高　瑩，朱成剛，吳娜瓊，郭遠林，劉　庚，董　倩，李建軍

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外醫(yī)院血脂異常與心血管疾病診治中心， 北京　100037)

·論著·

血脂快速分析儀檢測血脂的可靠性研究

高瑩，朱成剛，吳娜瓊，郭遠林，劉庚，董倩，李建軍△

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院阜外醫(yī)院血脂異常與心血管疾病診治中心， 北京100037)

[摘要]目的：評價血脂快速分析儀CardioChek PA(CCPA)快速檢測血脂的可靠性。方法： 連續(xù)收集325例(23～86歲)阜外醫(yī)院血脂中心入院患者的空腹血樣，血清管采集第1份靜脈血樣并用Beckman分析儀檢測血脂各成分，肝素鋰管采集第2份靜脈血樣并使用CCPA分析儀檢測，對二者的檢測結(jié)果進行比較。采用線性回歸分析和Bland-Altman法評價兩種檢測方法獲得的總膽固醇(total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)、甘油三酯(triglycerides，TG)和低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C)的相關(guān)性。結(jié)果： CCPA檢測結(jié)果與實驗室檢查結(jié)果具有良好的一致性，其TC、HDL-C、TG和LDL-C的相關(guān)系數(shù)分別為0.875、0.813、0.910、0.864，對回歸方程中的變量有無回歸關(guān)系進行方差分析，P均<0.001。兩種檢測方法檢測TC、HDL-C、TG和LDL-C的臨床一致百分比分別為97.0%、92.9%、92.4%和83.7%，兩種檢測方法血脂異常的檢出率在TC、HDL-C和TG中沒有統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論： 在嚴格控制血樣采集質(zhì)量的基礎(chǔ)上，CCPA快速血脂檢測系統(tǒng)與實驗室常規(guī)檢測法具有良好相關(guān)性，是一種可靠的床旁臨床血脂篩查工具。

[關(guān)鍵詞]血脂異常；床旁檢測；心血管疾病

心血管疾病是當今世界發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一。降脂治療可以減少粥樣硬化斑塊，因此有助于防治冠心病，對人群進行血脂異常篩查旨在早期發(fā)現(xiàn)冠心病高危人群[1]。床旁檢測(point-of-caretesting，POCT)可以快速得出結(jié)果，且其操作方便，非常適用于人群篩查，POCT的臨床應(yīng)用可以有效地提高人們對于血脂在預(yù)防冠心病和卒中事件中重要性的認識[2]。CardioChekPA分析儀(美國PTS公司，以下簡稱CCPA)是一種便攜的全血檢測系統(tǒng)，作為一種POCT設(shè)備，其可以通過使用檢測試紙條檢測總膽固醇(totalcholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇(highdensitylipoprotein-cholesterol，HDL-C)和甘油三酯(triglycerides，TG)[3]。西方國家推薦醫(yī)療專業(yè)人員使用CCPA分析儀進行篩查，其分析能力足以滿足醫(yī)療保健的需要，可以提供快速和可靠的結(jié)果。但POCT設(shè)備與大型設(shè)備相比變異性更大，這種變異性可能是混合了環(huán)境因素的變異(溫度、濕度、全血的使用和操作人員的培訓(xùn))所致[4]。本研究擬對CCPA分析儀與實驗室檢查的結(jié)果進行比較，并對其一致性做出分析，以評價CCPA的臨床應(yīng)用價值。

1資料與方法

1.1患者一般情況

本研究中入選2013年8月至2015年12月阜外醫(yī)院血脂中心住院患者的325例空腹(12h)血樣本，年齡(55.4±11.4)歲(23～86歲)，其中男性215例(66.2%)，冠心病患者252例(77.5%)。冠心病診斷標準為：冠狀動脈造影顯示至少1個主要的心外膜動脈節(jié)段性病變狹窄程度≥50%、既往曾行冠狀動脈血運重建治療或冠狀動脈增強(compu-terizedtomographicangiography，CTA)提示中度至重度狹窄。該研究由阜外醫(yī)院倫理委員會批準，受試者自愿簽署知情同意書。每個受試者在一次靜脈穿刺中采集兩份靜脈全血標本。

