用低于子宮全層損傷的功率，設(shè)置不同的電熱功率，于近卵巢側(cè)用剪刀剪開(kāi)一小破口，從中穿刺法置入直徑1 mm宮腔導(dǎo)絲（表面絕緣只有頂端可導(dǎo)電，使用點(diǎn)放電以不同的電熱功率，固定時(shí)間損傷迅速抽回導(dǎo)絲，并電凝子宮內(nèi)壁。綜合以上熱損傷建立的小鼠內(nèi)膜損傷模型來(lái)看，熱損傷主要是以去除子宮內(nèi)膜的原理建立模型，模型的子宮內(nèi)膜完全損傷，而不是單純的損傷后變薄，所以該法不適合用于薄型子宮內(nèi)膜模型的建立。

關(guān)碩［20］通過(guò)機(jī)械損傷建立小鼠子宮內(nèi)膜損傷模型，利用自制的表面粗糙的不銹鋼針（直徑約0.5mm）探入左側(cè)宮腔內(nèi)，并劃傷子宮內(nèi)膜。國(guó)外學(xué)者［21］有用 C57BL/6雌性小鼠通過(guò)機(jī)械損傷來(lái)建立Asherman綜合征子宮內(nèi)膜損傷小鼠模型，用4號(hào)注射器針頭，從宮角處進(jìn)入至三分之二處，進(jìn)行旋轉(zhuǎn)和來(lái)回搔刮4次。此法主要是通過(guò)參照臨床宮腔操作引起子宮內(nèi)膜機(jī)械損傷，但是機(jī)械的損傷力度及損傷程度無(wú)法量化，可因不同的操作者甚至同一操作者均可能使模型存在一定的差異性，可用于建立宮腔粘連的動(dòng)物模型。

1.3 其他動(dòng)物

國(guó)外學(xué)者通過(guò)使用刮匙搔刮兔子的子宮內(nèi)膜建立宮腔粘連的模型［22，23］。劉芳等［24］通過(guò)對(duì)兔子的子宮進(jìn)行刮勺刮取子宮內(nèi)膜達(dá)到機(jī)械損傷，同時(shí)留置脂多糖棉線(xiàn)于宮腔內(nèi)兩天引起宮腔內(nèi)膜感染損傷，可建立穩(wěn)定的兔宮腔粘連的動(dòng)物模型。也有同樣使用機(jī)械刮宮法建立比格犬宮腔粘連模型［25］。國(guó)外學(xué)者使用光動(dòng)力學(xué)方法對(duì)恒河猴進(jìn)行子宮內(nèi)膜消融損傷［26］。

2　薄型子宮內(nèi)膜的動(dòng)物選擇

綜上所述，目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于子宮內(nèi)膜損傷的模型選用上，大鼠、小鼠、新西蘭兔、比格犬及恒河猴都有相關(guān)的報(bào)道，方法有機(jī)械損傷、感染損傷、熱損傷、化學(xué)損傷、光學(xué)損傷等等。其中大鼠的使用是最多及廣泛的，造模方法相對(duì)較多；小鼠主要是機(jī)械損傷及熱損傷的造模方法居多，較少見(jiàn)其關(guān)于化學(xué)損傷報(bào)道。新西蘭兔多見(jiàn)機(jī)械損傷造模為主，比格犬和恒河猴的造模報(bào)道不多見(jiàn)，且一般用于手術(shù)治療等觀察，不適合大樣本量的實(shí)驗(yàn)研究。以上大部分的子宮內(nèi)膜損傷的造模方法可能損傷過(guò)度造成宮腔粘連，或者損傷不足，均難形成薄型子宮內(nèi)膜。目前薄型子宮內(nèi)膜模型的建立首選高紅等［6-8］通過(guò)SD大鼠宮腔內(nèi)注射95%乙醇建立的動(dòng)物模型。

