衛(wèi)　笑， 楊義芳， 趙正保*

(1. 山西醫(yī)科大學 藥學院，山西 太原　030001; 2. 上海醫(yī)藥工業(yè)研究院，上海　200040)

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·研究論文·

新型漢防己甲素衍生物的合成及其生物活性

衛(wèi)笑1， 楊義芳2， 趙正保1*

(1. 山西醫(yī)科大學 藥學院，山西 太原030001; 2. 上海醫(yī)藥工業(yè)研究院，上海200040)

摘要：以漢防己甲素為原料，經(jīng)溴代反應制得關(guān)鍵中間體5-溴漢防己甲素(2)； 2與硼酸衍生物經(jīng)Suzuki反應合成了6個新型的漢防己甲素衍生物(4a～4f)，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR, (13)C NMR和ESI-MS表征。采用CCK-8法初步考察了4a～4f對人早幼粒白血病細胞(HL60)和人肺癌細胞(A549)的抑制活性；并采用MTT法對活性較好的化合物進行復篩。采用酶聯(lián)免疫吸附法考察4a～4f對多種受體酪氨酸激酶的抑制活性。結(jié)果表明：4b, 4c和4e對HL60和A549有一定的抑制活性;4b和4c對受體酪氨酸激酶FGFR1的抑制活性大于50%。

關(guān)鍵詞：漢防己甲素； 合成； 生物活性； 受體酪氨酸激酶

漢防己甲素(1, Tetrandrine )是從防己科植物防己根中提取的雙芐基異喹啉類生物堿之一，其藥理作用非常廣泛，近年來其抗腫瘤方面的作用備受關(guān)注[1-4]。以1為先導化合物，對其結(jié)構(gòu)進行修飾，有望合成出生物活性更好的雙芐基異喹啉類衍生物。

蛋白質(zhì)酪氨酸激酶(PTKs )家族在細胞生長、增殖、分化中具有重要作用。正常情況下, 由酪氨酸激酶和酪氨酸磷酸酶拮抗調(diào)節(jié)以維持平衡。但是，基因突變、基因融合等病理機制均會導致PTKs的持續(xù)活化，使細胞調(diào)節(jié)功能異常，誘發(fā)腫瘤[5]。通過阻斷酪氨酸激酶破壞腫瘤細胞的信號傳遞, 從而達到治療腫瘤的目的，是目前抗腫瘤藥物的一個研究熱點[6-7]。

Scheme 1

本文以1為原料，經(jīng)溴代反應制得關(guān)鍵中間體5-溴漢防己甲素(2)； 2與硼酸衍生物經(jīng)Suzuki反應合成了6個新型的漢防己甲素衍生物(4a～4f， Scheme 1)，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR,13C NMR和ESI-MS表征。并采用CCK-8法和MTT法對4a～4f的體外生物活性進行篩選；采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)考察了4a～4f對多種蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的抑制作用[8-11]。

1實驗部分

1.1儀器與試劑

ZF-I型三用紫外分析儀；AVANCE 600 MHz型和AV-III 400 MHz型超導核磁共振儀(CDCl3為溶劑，TMS為內(nèi)標)；Agilent 1100SL型離子阱質(zhì)譜儀；Molecular Device SpectraMax 190型酶標儀；SMART CELL-CO2型培養(yǎng)箱；SW-CJ-2F型超凈工作臺。

人肺癌細胞株(A549)，人早幼粒白血病細胞株(HL60)， Sigma公司；DMEM/High Glucose培養(yǎng)基，HyClone公司；0.25%胰蛋白酶溶液，Invitrogen公司；蛋白酪氨酸激酶(PTKs)，上海藥物研究所；其余所用試劑均為分析純。

