于振海，王玉新，陳有光,鄭玉珍，盧紅

(山東省淡水漁業(yè)研究院，山東省淡水水產(chǎn)遺傳育種重點(diǎn)試驗(yàn)室，山東濟(jì)南250013)

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4種藥物對(duì)齊口裂腹魚魚苗的急性毒性試驗(yàn)

于振海，王玉新，陳有光,鄭玉珍，盧紅

(山東省淡水漁業(yè)研究院，山東省淡水水產(chǎn)遺傳育種重點(diǎn)試驗(yàn)室，山東濟(jì)南250013)

[摘要]采用半靜水式試驗(yàn)方法探討了在水溫(20.1±1.5)℃、pH(8.01±0.12)、溶氧(5.1±0.9)mg/L條件下，敵百蟲、車輪特寧、二溴海因、甲醛等4種魚藥對(duì)齊口裂腹魚(Schizothorax prenanti)魚苗的急性毒性。結(jié)果顯示：4種藥物中敵百蟲的96h半致死濃度最低，為0.473mg/L；甲醛的96h半致死濃度最高，為37.565mg/L。4種藥物毒性大小順序依次為敵百蟲>二溴海因>車輪特寧>甲醛。4種藥物的安全濃度分別為敵百蟲0.128mg/L，車輪特寧0.886mg/L，二溴海因1.011mg/L，甲醛7.531mg/L。該結(jié)果表明：4種藥物中，敵百蟲和甲醛安全濃度低于常規(guī)用量，在生產(chǎn)中慎用；二溴海因與車輪特寧安全濃度高于常規(guī)用量，可在生產(chǎn)中安全使用。

[關(guān)鍵詞]齊口裂腹魚(Schizothorax prenanti)；急性毒性；半致死濃度；安全濃度

齊口裂腹魚(Schizothoraxprenanti)是鯉形目(Cypriniformes)鯉科(Cyprinidae)裂腹魚亞科(Schizothoracinae)裂腹魚屬(Schizothorax)魚類，自然分布于我國(guó)長(zhǎng)江上游、金沙江、岷江、大渡河、青衣江、酋水、任河及烏江下游等水域,其肉味鮮美,是產(chǎn)區(qū)的名貴魚類,也是我國(guó)特有的重要“冷水性經(jīng)濟(jì)魚類”[1,2]。

由于齊口裂腹魚具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，近年來(lái)養(yǎng)殖面積逐漸增加。在養(yǎng)殖階段，魚苗容易因細(xì)菌、霉菌、寄生蟲等病害侵襲而大批死亡[3]。采用藥物進(jìn)行病害防治是最直接、最有效和最經(jīng)濟(jì)的辦法[4]。有關(guān)水產(chǎn)藥物對(duì)魚類急性毒性研究表明，魚的種類不同、規(guī)格不同對(duì)藥物的安全濃度都存在一定的差異[5]，用藥過(guò)程中因?qū)λ幬锏亩拘圆幻?、濃度使用不?dāng)而造成魚中毒的情況時(shí)有發(fā)生[6]。因此，通過(guò)急性毒性試驗(yàn)確定藥物的安全濃度和毒性等級(jí)，以確定合適的藥物及用藥濃度是必要的。本試驗(yàn)選用常規(guī)的病害防治藥物，通過(guò)急性毒性試驗(yàn)探討試驗(yàn)藥物對(duì)齊口裂腹魚的安全濃度，以期為齊口裂腹魚的病害防治時(shí)合理安全用藥提供參考。

1材料與方法

1.1材料：

試驗(yàn)用魚體長(zhǎng)(7.5±1.0)cm，體重(2.0±0.3)g。健康活潑，無(wú)病、無(wú)傷、無(wú)畸形。試驗(yàn)前在試驗(yàn)條件下暫養(yǎng)3d，每天投食1次，試驗(yàn)開始前24h停止投食。

受試藥物有甲醛、車輪特寧、二溴海因和敵百蟲，藥品規(guī)格及生產(chǎn)廠家等詳見(jiàn)表1。

1.2試驗(yàn)方法

試驗(yàn)在規(guī)格60cm×40 cm×40 cm的白色塑料箱內(nèi)進(jìn)行。試驗(yàn)時(shí)間為2015年4月1日至4月27日，每個(gè)周期4 d，試驗(yàn)用水為養(yǎng)殖場(chǎng)用深井水，水質(zhì)符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)( GB11607-89)，水溫(20.1±1.5)℃、pH(8.01±0.12)、溶氧(5.1±0.9)mg/L。每箱盛水30L，苗10尾，每日測(cè)1次水溫、pH、溶解氧。

