徐　曉　郭國領(lǐng)（1.麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠　珠?！?1900；.麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司　珠?！?1900）

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橘紅總黃酮凝膠劑的制備工藝研究

徐曉1郭國領(lǐng)2（1.麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠珠海519020；2.麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司珠海519020）

摘要：目的：研究橘紅總黃酮凝膠劑最優(yōu)制備工藝。方法：以凝膠劑的涂展性和光澤度等為指標(biāo)，通過正交實(shí)驗(yàn)法考察卡波姆940、氮酮、丙二醇、甘油的用量，優(yōu)選橘紅總黃酮凝膠劑的制備工藝。結(jié)果：橘紅總黃酮凝膠劑的最優(yōu)工藝處方為：橘紅總黃酮/卡波姆940/氮酮/丙二醇/甘油=1.3%/0.8%/2%/15%/10%。結(jié)論：經(jīng)過試驗(yàn)研究得出的制備工藝簡單、穩(wěn)定、可行，為橘紅總黃酮凝膠劑的實(shí)際生產(chǎn)提供參考。

關(guān)鍵詞：橘紅總黃酮凝膠劑正交試驗(yàn)制備工藝

橘紅，別名為蕓皮、蕓紅、川橘紅[1]，為蕓香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥外層果皮，性溫，味辛、苦，歸肺、脾經(jīng)[2]，有散寒燥濕、理氣化痰、寬中健脾之功效。橘紅含有橙皮苷、新橙皮苷等多種黃酮類化學(xué)成分[3]，黃酮類化合物（Flavonoids）是一種廣泛分布于自然界中的多酚類化合物，因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)的多樣性，此類化合物具有多種生物活性[4]，例如抗氧化[5]、降血壓[6]、降血脂[7]、抗癌[8]等，現(xiàn)代藥理研究表明，橙皮苷具有維持滲透壓等作用，可用于心血管系統(tǒng)疾病的輔助治療[9]。但有研究發(fā)現(xiàn)，黃酮類化合物有水溶性差和生物利用度較低等問題[10]。中藥凝膠劑是新發(fā)展起來的一種中藥外用制劑，它將傳統(tǒng)中藥與現(xiàn)代醫(yī)藥技術(shù)有機(jī)結(jié)合起來，具有涂展性好、無油膩感、易于清洗、透皮吸收好等特點(diǎn)[11]。將黃酮類化合物制成凝膠劑，可以改變給藥方式，也可以解決生物利用度低等問題。因此，本文以橘紅總黃酮為主藥，以卡波姆940為基質(zhì)，制備成凝膠劑，并采用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)選其制備工藝，為橘紅總黃酮凝膠劑的實(shí)際生產(chǎn)提供參考。

1　儀器與材料

1.1實(shí)驗(yàn)儀器：Sartorius LE225D型電子分析天平（蘇州賽恩斯儀器有限公司）；BUG40-12超聲波清洗器（必能信超聲（上海）有限公司）；TGL-16B型臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；Spectrum-752型紫外分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限公司）；XM70-4000型電熱恒溫水浴鍋（北京市永光明醫(yī)療儀器廠）。

1.2實(shí)驗(yàn)藥品：橘紅藥材（安國市天草藥業(yè)有限公司，經(jīng)鑒定為蕓香科植物橘的干燥外層果皮）；橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品（上海源葉生物科技有限公司）；卡波姆940（上海精誠化工有限公司）；氮酮（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；丙二醇（廣東省光華化學(xué)廠有限公司）；甘油（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；試驗(yàn)用水均為蒸餾水；其他試劑均為分析純。

2　方法及結(jié)果

2.1橘紅總黃酮的制備：參照文獻(xiàn)方法[12]。取橘紅藥材粉末（過60目篩網(wǎng)），石油醚脫脂，用60%乙醇提取，大孔樹脂純化，干燥，即得。

2.2黃芩總黃酮凝膠劑中總黃酮含量測定：以橙皮苷為標(biāo)準(zhǔn)品，采用紫外分光光度法測定。

2.2.1對(duì)照品溶液的配制：精密稱取橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品2.725g，加70%乙醇20mL溶解，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，加70%乙醇稀釋至刻度，即得濃度為54.5μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別量取6份“2.2.1”項(xiàng)下橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL置10mL比色管中，均加入70%乙醇稀釋至刻度，測定278nm處吸光度。以濃度（C）為縱坐標(biāo)，吸光度（A）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y= 10.843X－0.716，r=0.9993，線性范圍為1.09～6.54μg/mL。

2.2.3總黃酮的測定方法：取一定量的供試品，將其搗碎，用70%乙醇溶液提取，測定278nm處所得溶液的吸光度。根據(jù)“2.2.2”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中總黃酮的濃度C?？傸S酮含量（mg/g）計(jì)算公式：

總黃酮含量（mg/g）=[（C×V）/（1000·m）]

式中：C為一定取樣量下所得總黃酮的濃度（mg/mL），V為70%乙醇的用量（mL），m為樣品取樣量（g）。

2.3橘紅總黃酮凝膠劑的制備：稱取0.6g卡波姆940撒于25mL蒸餾水中，輕微攪拌，放置過夜，得Ⅰ相；稱取丙二醇12g、甘油8g，磁力攪拌器攪拌條件下加入Ⅰ相，得Ⅱ相；精密稱取“2.1”項(xiàng)下所得橘紅總黃酮1.3g，溶于25mL蒸餾水中，加入Ⅱ相，攪拌均勻，得Ⅲ相；稱取1.5g氮酮加入Ⅲ相，攪拌均勻，用適量三乙醇胺調(diào)pH值為6～7，加蒸餾水至100g，充分?jǐn)噭?，脫氣泡，裝入避光容器，存放于陰涼處。