1.2標本采集

第1份標本為無添加劑試管采集靜脈血標本，1h后在中心試驗室進行血清分離，用BeckmanCoulterAU5800分析儀(BeckmanCoulter公司，美國)進行檢測，排除實驗室離心后溶血的標本。采用檢測測試程序確保血脂結(jié)果的質(zhì)量(控制實驗室水平檢測程序)，血脂的變異系數(shù)(coefficientofvariation，CV)為±5%。采用CHOD-PAP法(中生北控生物科技股份有限公司)檢測TC，GPO-POD法(BeckmanCoulter公司，美國)檢測TG，化學(xué)修飾酶法(協(xié)和醫(yī)藥株式會社)檢測HDL-C，選擇性可溶化法(KyowaMedex公司，日本)檢測LDL-C。

第2份靜脈血標本用肝素管采集，于CCPA分析儀中進行檢測。CCPA使用美國PTS公司血脂試紙條對全血中的TC、HDL-C和TG進行干化學(xué)檢測。薄膜移除紅細胞，并經(jīng)水平流動試紙分析血漿血脂濃度。TC和HDL-C的檢測使用同一種酶促反應(yīng)，采用膜分餾層上的磷鎢酸和鎂鹽層將HDL從LDL和極低密度脂蛋白(verylowdensitylipoprotein，VLDL)中進行分離，血漿中得到的HDL碎片與表面活性劑和酶進行反應(yīng)以檢測膽固醇濃度。TG的檢測采用脂蛋白脂酶、丙三醇激酶、丙三醇磷酸氧化酶和過氧化酶的比色法,LDL-C為公式法計算所得(Friedewald公式：LDL=TC-HDL-TG/5),CCPA分析儀使用反射光度法[3]。

控制樣本采集地點的溫度(23～24 ℃)和濕度(40%～50%)，采集過程使用無菌前臂靜脈穿刺的傳統(tǒng)方法，遵循美國臨床實驗室標準化委員會標準與指南推薦，止血帶的使用時間不超過1min[5]。檢測環(huán)境的溫度在20～27 ℃之間，濕度<80%,在檢測之間、檢測過程中和檢測之后記錄溫度。靜脈血采集人員為技術(shù)人員，依據(jù)常規(guī)操作手冊進行CCPA使用培訓(xùn)。

1.3質(zhì)量控制

使用CCPA質(zhì)量控制水平1和水平2對PTS血脂試紙條進行檢測，ChekMateTM試紙用來驗證分析儀的光學(xué)元件在所有波長中都可以正確運行。分析儀中插入ChekMateTM記憶芯片，隨后插入ChekMateTM水平1和水平2。按生產(chǎn)廠家使用說明，每天使用ChekMateTM試紙條并且每次用新的檢測試紙條以檢測液體質(zhì)量控制，每次新裝載新的試紙條用以排查分析儀或遵守每個設(shè)備質(zhì)量控制要求。本研究通過每天運行液體控制進行檢測，且每次檢驗開始時運行ChekMateTM試紙條以進行更嚴格的質(zhì)量控制，每個檢測結(jié)果都有序列號并記錄操作者姓名。

1.4臨床一致性

根據(jù)美國國家膽固醇教育計劃(USNationalCholesterolEducationProgram，NCEP)ATPⅢ指南[6]、美國心臟病學(xué)會/美國心臟協(xié)會指南(2014)[7]和《中國成人血脂異常防治指南(2007)》[8]的危險分層進行數(shù)據(jù)分析。將血脂異常定義為TC≥200mg/dL、HDL<40mg/dL、TG≥200mg/dL或LDL≥130mg/dL，對所有的血脂數(shù)據(jù)進行臨床決定水平分類(單位均為mg/dL)：(1)TC：<200，200～239，≥240；(2)HDL-C：<40，40～59，≥60；(3)TG：<150，150～199，200～499，≥500；(4)LDL-C：<100，100～129，≥130。臨床一致定義為CCPA和實驗室結(jié)果在同一類別中。為了盡量避免過高估計臨床差異(例如TC值201mg/dL和199mg/dL可能被分在不同的組)， 將每一類別邊界值5%以內(nèi)的數(shù)值同時分類在兩組。