表1　4種試驗(yàn)藥物的規(guī)格與成分

采用半靜態(tài)試驗(yàn)法，參照盧玲等[7]的方法在室內(nèi)進(jìn)行。試驗(yàn)期間不投餌，甲醛具有揮發(fā)性，為保證試驗(yàn)藥液質(zhì)量濃度，每隔24h 更換1次試驗(yàn)藥液。試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，測(cè)定試驗(yàn)容器中受試物濃度。

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，在包括使魚全部死亡的最低濃度和96h魚類全部存活的最高濃度之間至少設(shè)置5個(gè)濃度組，以幾何級(jí)數(shù)排布，濃度間隔系數(shù)小于等于2.2[8]。每個(gè)試驗(yàn)濃度組設(shè)2個(gè)平行，每一系列設(shè)1個(gè)空白對(duì)照。試驗(yàn)溶液調(diào)節(jié)至相應(yīng)溫度后，從馴養(yǎng)魚群中隨機(jī)取出魚并隨機(jī)迅速放入各箱中，每箱放魚苗10尾。同一試驗(yàn)，試驗(yàn)用魚在30min內(nèi)分組完畢。

在24、48、72、96h后檢查受試魚狀況，以試驗(yàn)對(duì)象失去活力、對(duì)外界刺激無(wú)反應(yīng)為死亡標(biāo)準(zhǔn)[9]。在試驗(yàn)開始后3h或6h觀察各處理組魚的狀況，并記錄異常行為。

1.3數(shù)據(jù)處理

半致死濃度(LC50)、安全濃度(SC)[10]采用下述公式計(jì)算:

(1)

(2)

式中:xm為死亡組最大劑量的對(duì)數(shù)；LC50為半致死濃度，mg/L；d為相鄰濃度的對(duì)數(shù)差；p為各組的死亡率，%；∑p為各組死亡率之和，%；SC為安全濃度，mg/L；B為48h LC50，mg/L;C為24hLC50，mg/L。

2結(jié)果與分析

整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中空白對(duì)照組沒(méi)有出現(xiàn)死魚現(xiàn)象，即死亡率為0。敵百蟲、車輪特寧、二溴海因、甲醛等4種藥物對(duì)齊口裂腹魚的毒性試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。

2.1敵百蟲對(duì)齊口裂腹魚的毒性

敵百蟲中毒后的魚苗對(duì)外界刺激反應(yīng)能力降低，在水中翻滾，游泳時(shí)尾部擺動(dòng)頻率高，魚體有明顯彎曲現(xiàn)象，死前魚體失去平衡，最后死于水底。濃度為0.2mg/L時(shí)，96h魚死亡率為0；濃度為0.8mg/L時(shí)，24h內(nèi)的死亡率為100%(表2)。經(jīng)計(jì)算，敵百蟲對(duì)齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度分別為0.583、0.525mg/L，安全濃度為0.128mg/L(表3)。

2.2車輪特寧對(duì)齊口裂腹魚的毒性

由表2可知，齊口裂腹魚在藥物濃度為1.000～1.496mg/L時(shí)96h內(nèi)未出現(xiàn)死亡，當(dāng)濃度為5mg/L時(shí)，魚苗開始無(wú)明顯不適，后逐漸反應(yīng)遲鈍，偶有突然竄動(dòng)，身體失去平衡，約5h出現(xiàn)死亡，24h箱內(nèi)魚苗全部死亡(表2)。經(jīng)計(jì)算，車輪特寧對(duì)齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度為3.772、3.477mg/L，安全濃度為0.886mg/L(表3)。

2.3二溴海因?qū)R口裂腹魚的毒性

齊口裂腹魚放入二溴海因的水箱中后，藥物濃度為10mg/L時(shí)，大約10min就出現(xiàn)失去平衡的現(xiàn)象，30min開始出現(xiàn)死亡，死亡前出現(xiàn)浮頭，側(cè)翻失去平衡的現(xiàn)象，死亡后魚口張開，腹部略漲。藥物濃度分別為10.0mg/L 、5.6mg/L的2個(gè)試驗(yàn)組的24h死亡率均為100%；濃度分別為1.0mg/L 和1.8ml/L的2個(gè)試驗(yàn)組96h死亡率均為0(表2)。經(jīng)計(jì)算，二溴海因?qū)R口裂腹魚的24、48h的半致死濃度均為3.369mg/L，安全濃度為1.011mg/L(表3)。

表2　4種藥物對(duì)昆明裂腹魚魚苗的致死率

表3　4種藥物的半致死濃度和安全濃度

2.4甲醛對(duì)齊口裂腹魚的毒性

甲醛急性中毒的齊口裂腹魚表現(xiàn)為不安亂竄，浮頭，后身體側(cè)翻失去平衡，最后死亡。藥物濃度為10mg/L時(shí)，96h魚死亡率為0；濃度為100mg/L時(shí)，24h內(nèi)的死亡率為100%(表2)。經(jīng)計(jì)算，甲醛對(duì)齊口裂腹魚的24、48h的半致死濃度為70.771、50.097mg/L，安全濃度為7.531mg/L(表3)。