3　薄型子宮內(nèi)膜SD大鼠模型造模方法改進(jìn)及分析

薄型子宮內(nèi)膜動(dòng)物模型的是高紅等最先建立的SD大鼠薄型子宮內(nèi)膜模型，夾住大鼠子宮一端，注射95%的乙醇對(duì)子宮內(nèi)膜進(jìn)行化學(xué)損傷，但造模后存活率為70%，并常常造成大鼠腹腔嚴(yán)重粘連。趙靜等進(jìn)一步完善該造模方法，使用血管夾同時(shí)夾住子宮近陰道端及卵巢端，再向子宮腔內(nèi)注入95%乙醇。本課題組亦參照該法進(jìn)行了造模，在這提出一些經(jīng)驗(yàn)及建議。本課題在造模過(guò)程中遇到的問(wèn)題及改良方法：采用的造模方法參照趙靜［7］的造模方法基礎(chǔ)上做了以下改良：

3.1 關(guān)于子宮分離

術(shù)中分離子宮系膜血管會(huì)引起出血，術(shù)后影響大鼠子宮的正常血供，大鼠子宮為一個(gè)“Y”型子宮，主要造模選取上部分“V”段兩側(cè)，常規(guī)麻醉消毒后開(kāi)腹，因雙側(cè)子宮內(nèi)側(cè)的子宮系膜血管豐富，一般不做分離，只需暴露好其中一側(cè)子宮的近陰道端及卵巢端即可（圖1）。

3.2 關(guān)于術(shù)中血管夾的使用

術(shù)中使用血管夾鉗夾子宮近陰道端及卵巢端處發(fā)白薄如紙，甚者可能出現(xiàn)斷裂；因子宮組織本身不耐過(guò)度鉗夾，用血管夾鉗夾，容易造成子宮鉗夾傷甚至斷裂。如果仍想使用血管夾，術(shù)者可通過(guò)雙手控制血管夾鉗夾力度，但是這種方法，需兩人以上進(jìn)行手術(shù)，如果造模量大時(shí)，容易造成術(shù)者雙手因長(zhǎng)時(shí)間控制鉗夾而乏力甚至抽搐，導(dǎo)致乙醇滲漏至腹腔；術(shù)中不用血管夾鉗夾，改用0號(hào)縫合絲線(xiàn)進(jìn)行子宮兩端活結(jié)結(jié)扎（圖2），選用0號(hào)縫合絲線(xiàn)，因其線(xiàn)較粗，結(jié)扎子宮兩端時(shí)壓強(qiáng)相對(duì)細(xì)線(xiàn)的壓強(qiáng)小，注意結(jié)扎時(shí)無(wú)需打死結(jié)，控制力度進(jìn)行結(jié)扎，以注射95%乙醇使子宮充盈為度。

3.3 關(guān)于宮腔內(nèi)乙醇?xì)埩?/p>

宮腔內(nèi)注射殘留的95%的乙醇容易造成宮腔粘連及腹腔粘連，注射無(wú)水乙醇結(jié)束后擠壓出無(wú)水乙醇后，仍容易殘留，建議子宮內(nèi)95%乙醇充盈4～5 min，保持注射器針頭在宮腔內(nèi)，把95%乙醇抽出后拔出注射器，換用生理鹽水沖洗子宮腔內(nèi)1～2遍，再行腹腔生理鹽水沖洗，后關(guān)腹。

3.4 其他

術(shù)后保溫方面，可使用暖光燈照射可以達(dá)到較好的保溫效果。許多研究在術(shù)后3 d予常規(guī)使用抗生素肌注或者腹腔注射，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)SD大鼠自身抗感染能力強(qiáng)，手術(shù)只要嚴(yán)格做好無(wú)菌操作，手術(shù)器械采用高壓滅菌，術(shù)前術(shù)后都做好消毒，本實(shí)驗(yàn)無(wú)需術(shù)后連續(xù)3 d使用抗生素，只需在縫合肌層后，于肌層撒每只0.5 g青霉素鈉粉劑后縫合皮膚，大鼠無(wú)一感染，術(shù)口愈合良好（圖3）。