2.4評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：按照以下評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)凝膠劑做出綜合評(píng)分，滿分10分，詳見表1。

表1　橘紅總黃酮凝膠劑的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Scoring criteria of the Red Tangerine Peel total flavones gel

備注：1.均勻度考察：取6個(gè)不同部位凝膠劑各5g，考察樣品中總黃酮含量差異，最大值與最小值間差異越小越均勻；

2.濕度穩(wěn)定性考察：取樣品5g，密封于玻璃瓶中，濕度為75%，恒溫25℃條件下放置10d，每隔2d測定樣品中總黃酮含量，總黃酮含量最大值與最小值間差異越小溫度穩(wěn)定性越好。

3.熱穩(wěn)定性考察：取樣品5g，密封于玻璃瓶中，恒溫50℃條件下放置10d，每隔2d測定樣品中總黃酮含量，總黃酮含量最大值與最小值間差異越小熱穩(wěn)定性越好。

2.5正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化橘紅總黃酮凝膠劑制備工藝：根據(jù)“2.2”項(xiàng)設(shè)定的制備工藝分析可知，卡波姆940、氮酮、丙二醇、甘油等四種物質(zhì)的用量對(duì)橘紅總黃酮凝膠劑的質(zhì)量評(píng)分會(huì)有一定的影響，為得到最佳制備工藝，選用正交實(shí)驗(yàn)法同時(shí)考察上述四個(gè)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，正交實(shí)驗(yàn)水平與因素設(shè)計(jì)見表2所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

表2　正交實(shí)驗(yàn)水平與因素設(shè)計(jì)Table 2 Factors and levels of the orthogonal test

由表3的極差分析可知，各考察因素對(duì)橘紅總黃酮凝膠劑綜合評(píng)分的影響程度不同，按由大到小的次序排列為：A＞C＞B＞D，即卡波姆940的用量＞甘油的用量＞丙二醇的用量＞氮酮的用量。最佳的制備工藝為A2C2B3D2，即卡波姆940的用量為0.8g，丙二醇的用量為15g，甘油的用量為10g，氮酮的用量為2g。

表3　正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析Table 3 Results and analysis of the orthogonal test

對(duì)正交實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表4。四個(gè)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果卡波姆940的用量影響具有顯著性，其他均無顯著性，這與極差分析的結(jié)果相同。

表4　正交實(shí)驗(yàn)方差分析結(jié)果Table 4 Results of the squared analysis of the orthogonal test

2.6最佳制備工藝的驗(yàn)證：按“2.2”項(xiàng)方法，平行制備3份凝膠，加入卡波姆940的量為0.8g，丙二醇的量為15g，甘油的量為10g，氮酮的用量2g，靜置觀察并按“2.3”項(xiàng)對(duì)所得凝膠劑進(jìn)行評(píng)分，綜合評(píng)分結(jié)果分別為9.4、9.7、9.4，平均為9.5，RSD%= 1.82%，表明該制備工藝條件得出的橘紅總黃酮凝膠劑質(zhì)量最好且工藝穩(wěn)定。

3　討論

卡波姆是一種在凝膠劑制備過程中比較常用的基質(zhì)，具有對(duì)黏膜無刺激、皮膚耦合效果好、制備方法簡單、透皮性好、治療效果好等優(yōu)點(diǎn)[13]。本文選擇橘紅總黃酮為主藥，卡波姆940為基質(zhì)，制備一種黃酮類化合物的凝膠劑。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，作為基質(zhì)的卡波姆940對(duì)凝膠劑的質(zhì)量綜合評(píng)分影響較大，用量過多和過少都會(huì)影響凝膠劑的成型性，為此在該凝膠劑的制備過程中應(yīng)當(dāng)以此為考慮的重點(diǎn)。另外，還發(fā)現(xiàn)卡波姆940與橘紅總黃酮有一定的相容性，能形成比較光滑、均勻的凝膠。

本文對(duì)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出的最佳制備工藝進(jìn)行了驗(yàn)證，驗(yàn)證結(jié)果顯示該工藝條件合理、穩(wěn)定。本文研究內(nèi)容為橘紅總黃酮凝膠劑的工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。

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·綜述·

Study on the preparation process of the Red Tangerine Peel total flavones Gel

Xu Xiao1Guo Guoling2（1.Livzon（Group）Pharmaceutical Factory，Guangdong Zhuhai 519020，China；2.Livzon Pharmaceutical Group Co.，Ltd.，Guangdong Zhuhai 519020，China）

Abstract：Objective：To study and optimize the preparation process of the Red Tangerine Peel total flavones Gel. Methods：Taking the gel spread stretchability and glossiness as investigation indexes，the amount of carbomer-940，azone，propylene glycol，glycerine was chosen as investigating factors by orthogonal test to optimize the preparation process of the Red Tangerine Peel total flavones Gel. Results：The optimum preparation process were as follows：the total flavones/carbomer-940/azone/propylene glycol/glycerine = 1.3%/ 0.8%/2%/15%/10%. Conclusion：The optimum preparation process selected by orthogonal test was stable and simple，which provide the reference for the production of the Red Tangerine Peel total flavones Gel.

Key words：Red Tangerine Peel total flavones Gel Orthogonal test Preparation process

中圖分類號(hào)：R283.6

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1672-8351（2016）04-0103-02