蘇錦松，呂秀梅，張靜

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不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛藥材野黃芩苷含量測(cè)定

蘇錦松，呂秀梅，張靜

［摘要］目的：研究不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛藥材中野黃芩苷含量。方法：采用高效液相色譜法，色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱Diamonsil C18（250×4.6mm），流動(dòng)相：乙腈-水-磷酸（18∶82∶0.2） ，流速：1mL.min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：282 nm，柱溫：40℃。結(jié)果：在選定色譜條件下，野黃芩苷分離度良好，線性范圍為0.1812 μg ～2.8997 μg，不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛藥材中野黃芩苷含量差異較大，云南雙柏縣藥材野黃芩苷含量最高。結(jié)論：不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛含量差異大。

［關(guān)鍵詞］HPLC；產(chǎn)地；燈盞細(xì)辛；野黃芩苷

［作者單位］成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 610075

Tel:028-87714869 Email:1508113999@qq.com

Email:zhangjingtcm@cdutcm.edu.cn

燈盞細(xì)辛，又名燈盞花，來(lái)源于菊科飛蓬屬植物短葶飛蓬（Erigeron breviscapus （Vant.） Hand. -Mazz.），始載于《滇南本草》，具有活血通絡(luò)止痛，祛風(fēng)散寒，用于中風(fēng)偏癱，胸痹心痛，風(fēng)濕痹痛，頭痛，牙痛［1］。燈盞細(xì)辛主產(chǎn)云南省，西藏和四川少有分布。隨燈盞細(xì)辛的深入研究，其需求量日益增加，市面上商品藥材也越來(lái)越多，筆者走訪的云南省幾個(gè)縣市的燈盞細(xì)辛藥材，不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛藥材在性狀上也具有一定差異，為比較不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛藥材質(zhì)量，本實(shí)驗(yàn)對(duì)收集的各產(chǎn)地具代表性的藥材樣品進(jìn)行野黃芩苷的含量比較。

1　儀器與試藥

藥品采自云南省、西藏等地，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥學(xué)院張藝教授鑒定為菊科植物短葶飛蓬（Erigeron breviscapus （Vant.） Hand. -Mazz.）。野黃芩苷對(duì)照品（880-200001，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）。日本島津LC-10A高效液相色譜儀。乙腈（色譜純，Dikmapure公司） ， 水為重蒸水，其他試劑為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1 色譜條件［2］

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱Diamonsil C18（250×4.6 mm）， 流動(dòng)相：乙腈-水-磷酸（18∶82∶0.2），檢測(cè)波長(zhǎng)：282 nm；流速：1 mL.min-1；柱溫：40℃。此條件下，野黃芩苷峰形和分離度好，結(jié)果見(jiàn)圖1，圖2。

圖1 野黃芩苷對(duì)照品HPLC圖

圖2 燈盞細(xì)辛藥材供試品溶液HPLC圖

2.2 實(shí)驗(yàn)方法及方法學(xué)考察

2.2.1 對(duì)照品溶液制備 精密稱取野黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇配制成0.1 mg.mL-1對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液制備［2］將藥材粉碎，取0.5 g，精密稱定，加水回流提取兩次，第一次加水50 mL，第二次加水40 mL，每次60 min，合并濾液于100 mL的量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液用0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，作為供試品溶液。

2.2.3 線性關(guān)系考察 分別精密量取貯備液0.25 mL、0.5 mL、1 mL、2 mL、4 mL5份，置于10 mL量瓶中，以甲醇稀釋至刻度。照上述色譜條件分別精密吸取各溶液20 μL進(jìn)樣，測(cè)定峰面積積分值，以野黃芩苷對(duì)照品進(jìn)樣量 （μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算回歸方程得：Y= 151374.0677X+34678.443 （r=0.9997）。