CCPA分析儀TC范圍100～400mg/dL、HDL-C范圍15～100mg/dL、TG范圍50～500mg/dL，所有超出范圍的結(jié)果以“小于”或“大于”表示，在本研究的線性回歸分析中被排除，因此每個表格中樣本的總數(shù)不同。

1.5統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。CCPA結(jié)果與實驗室結(jié)果之間的差異用配對方式計算，計算平均值的差異。用線性回歸分析配對數(shù)據(jù)，描述兩種方法之間的關(guān)聯(lián)；用方差分析法對回歸方程中的變量有無回歸關(guān)系進行檢驗。CCPA與實驗室結(jié)果的血脂異常檢出率采用配對卡方檢驗進行比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1CCPA和實驗室檢測方法的相關(guān)性

我們對325例患者進行了CCPA和實驗室檢測，圖1顯示了人群研究中每個檢測值的分布。線性回歸分析表明，TC、HDL-C、TG和LDL-C的相關(guān)系數(shù)分別為0.875、0.813、0.910、0.864，對回歸方程中的變量有無回歸關(guān)系進行方差分析，P均<0.001。Bland-Altman分析顯示，CCPA分析儀與Beckman生化分析儀檢驗結(jié)果的差值平均值：TC為-10.71(95%CI：-50.7～28.65)、HDL-C為-1.01(95%CI：-14.97～12.95)、TG為-8(95%CI：-69.72～53.72)、LDL-C為-18.17(95%CI：-56.45～20.11)(圖2)，CCPA與實驗室檢查的血脂異常出率在TC、HDL-C和TG中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表1)，但在LDL-C中差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

TC, total cholesterol; HDL-C, high density lipoprotein-cholesterol; TG, triglycerides; LDL-C, low density lipoprotein-cholesterol; CCPA, CardioChek PA.圖1　兩種檢測方法血脂結(jié)果的分布情況 Figure 1　The distribution of the lipid results in two test methods

表1　兩種檢測方法的血脂異常檢出情況

Table 1　Detection of hyperlipidemia in two test methods

ItemsHyperlipidemia,n(%)PvalueTC CCPA46(15.2) Beckman35(11.6)0.052HDL-C CCPA217(67.0) Beckman208(64.2)0.289TG CCPA54(17.1) Beckman55(17.5)1.000LDL-C CCPA34(11.8) Beckman67(23.2)<0.001

AbbreviationsasinFigure1.Thedefinitionofhyperlipidemia:TC≥200mg/dL,HDL<40mg/dL,TG≥200mg/dL,LDL≥130mg/dL.

2.2偏倚的評價

我們采用兩種方式評價CCPA分析儀和實驗室之間存在的偏倚。首先，每個樣本的配對結(jié)果之間的偏倚以[(CCPA-Beckman)/Beckman]×100計算，觀察到的偏倚平均值見表2；其次，預(yù)測的偏倚還可以用線性回歸方程計算每個樣本的臨床相關(guān)決策點，并計算這些偏倚的平均值(表2)。本研究中，如果所有配對結(jié)果的差值百分比的平均值在一定范圍內(nèi)(TC：±10%；HDL-C：±12%；TG：±15%)，CCPA系統(tǒng)的性能被認為可以接受。這個范圍的確定是具有一定挑戰(zhàn)性的，因為根據(jù)美國臨床實驗室改進法案(ClinicalLaboratoryImprovementAmendments，CLIA)技術(shù)檢查標準推薦的可接受的分析性能是TC±10%、HDL-C±30%、TG±25%，本研究結(jié)果均在規(guī)定范圍內(nèi)，故CCPA系統(tǒng)的偏倚是可以接受的。

The left side is the correlation curve, the right side is the Bland-Altman diagram. Abbreviations as in Figure 1.圖2　CCPA分析儀與Beckman生化分析儀檢測結(jié)果的相關(guān)性Figure 2　Correlation between the results of the CCPA analyzer and Beckman biochemical analyzer

2.3CCPA和實驗室檢測方法的臨床一致性

在分析臨床一致性時，樣本被分類為“一致”、“一類不一致”(范圍相差一類)和“兩類不一致”(范圍相差兩類)，不存在三類不一致的樣本。表3顯示了所有樣本總的不一致性≤7.1%(除外LDL-C)，兩類不一致≤1.3%，故兩種檢測方法的一致性好。