采用上述改良方法進(jìn)行造模，本課題共造模110例，術(shù)后3 d均存活，無(wú)感染，術(shù)口愈合良好，2例因麻醉原因死亡，造模后存活率100%。

圖1　術(shù)中暴露一側(cè)子宮；圖2　活結(jié)結(jié)扎子宮兩端；圖3　大鼠術(shù)口恢復(fù)情況Fig.1 Intraoperative exposure of the uterus on one side.Fig.2 Slipknot ligation on both ends of the uterus.Fig.3 Healing of the surgical incision

參考文獻(xiàn)

［1］ McWilliams GD，F(xiàn)rattarelli JL.Changes in measured endometrial thickness predict in vitro fertilization success［J］.Fertil Steril，2007，88（1）：74-81.

［2］ 林娜成，李新安，胡婭莉.大鼠子宮全層損傷修復(fù)模型的建立［J］.現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展2015，06：401-404.

［3］ Miwa I，Tamura H，Takasaki A，et al.Pathophysiologic features of“thin”endometrium［J］.Fertil Steril，2009，91（4）：998-1004.

［4］ Hu JG，Yuan R.Decreased expression of c-kit and telomerase in a rat model of chronic endometrial ischemia［J］.Med Sci Monit，2011，17（4）：BR103-109

［5］ 楊曉清，徐云釗，虞琪，等.人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)大鼠受損子宮內(nèi)膜的影響［J］.江蘇醫(yī)藥，2013，10：1130-1133，1241.

［6］ 高紅，趙靜，李艷萍.大鼠薄型子宮內(nèi)膜模型的建立和鑒定［J］.生命科學(xué)研究，2011，05：426-431.

［7］ Zhao J，Gao H，Li YP.Development of an animal model for thin endometrium using 95%ethanol［J］.J Fertil in Vitro，2012，2 （4）：1-3.

［8］ 趙靜.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療薄型子宮內(nèi)膜的實(shí)驗(yàn)研究［D］.中南大學(xué)，2013

［9］ Guney M，Oral B，Karahan N，et al.Protective effect of caffeic acid phenethyl ester（CAPE）on fluoride-induced oxidative stress and apoptosis in rat endometrium［J］.Environ Toxicol pharmacol，2007，24（2）：86-91.

［10］ Guney M，Oral B，Demirin H，et al.Evaluation of caspase-dependent apoptosis during methyl parathion-induced endometrial damage in rats：Ameliorating effect of vitamins E and C［J］.Environ Toxicol Pharmacol，2007，23（2）：221-227.

［11］ Guney M.Selenium-vitamin E combination modulates endometrial lipid peroxidation and antioxidant enzymes in streptozotocin-induced diabetic rat［J］.Biol Trace Elem Res.2012，149（2）：234-40.

［12］ Guney M，Erdemoglu E，Mungan T.Selenium-vitamin E combination and melatonin modulates diabetes-induced blood oxidative damage and fetal outcomes in pregnant rats［J］.Biol Trace Elem Res.2011，143（2）：1091-1102.

［13］ Guney M，Oral B，Demirin H，et al.Fallopian damage induced by organophosphate insecticide methyl parathion，and protective effect of vitamins E and C on ultrastructural changes in rats［J］. Toxicol Ind Health，2007，23（7）：429-438

［14］ Guney M，Ozguner F，Oral B，et al.900 MHz radiofrequencyinduced histopathologic changes and oxidative stress in rat endometrium：protection by vitamins E and C［J］.Toxicol Ind Health.2007，23（7）：411-420.

［15］ Guney M，Oral B，Demirin H，et al.Protective effects of vitamins C and E against endometrial damage and oxidative stress in fluoride intoxication［J］.Clin Exp Pharmacol Physiol.2007，34 （5-6）：467-74.