3討論

3.14種藥物對(duì)齊口裂腹魚的毒性評(píng)價(jià)

半致死濃度(LC50)用來(lái)衡量藥物對(duì)試驗(yàn)魚毒性的大小，其值越小，藥物毒性越大；其值越大，毒性越低[11,12]。以96h LC50為魚類急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，分為極高毒(<1mg/L)、高毒(1～10mg/L)、中毒(10～100mg/L)和低毒(>100mg/L)4個(gè)等級(jí)[8]。本試驗(yàn)中4種藥物對(duì)齊口裂腹魚的96h LC50順序依次為甲醛>車輪特寧>二溴海因>敵百蟲，按照藥物對(duì)齊口裂腹魚的毒性大小順序依次為敵百蟲>二溴海因>車輪特寧>甲醛。從本試驗(yàn)結(jié)果看：4種藥物中敵百蟲對(duì)齊口裂腹魚是極高毒藥物，二溴海因和車輪特寧是高毒藥物，甲醛是中毒藥物。由表3可知,4種藥物對(duì)齊口裂腹魚的半致死濃度基本表現(xiàn)為24h LC50>48h LC50>96h LC50，說(shuō)明隨時(shí)間的延長(zhǎng)，4種藥物對(duì)試驗(yàn)魚的毒性效應(yīng)相應(yīng)提高。

3.24種藥物對(duì)齊口裂腹魚苗的用藥安全

敵百蟲為膽堿酯酶抑制劑，能將膽堿酯酶的活性點(diǎn)磷酸化而抑制其活性，因其在魚體內(nèi)殘留量少、殘留時(shí)間短而被廣泛用于防治體外寄生甲殼類、單殖吸蟲及腸內(nèi)寄生的部分蠕蟲，常用劑量為0.2～0.5mg/L[13]。試驗(yàn)中敵百蟲對(duì)齊口裂腹魚的安全濃度為0.128mg/L，低于常用劑量，并且其在毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)中屬極高毒，因此在齊口裂腹魚魚苗的病害防治過(guò)程中不宜使用敵百蟲。甲醛具有廣譜性殺滅細(xì)菌、寄生蟲、真菌、芽孢和病毒的作用，甲醛已被廣泛應(yīng)用于水生動(dòng)物疾病防治，且使用劑量較大，常規(guī)用量為10～30mg/L[14]。試驗(yàn)中，甲醛的安全濃度為7.531mg/L，低于常規(guī)用量，但其毒性分級(jí)屬中毒，因此在齊口裂腹魚魚苗的病害防治過(guò)程中甲醛要慎用。

二溴海因在水產(chǎn)養(yǎng)殖中作為殺菌型消毒劑，常用劑量為0.3～0.4mg/L ，多種水產(chǎn)動(dòng)物安全濃度均高于常規(guī)用量，其安全系數(shù)較高，是很好的消毒劑[15]。試驗(yàn)中二溴海因的安全濃度為1.011mg/L，高于常規(guī)用量，說(shuō)明二溴海因能夠用于齊口裂腹魚魚苗的病害防治。車輪特寧為阿維菌素水乳劑生產(chǎn)制品，其有效成分為阿維菌素。阿維菌素對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物對(duì)錨頭鳋、中華鳋、纖毛蟲、指環(huán)蟲和線蟲等寄生蟲均有著極強(qiáng)的驅(qū)殺作用，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)外寄生蟲病的防治[16]。車輪特寧的規(guī)定劑量為0.037～0.045mg/L。本試驗(yàn)中車輪特寧的安全濃度為0.886mg/L，高于常用劑量，說(shuō)明車輪特寧能夠用于齊口裂腹魚魚苗疾病的防治。由于阿維菌素對(duì)魚類和蝦蟹類毒性較強(qiáng)[17,18]，在病害防止過(guò)程中注意合理用藥。

在生產(chǎn)上選用藥物除了考慮藥物的半致死濃度和安全濃度以外，還需對(duì)藥物的常用濃度及用藥時(shí)間進(jìn)行綜合考慮。

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[收稿日期]2015-11-03

[作者簡(jiǎn)介]于振海(1983-)，男，碩士，助理研究員，主要從事養(yǎng)殖工程研究，zhenhaiyu-007@163.com。

[中圖分類號(hào)]S948

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1673-1409(2016)09-0038-04

[引著格式]于振海，王玉新，陳有光，等.4種藥物對(duì)齊口裂腹魚魚苗的急性毒性試驗(yàn)[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版) ，2016，13(9)：38～41.