2.4質(zhì)控方式

2.4.1Multichem質(zhì)控水平1TC為(161±10)mg/dL(110～220mg/dL，CV=6%)，TG為(131±22)mg/dL(50～200mg/dL，CV=16%)，HDL為(31±2)mg/dL(20～45mg/dL，CV=8%)。

2.4.2Multichem質(zhì)控水平2TC為(231±15)mg/dL(170～340mg/dL，CV=6%)，TG為(222±28)mg/dL(110～340mg/dL，CV=13%)，HDL為

(50±3)mg/dL(30～70mg/dL，CV=5%)。

表2　偏倚分析

AbbreviationsasinFigure1. *Clinicalrelevantdecisionpointsusedtocalculatethepredictedbias.TC=160, 200, 240, 280mg/dL；HDL-C=40, 60, 80, 100mg/dL；TG=100, 150, 200, 250mg/dL；LDL-C=100, 130, 160, 190mg/dL.

表3　臨床一致性(使用界值的5%)

AbbreviationsasinFigure1.

3討論

據(jù)國家心血管病中心發(fā)布的《中國心血管病報告2013》數(shù)據(jù)顯示，中國心血管病現(xiàn)患病人數(shù)已高達2.9億，即每10個成年人中就有2人患心血管病，每年約350萬人死于心血管病[9]。心血管病的發(fā)病率和死亡率在我國呈上升趨勢，而血脂異常是心血管疾病的重要危險因素，有研究報道，每降低1mmol/L(38.67mg/dL)的LDL-C，可以降低心血管風險達21%[10]。但我國血脂異常的實際情況卻不盡如人意，目前中國血脂異常人數(shù)占人口總數(shù)的18.6%，知曉率和檢測率僅為3.2%和6.4%[9]；而美國血脂異常人數(shù)占人口總數(shù)的13.8%，其血脂異常知曉率和檢測率分別高達50.4%和48.1%[11]。因此，迫切需要一種以人群為基礎(chǔ)進行篩查的診斷方法，旨在早期確定可逆轉(zhuǎn)的心血管疾病危險因素。

CCPA分析儀作為一種便攜式快速血脂檢測全血分析儀，因其性能仍存在些許局限性而在上市后并未得到廣泛使用。盡管存在挑戰(zhàn)，但POCT檢測提供了一種新的方式,可以根本地改變醫(yī)療專業(yè)人員的診治方式，從而可能成為醫(yī)療衛(wèi)生系統(tǒng)中改變服務(wù)方式的關(guān)鍵因素。CCPA分析儀曾在實驗室技術(shù)驗證研究中進行對比，結(jié)果表明其足以勝任在血脂篩查中的使用[3,12-13]。本研究評價了CCPA分析儀與實驗室檢查的相關(guān)性，結(jié)果顯示TC、HDL-C、TG和LDL-C的相關(guān)系數(shù)分別為0.875、0.813、0.910、0.864，可見TG的相關(guān)性最高，其他的相關(guān)性較好，原因可能是由于本研究中心收治一部分家族性高膽固醇血癥患者，其膽固醇和脂蛋白水平顯著升高，CCPA分析儀檢測的結(jié)果與生化分析儀結(jié)果的差值會較一般人群略高，使得數(shù)據(jù)偏離得更多，從而影響了相關(guān)系數(shù)。兩種檢測方法中TC、HDL-C和TG有很好的臨床一致性(92.4%～97.0%)，由于CCPA分析儀中LDL-C是計算所得，所以LDL-C的結(jié)果受其他3個血脂水平的共同影響，導(dǎo)致其一致性稍差(83.7%)。血脂異常的檢出率在CCPA和Beckman間差異無統(tǒng)計學(xué)意義，故CCPA分析儀可以滿足臨床中對于血脂檢測的基本要求。

