代小英，熊瑋平，姜　楠

(深圳華僑城醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東深圳 518053)

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·臨床研究·

化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)檢測(cè)孕婦TORCH感染的結(jié)果分析

代小英，熊瑋平，姜楠

(深圳華僑城醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東深圳 518053)

摘要:目的了解化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)孕婦產(chǎn)前TORCH感染的情況。方法采用西門子IMMULITE2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光法對(duì)1 759例孕婦的血清進(jìn)行TORCH 7項(xiàng)，包括弓形蟲IgM、IgG，風(fēng)疹病毒IgM、IgG，巨細(xì)胞病毒IgM、IgG，單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ-IgG檢測(cè)。結(jié)果1 759例孕婦中弓形蟲IgM、IgG，風(fēng)疹病毒IgM、IgG，巨細(xì)胞病毒IgM、IgG，單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型IgG的陽(yáng)性率分別為0.17%、1.65%、3.35%、89.9%、0.51%、96.99%和92.67%。結(jié)論CMV-IgG感染率最高，其次為HSVⅠ+Ⅱ-IgG，TOX-IgM感染率最低，且化學(xué)發(fā)光法可對(duì)孕婦血清抗體量進(jìn)行動(dòng)態(tài)定量的監(jiān)測(cè)。

關(guān)鍵詞:化學(xué)發(fā)光；孕婦；感染

TORCH是一組病原微生物英文名稱的字頭組合，TO指弓形蟲(TOX)、R指風(fēng)疹病毒(RV)、C指巨細(xì)胞病毒(CMV)、H指皰疹病毒(HSV)。這組病原體感染孕婦后常致胎兒宮內(nèi)感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、畸胎[1]，或經(jīng)產(chǎn)道和母乳感染新生兒引起多器官損害，但孕婦感染后常無(wú)癥狀或癥狀輕微，以致忽略或漏診。目前臨床檢測(cè)TORCH感染最常用的方法仍為ELISA定性試驗(yàn)，但該法操作復(fù)雜，耗時(shí)耗力，結(jié)果影響因素較多且假陽(yáng)性率高[2]。故本文采用化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測(cè)TORCH 7項(xiàng)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料2014年8月至2015年8月來(lái)本院產(chǎn)前檢查的孕婦1 759例，年齡20～42歲。所有研究對(duì)象均上午空腹抽取靜脈血2～3 mL，4 000 r/min離心10 min，取血清2 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

1.2儀器與試劑西門子IMMULITE2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒，包括TOX-IgG、IgM，風(fēng)疹病毒IgG、IgM，CMV-IgG、IgM，單純HSV-IgG、IgM試劑及試劑盒自帶的定標(biāo)液和質(zhì)控品。

1.3方法采用化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)檢測(cè)TORCH 7項(xiàng)，包括TOX-IgM、IgG,RV-IgM、IgG,CMV-IgM、IgG和HSVⅠ+Ⅱ-IgG。以聚苯乙烯珠子為固相載體包被單克隆小鼠抗IgM抗體或病原體抗原，堿性磷酸酶為發(fā)光標(biāo)記物，通過IgM抗體捕獲或抗抗體法2步反應(yīng)，光度計(jì)測(cè)定的光子輸出量與樣本中的病原體抗體量呈正比。

1.4結(jié)果判定TOX-IgG濃度大于8 IU/mL為陽(yáng)性，RV-IgG濃度大于10 IU/mL為陽(yáng)性，其余5項(xiàng)皆以大于1.1Index為陽(yáng)性。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS17.0軟件進(jìn)行，檢驗(yàn)方法采用描述性分析和χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.11 759例孕婦TORCH 7項(xiàng)感染情況由表1可知，TOX、RV、CMV 3種病原體IgM抗體的總陽(yáng)性率為4.03%，其中風(fēng)疹病毒IgM最高，為3.36%，與其他2種比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，TOX-IgM感染率最低，僅有3例(0.17%)，2周后復(fù)查，其中1例TOX-IgM轉(zhuǎn)陰、IgG 4倍升高，診斷為復(fù)發(fā)感染，1例TOX-IgM、IgG無(wú)明顯變化，為既往感染伴IgM長(zhǎng)期存在，另外1例IgM轉(zhuǎn)陰，IgG一直陰性，為假陽(yáng)性。IgG抗體共檢測(cè)了4項(xiàng)，見表2，其中CMV-IgG陽(yáng)性率最高，達(dá)96.99%，其次為單純HSV-IgG,為92.67%，陽(yáng)性率最低的是TOX-IgG，僅為1.65%。4種病原體IgG的陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1　1 759例孕婦TORCH IgM抗體檢測(cè)結(jié)果

表2　1 759例孕婦TORCH IgG抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2本地區(qū)與其他省市孕婦TORCH感染陽(yáng)性率比較由表3可以看出，各地區(qū)TORCH感染陽(yáng)性率差異較大，其中北京市和本地區(qū)均采用的化學(xué)發(fā)光法(CLIA)檢測(cè)，其他地區(qū)采用的酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)。本地區(qū)與深圳其他地區(qū)比較，化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法檢測(cè)RV-IgG和 CMV-IgG的陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，其他病原體抗體陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且ELISA 法檢測(cè)IgM的陽(yáng)性率普遍偏高。無(wú)論何種方法檢測(cè)TORCH，各地區(qū)中均表現(xiàn)出TOX的感染率相對(duì)較低，而其他幾種病原體的感染率較高。