［16］ Guney M，Oral B，Take G，et al.Effect of fluoride intoxication on endometrial apoptosis and lipid peroxidation in rats：role of vitamins E and C［J］.Toxicology.2007，231（2-3）：215-223.

［17］ 曲軍英，呂一帆，林茵平，等.建立小鼠子宮內(nèi)膜損傷模型的研究［J］.福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，01：34-36，44.

［18］ 胡曉曉.小鼠子宮內(nèi)膜電熱損傷模型的建立 ［D］.浙江大學(xué)，2013.

［19］ 路平，趙瀟丹，郝玉娟，等.小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在子宮內(nèi)膜損傷小鼠子宮內(nèi)膜中的定位 ［J］.鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2015，01：101-104.

［20］ 關(guān)碩.小鼠子宮內(nèi)膜損傷后修復(fù)的初步研究［D］.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，2012.

［21］ Alawadhi F，Du H，Cakmak H，et al.Bone marrow-derived stem cell（BMDSC）transplantation improves fertility in a murine model of Asherman's syndrome［J］.PloS One，2014，9（5）：e96662.

［22］ Huberlant S，F(xiàn)ernandez H，Vieille P，et al.Application of a hyaluronic acid gel after intrauterine surgery may improve spontaneous fertility：A randomized controlled trial in New Zealand white rabbits［J］.Plos ONE.2015，10（5）：e0125610.

［23］ Khrouf M，Morel O，Hafiz AE，et al.Evaluation of the rabbit as an experimental model for human uterine synechia［J］.J Human Reprod Sci，2012，5（2）：175-180.

［24］ Liu F，Zhu ZJ，Li P，et al.Creation of a female rabbit model for intrauterine adhesions using mechanical and infectious injury［J］.J Surg Res，2012，183（1）：296-303.

［25］ 曹興鳳，王藹明，尹善德，等.機(jī)械刮宮法建立比格犬宮腔粘連模型［J］.國(guó)際生殖健康/計(jì)劃生育雜志，2014，33（5）：334-338，405.

［26］ Van Vugt DA，Krzemien A，Roy BN，et al.Photodynamic endometrial ablation in the nonhuman primate［J］.J Soc Gynecol Investig.2000，7（2）：125-130.

Animal selection for thin endometrium model and improved technique for its establishment

XU Chun-yan1，SONG Yang1*，LI Kun-yin1，GUAN Yong-ge2，F(xiàn)AN Wei-zhi1
（1.Guangzhou University of TCM，Guangzhou 510405，China；2.the First Affiliated Hospital，Guangzhou University of Chinese Medicine 510405）

【Abstract】Thin endometrium is an important factor influencing the in vitro fertilization and embryo transfer，and there is a lack of effective therapy in the treatment of thin endometrium.The aim of this study was to explore a stable animal model of effective thin endometrium，and to promote the research on thin endometrium pathogenesis and provide experimental basis of treatment.To analyze a variety of establishments of endometrial damage animal model reported in the domestic and foreign literatures，it is concluded that perfusing 95%ethanol into uterine cavities of rats can establish a rat model of thin endometrium，and put forward some experience and methods for its improvement.

【Key words】Thin endometrium；Animal models；Establishment method.

【中圖分類(lèi)號(hào)】Q95-33

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1005-4847（2016）02-0217-04

Doi：10.3969/j.issn.1005-4847.2016.02.021

［基金項(xiàng)目］國(guó)家自然科學(xué)基金（81303000）。

［作者簡(jiǎn)介］許春燕（1986-），女，2013級(jí)博士研究生，主要從事補(bǔ)腎活血法治療法婦科腫瘤及月經(jīng)病的研究。

［通訊作者］宋陽(yáng)（1978-），男，博士，副教授，主要從事促進(jìn)女性生殖健康等方面的研究，Email：fau20@126.com

Corresponding author：SONG Yang，Email：fau20@126.com

［收稿日期］2015-11-06