分析前的準備是保證結(jié)果質(zhì)量的重要前提。CCPA分析儀采用校準吸量管以保證每次檢測時有相同的血量被轉(zhuǎn)移到試紙上，可以最小化誤差。應(yīng)用CCPA時應(yīng)注意所有觀察到的變異均與CLIA精密度要求一致，不能準確完成分析前的各種程序都可能會影響檢測結(jié)果，從而成為血脂篩查中CCPA使用受限的原因。分析前期應(yīng)確保CCPA設(shè)備的質(zhì)量，對操作者進行有效的培訓(xùn)以及對廠家技術(shù)指導(dǎo)的依從可以確保更準確的結(jié)果[4]。本研究結(jié)果顯示，CCPA分析儀是一個可靠的血脂POCT系統(tǒng)。CCPA分析儀可以使用毛細血管血樣本(指血)和靜脈血樣本，如果因為其他原因采集了靜脈血，則靜脈血樣本可以用于血脂檢測，而且其數(shù)值與毛細血管血樣本沒有臨床差異[14]。CCPA分析儀的優(yōu)勢不僅是可以快速反饋結(jié)果，而且其操作簡易、靈活且檢測速度快，可以隨時隨地用于臨床篩查，適用于各種工作場所和城市健康篩查，特別是農(nóng)村地區(qū)。

一項在流動診所中使用CCPA分析儀的研究顯示，對意大利北部一個小社區(qū)中未經(jīng)篩選的344個受試者使用CCPA分析儀進行血脂檢測，最終有78.2%的受試者確診存在膽固醇水平升高,故篩查可以增加早期診斷和治療比例，這對心血管疾病的預(yù)防非常重要[15]。Zhang等[16]對廣州地區(qū)9個醫(yī)院的4 012名門診患者采用CCPA進行血脂檢測，發(fā)現(xiàn)高脂血癥患者達49.7%，但其中大部分人從未接受治療，可見在中國提高血脂異常的知曉率，對其進行治療和控制是非常必要的。

總之，CCPA分析儀的使用可能會減少未診斷和未治療心血管疾病的比例，并使患者更好地了解血脂目標值，增加血脂管理的主動性，應(yīng)被廣泛應(yīng)用于血脂檢測。

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(2016-03-14收稿)

(本文編輯：趙波)

Study on the reliability of CardioChek PA for measuring lipid profile

GAO Ying, ZHU Cheng-gang, WU Na-qiong, GUO Yuan-lin, LIU Geng, DONG Qian, LI Jian-jun△

(DepartmentofDyslipidemiaandCardiovascularDisease,FuWaiHospital,ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalCollege，Beijing100037,China)

ABSTRACTObjective：To evaluate the clinical correlation between the CardioChek PA analyzer (CCPA) and a clinical laboratory reference method to use for screening program purposes. Methods: Fasting blood samples were collected on 325 patients (age: 23-86 years). One venous sample was collected using a serum tube for the evaluation on a Beckman reference analyzer. A second venous sample was collected in a lithium heparin tube and was evaluated on the CCPA analyzer. Linear regression analyses and Bland-Altman method were performed for each measured analyte: total cholesterol (TC), high density lipoprotein-cholesterol (HDL-C), triglycerides (TG) and low density lipoprotein-cholesterol (LDL-C). Results: Our results demonstrated a good clinical agreement for TC, HDL-C, TG and LDL-C(97.0%, 92.9%, 92.4% and 83.7%)in comparison with the CCPA to the reference analyzer. The correlation coefficients were 0.875, 0.813, 0.910, 0.864, respectively. P values all < 0.001. There was no significant difference in the detection rate of hyperlipidemia in TC, HDL-C and LDL-C. Conclusion: We have identified the pre-analytic phase as an important step to guarantee the quality of results and indicated that the CCPA is a reliable lipid point-of-care testing system that can be used for the application of clinical screening anywhere.

KEY WORDSDyslipidemias; Point-of-care testing; Cardiovascular diseases

基金項目:首都醫(yī)學(xué)發(fā)展科研基金(2011400302)資助Supported by the Capital Foundation for Medical Research and Development (2011400302)

Corresponding author△’s e-mail, lijianjun938@126.com

[中圖分類號]R589.2

[文獻標志碼]A

[文章編號]1671-167X(2016)03-0523-06

doi:10.3969/j.issn.1671-167X.2016.03.025

網(wǎng)絡(luò)出版時間：2016-5-2710：36：56網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/11.4691.R.20160527.1036.024.html