2.2.4 精密度試驗(yàn) 在上述色譜條件下，精密吸取對(duì)照品溶液10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定5次，分別記錄峰面積積分值， RSD為0.49%，結(jié)果表明方法精密度良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 在上述色譜條件下，精密吸取對(duì)照品溶液20 μL，注入液相色譜議測(cè)定，然后每隔2h測(cè)定1 次，考察10 h，記錄峰面積，RSD為0.56%，結(jié)果表明，至少在10 h內(nèi)樣品穩(wěn)定。

2.2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取燈盞細(xì)辛藥材粗粉5份，分別精密稱定，照“2.2.2”項(xiàng)下制備，照上述色譜條件測(cè)得野黃芩苷平均含量為1.13 %，RSD為1.57%，結(jié)果表明本方法重現(xiàn)性良好。

2.2.7 回收率試驗(yàn) 取已知含量的燈盞細(xì)辛藥材粗粉6份，精密稱定，分別置燒瓶中，各加入一定量的野黃芩苷對(duì)照品，制成供試品溶液，照上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定結(jié)果，結(jié)果表明，野黃芩苷平均回收率為102.0 %，RSD為1.47 %。

2.3 樣品測(cè)定結(jié)果

按照含量測(cè)定方法，各批號(hào)燈盞細(xì)辛藥材分別精密稱定3份，按照供試品溶液制備方法制備，測(cè)定不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛中野黃芩苷含量，結(jié)果各產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛藥材中野黃芩苷含量差異較大（0.8 %～1.8%），其中云南省雙柏縣藥材野黃芩苷含量最高，結(jié)果見(jiàn)表1。

3　討論

燈盞細(xì)辛野生資源主要生長(zhǎng)在海拔1200～3500米之間，年平均氣溫15 ℃左右，土壤微酸性和中性。云南省的資源主要集中在麗江、楚雄、彌勒、大理、迪慶、羅平、蒙自、邱北等地，產(chǎn)量占全國(guó)產(chǎn)量的95 %。四川攀西地區(qū)、西藏在林芝地區(qū)亦有分布。本文對(duì)不同產(chǎn)地?zé)舯K細(xì)辛野黃芩苷含量進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)各產(chǎn)地存在一定差異，其中云南省雙柏縣藥材野黃芩苷含量最高。

［參考文獻(xiàn)］

［1］蘭茂.滇南本草（卷一）［M］.上海世界書(shū)局，1937:9.

［2］楊文宇，張藝，段俊國(guó).高效液相色譜法測(cè)定燈盞細(xì)辛中燈盞乙素的含量［J］.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，24（3）:37～38.

Determination of scutellarin in Dengzhanxixin from different habitats by HPLC

SU Jing-song， LV Xiu-mei， ZHANGJing //（ Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Chengdu 610075， Sichuan）

［Abstract］Objective: To determine the content of scutellarin in Dengzhanxixin from different habitats.Method: HPLC was adopted to determine the content of scutellarin. The mobile phase was as following: acetonitrile: water: phosphoric acid （18:82:0.2 V/ V）. The flow rate was 1 mL.min-1at 40 ℃. The UV detection wavelength was 282nm. Result: Under the selected chromatography condition， the scutellarin was observed in a good separation and was good linear in the range of 0.1812 μg ～2.8997 μg. The content of scutellarin in Dengzhanxixin from different habitats was different. And the content of scutellarin was highest in Dengzhanxixin from Shuangbai County， Yunnan Province. Conclusion: The content is different of Dengzhanxixin from differentthe habitats.

［Keywords］HPLC； habitat； Dengzhanxixin； scutellarin

［中圖分類號(hào)］R 284.1

［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

［文章編號(hào)］1674-926X（2016）02-006-02

［作者簡(jiǎn)介］蘇 錦松，男，在讀碩士研究生，從事中藥及民族藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

［通訊作者］張 靜，女，副教授，從事中藥及民族藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究 Tel:028-87714869

［收稿日期］2015-10-09