蔣銳
金黃色葡萄球菌廣泛存在于我們生活的每一個(gè)角落,可以通過人類的手或空氣對(duì)食物造成污染,然后通過口腔、腸道等引起人類和動(dòng)物化膿性感染,危及人類和動(dòng)物的生命健康。近幾年,我國(guó)由于金黃色葡萄球菌引起的事物中毒事件正在逐漸增多,對(duì)食品中金黃色葡萄球菌的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)工作迫在眉睫,實(shí)驗(yàn)人員更是要注重通過不同檢測(cè)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的對(duì)比分析,從而增加食品中金黃色葡萄球菌定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
材料與方法
實(shí)驗(yàn)的材料是由筆者自行購(gòu)買得到,材料的選擇具有隨機(jī)性,實(shí)驗(yàn)方法是Baird-Parker平板計(jì)數(shù)法以及MPN 計(jì)數(shù)法,然后對(duì)這兩種方法得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。
材料。實(shí)驗(yàn)的材料分別面包25份、魚丸18份、蜜餞20份、盒飯15份。
樣品稀釋。對(duì)于實(shí)驗(yàn)材料中的固體或者是半固體,可以稱取25克放置在225毫升的磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌杯中,通過拍打器均勻的拍打一到兩分鐘的時(shí)間,制成1:10的樣品。對(duì)于液體類的樣品,可以通過無(wú)菌吸管獲得25毫升的樣品,放在225毫升的磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無(wú)菌瓶中,通過搖晃使其均勻,制成1:10的樣品。
檢測(cè)方法。(1)采用無(wú)菌的吸管吸取1毫升的樣品接種在Baird一Parker平板,保證樣品勻液均勻置于平板上,在37℃的環(huán)境中培養(yǎng)48小時(shí),觀察菌落的分布特征和生長(zhǎng)情況,挑取10個(gè)典型的菌落進(jìn)行革蘭氏染色及血漿凝固酶驗(yàn)證,計(jì)算實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(2)吸取1毫升樣品勻液接種于含有10毫升10%氯化鈉胰酪陳大豆肉湯管中,可以接種3管,將這3管接種物放在37℃的環(huán)境中培養(yǎng)48小時(shí),再取一些培養(yǎng)物放在Baird一Parker平板,在37℃的環(huán)境中培養(yǎng)48小時(shí),觀察菌落特征以及他們的生長(zhǎng)情況,從每塊平板上挑選2到3個(gè)典型菌落進(jìn)行革蘭氏染色及血漿凝固酶驗(yàn)證,并查MPN檢索表。
計(jì)算結(jié)果。檢測(cè)食品中金黃色葡萄球菌陽(yáng)性結(jié)果計(jì)算公式:T = St- Sck,其中T是實(shí)驗(yàn)樣品中金黃色葡萄球菌數(shù)CFU/g或者每g(ml)樣品中金黃色葡萄球菌的最大可能數(shù)MPN/g(ml),St是指金黃色葡萄球菌回歸不同實(shí)驗(yàn)樣品后的金黃色葡萄球菌數(shù)CFU /g或每g (ml)樣品中金黃色葡萄球菌的最大可能數(shù)MPN/g (ml),Sck是指不同實(shí)驗(yàn)樣品金黃色葡萄球菌數(shù)CFU/g或每g(ml)樣品中金黃色葡萄球菌的最大可能數(shù)MPN/g2(ml)。
結(jié)果
通過以上介紹的方法,對(duì)25份面包、18份魚丸、20份蜜餞以及15份盒飯進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探究,將實(shí)驗(yàn)樣品進(jìn)行分組對(duì)照分析,采用Baird一Parker平板計(jì)數(shù)法檢測(cè),定量陽(yáng)性結(jié)果為30 CFU /g,采用MPN計(jì)數(shù)法檢測(cè),定量陽(yáng)性結(jié)果為23 MPN /g,得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。
從上表的結(jié)果中可以看出,通過Baird一Parker平板計(jì)數(shù)法檢測(cè)得到的陽(yáng)性率為8.9%,通過MPN計(jì)數(shù)法檢測(cè)得到的陽(yáng)性率為23.1%。對(duì)這兩種檢測(cè)方法進(jìn)行總結(jié),結(jié)果如下表所示:
通過上面兩個(gè)表格的對(duì)比,可以看出MPN計(jì)數(shù)法檢測(cè)出來(lái)的陽(yáng)性率明顯高于Baird一Parker平板計(jì)數(shù)法得到的陽(yáng)性率。由此可見,不同的方法檢測(cè)得到的結(jié)果差異性還是比較大的,所以在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)候要采用多種檢測(cè)方法對(duì)食品中的金黃色葡萄球菌含量進(jìn)行綜合評(píng)估。
結(jié)論
Baird一Parker平板計(jì)數(shù)法由于采用沒有經(jīng)過增菌的稀釋液直接接種平板,對(duì)金黃色葡萄球檢出率比較低,再加上食品中還含有其他種類的細(xì)菌,抑制了金黃色葡萄球菌的正常生長(zhǎng),因此在實(shí)驗(yàn)結(jié)果中,可以看到陽(yáng)性檢出率符合國(guó)內(nèi)的食品安全標(biāo)準(zhǔn),但是這并不代表食品中的金黃色葡萄球菌的含量就是符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)的。這種方式一般比較適用于金黃色葡萄球菌含量比較大的食品,對(duì)含量低的食品檢測(cè)不能達(dá)到實(shí)驗(yàn)的效果。
通過MPN計(jì)數(shù)法檢測(cè)出來(lái)的結(jié)果,陽(yáng)性率比較高,但是最終也不能達(dá)到100%的效果,說明食品本身的物理性質(zhì)和狀態(tài)結(jié)構(gòu)都對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生一定程度的影響,因此,在今后的食品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)該注重多種檢測(cè)方法的結(jié)合比較分析,通過不同實(shí)驗(yàn)方法得到更加準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
筆者在實(shí)驗(yàn)材料收集的時(shí)候,特別注重區(qū)域分布的問題,有些食品來(lái)自規(guī)模比較小的生產(chǎn)作坊,衛(wèi)生環(huán)境比較差,檢測(cè)出食品中金黃色葡萄球菌的陽(yáng)性率比較高,相對(duì)大型的生產(chǎn)地,衛(wèi)生條件比較好,生產(chǎn)流程比較清晰,食品中的金黃色葡萄球菌的含量就比較低。另外食品的生產(chǎn)日期也是重要的考慮因素,在后期的實(shí)驗(yàn)中,筆者發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)時(shí)間長(zhǎng)的食品中金黃色葡萄球菌含量明顯多于短期內(nèi)生產(chǎn)的食品,因此,人們?cè)谫?gòu)買食品的時(shí)候一定要注意食品的生產(chǎn)時(shí)間,過期或者快要過期的食品不要食用。
食品安全問題一直是人們生活中最重要的事情之一,它直接影響了人類的生活質(zhì)量,關(guān)系到人類的身體健康,因此,檢測(cè)部門要嚴(yán)格按照國(guó)家食品安全條例對(duì)市場(chǎng)上的食品進(jìn)行嚴(yán)格的控制,為人類的健康發(fā)展提供安全的生活環(huán)境。對(duì)食品中金黃色葡萄球菌的檢測(cè)一定要采用多種檢測(cè)方法,從對(duì)比分析結(jié)果中確定食品安全系數(shù)。
(作者單位:長(zhǎng)樂市產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)所)