表3　本地區(qū)與其他地區(qū)TORCH感染陽(yáng)性率比較(%)

*:表示檢測(cè)方法為化學(xué)發(fā)光法;-：表示缺少該項(xiàng)目的檢測(cè)數(shù)據(jù)。

3討論

本研究結(jié)果顯示，在孕婦的TORCH 7項(xiàng)檢查中，CMV的既往感染率最高(96.99%)，因?yàn)槿祟愂瞧涮烊凰拗鳎谌巳褐械母腥痉浅V泛，達(dá)95%以上，這也與以往的調(diào)查研究結(jié)果一致[3]，這一點(diǎn)從表3也可看出，本地區(qū)與其他省市的IgG結(jié)果無(wú)甚差別[4-8]，沈陽(yáng)地區(qū)除外，這可能與該地區(qū)人口結(jié)構(gòu)有關(guān)。本地區(qū)CMV-IgM感染有9例(0.51%)，最終有6例至今正常，2例早產(chǎn)，1例胚胎發(fā)育停止終止妊娠。在這些非正常的孕婦中，雖然CMV-IgM感染可能不是唯一絕對(duì)的原因，但應(yīng)該是導(dǎo)致不利因素的重要原因之一。這也說(shuō)明在平時(shí)的孕檢中醫(yī)生和患者應(yīng)高度重視CMV-IgM的感染，CMV-IgM陽(yáng)性的患者最好2～4周后再用化學(xué)發(fā)光法復(fù)查其IgM和IgG。若IgG有4倍及以上增高，而IgM升高、不變或降低，則應(yīng)高度懷疑為現(xiàn)癥感染。而與深圳其他地區(qū)比較，ELISA 法檢測(cè)CMV-IgM的陽(yáng)性率明顯過高，可能其中假陽(yáng)性率較高。

另外，本地區(qū)風(fēng)疹病毒的現(xiàn)癥感染率較CMV和TOX為高，也比深圳其他地區(qū)ELISA 法的檢出率為高。59例RV-IgM陽(yáng)性(3.35%)的孕婦中，有45例2～4周后復(fù)查其IgG明顯上升，說(shuō)明為現(xiàn)癥感染，有6例IgM、IgG無(wú)明顯變化為既往感染，3例在臨界左右的轉(zhuǎn)陰為假陽(yáng)性，另外5例病例丟失。如此RV-IgM的實(shí)際感染率約在2.5%左右，從表3的比較來(lái)看，該項(xiàng)目在地區(qū)和方法間的差異不大。

TOX-IgM僅3例陽(yáng)性(0.17%)，其中只有1例診斷為復(fù)發(fā)感染，電話隨訪其胎兒正常，這說(shuō)明近年來(lái)養(yǎng)寵物的家庭雖日益增多，但本地區(qū)人口對(duì)寵物或者TOX的認(rèn)知率普遍較高，孕婦自我保護(hù)意識(shí)較強(qiáng)，故其感染率極低。

本文單純HSV檢測(cè)的是Ⅰ+Ⅱ型，并未分開。因?yàn)闊o(wú)論HSV-Ⅰ型還是HSV-Ⅱ型都可產(chǎn)生生殖器部位的皰疹,都可造成新生兒產(chǎn)道感染，且臨床治療策略也不會(huì)因?yàn)榉中投兴煌琜4]。同時(shí)本文并未對(duì)HSV-IgM進(jìn)行檢測(cè)，因?yàn)镠SV-IgM不能準(zhǔn)確分辨新發(fā)感染和長(zhǎng)期感染，它在復(fù)發(fā)感染時(shí)可以出現(xiàn)陽(yáng)性，在初次感染時(shí)可能出現(xiàn)陰性，它是非病毒型特異抗體，因此HSV-IgM抗體檢測(cè)在常規(guī)臨床診斷中可用性有限，不被推薦在臨床常規(guī)使用[9]。本次HSVⅠ+Ⅱ-IgG的感染率高達(dá)92.67%，僅次于CMV-IgG，且1 759例孕婦基本都是在孕早中期做的檢測(cè)，孕早、中期發(fā)生初次感染造成胎兒感染的概率極低，但它可以為孕晚期確定初次感染還是復(fù)發(fā)感染提供治療和干預(yù)的依據(jù)[10]，故對(duì)于孕婦而言，不需進(jìn)行HSV-IgM的檢測(cè)，而是在孕早期或孕前檢測(cè)一次HSVⅠ+Ⅱ-IgG，孕晚期再?gòu)?fù)檢一次IgG，觀察兩次抗體量的變化最佳。

綜上所述,TORCH感染的血清學(xué)篩查對(duì)減少病殘兒的出生率及提高出生人口素質(zhì)，優(yōu)生優(yōu)育具有重要現(xiàn)實(shí)意義，現(xiàn)在大多數(shù)單位采用的ELISA法均為定性檢測(cè)，不能動(dòng)態(tài)觀察其抗體量的變化，很多時(shí)候不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，且該法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，檢測(cè)TORCH中TOX-IgM和CMV-IgM兩項(xiàng)的假陽(yáng)性率較高，而CLIA技術(shù)可直接對(duì)TORCH特異IgM抗體和IgG抗體進(jìn)行動(dòng)態(tài)定量檢測(cè),具有特異性強(qiáng)、可信度高、省時(shí)省力等優(yōu)點(diǎn),是一種比較可靠的篩查孕齡婦女TORCH感染狀況的檢測(cè)方法。

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(收稿日期：2016-02-03)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.057

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)09-1278-02