1.2合成

(1) 2的合成

在單頸瓶中依次加入1 3 g(5 mol)，三氟乙酸20 mL和水10 mL，攪拌使其溶解；緩慢注入1.2 mol·L-1溴的乙酸(5 mL)溶液，于冰鹽浴中反應4.5 h。加冰水50 mL淬滅反應,用氨水調(diào)至堿性后用二氯甲烷(2×200 mL)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥;減壓蒸除部分溶劑，剩余物用乙醚重結(jié)晶，再經(jīng)硅膠柱層析[洗脫劑：V(甲醇) ∶V(乙酸乙酯)=7 ∶3]純化得白色無定型粉末2 3.1 g,收率94%, m.p.142.3～144.1 ℃;1H NMRδ： 7.34(dd,J=8.2 Hz, 2.1 Hz, 1H), 7.14(dd,J=8.1 Hz, 2.5 Hz, 1H), 6.86(s, 2H), 6.79(dd,J=8.3 Hz, 2.5 Hz, 1H), 6.53(s, 1H), 6.52(s, 1H), 6.30(dd,J=8.3 Hz, 2.1 Hz, 1H), 6.02(s, 1H), 3.93(s, 3H), 3.79(d,J=10.1 Hz, 1H), 3.74(s, 3H), 3.55～3.40(m, 3H), 3.37(s, 3H), 3.26(dd,J=12.5 Hz, 5.6 Hz, 1H), 3.22(s, 3H), 2.98(m, 2H), 2.89(m, 1H), 2.82～2.67(m, 5H), 2.64(s, 3H), 2.49(d,J=8.4 Hz, 1H), 2.29(s, 3H);13C NMRδ： 153.77, 149.37, 148.75, 148.25, 147.85, 147.13, 143.33, 142.83, 135.11, 134.41, 132.65, 130.12, 128.31, 128.26, 128.12, 127.88, 122.83, 121.99, 121.94, 120.34, 116.19, 112.64, 112.22, 111.52, 63.75, 61.59, 60.48, 60.38, 56.12, 55.47, 45.18, 43.69, 42.65, 42.12, 41.44, 37.80, 25.41, 22.69; ESI-MSm/z: 701.47, 703.34{[M+H]+}。

(2) 4a～4f的合成(以4a為例)

在三頸燒瓶中依次加入2 70 mg(0.1 mmol)，甲苯20 mL和水5 mL，攪拌使其溶解；加入1 mol·L-1AcOK 5 mL,于20 ℃超聲脫氣20 min。抽真空充氮氣多次，加入Pd(dppf)Cl222 mg和 4-聯(lián)苯基苯硼酸(3a)61.6 mg(0.2 mmol)，氮氣保護下回流(90 ℃)反應8 h。冷卻至室溫，加蒸餾水5 mL淬滅反應。過濾，濾液中加入乙酸乙酯30 mL，用飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑后經(jīng)薄層層析[展開劑:V(二氯甲烷) ∶V(甲醇) ∶V(乙酸乙酯) ∶V(石油醚)=15 ∶1 ∶1 ∶1]純化得5-(4-聯(lián)苯基)漢防己甲素(4a)。

用類似方法合成4b～4f。

4a: 白色粉末，收率42%， m.p.233.5～234.9 ℃;1H NMRδ： 7.65(d,J= 7.4 Hz, 5H), 7.49～7.34(m, 6H), 7.18～7.15(m, 1H), 6.91(d,J=8.1 Hz, 1H), 6.85(d,J=6.4 Hz, 1H), 6.61(s, 1H), 6.57(s, 1H), 6.35(d,J=7.0 Hz, 1H), 6.08(s, 1H), 3.94(s, 3H), 3.68～3.51(m, 4H), 3.49(s, 3H), 3.48(s, 3H), 3.26(s, 3H), 3.15～2.88(m, 7H), 2.78(s, 3H), 2.62(s, 3H), 2.45(s, 3H);13C NMRδ： 153.99, 149.51, 149.00, 147.61, 147.22, 143.95, 142.14, 140.78, 139.90, 135.21, 133.87, 132.59, 130.43, 130.39, 129.59, 128.81, 128.81, 127.38, 127.35, 127.08, 127.08, 127.01, 126.99, 126.97, 126.94, 126.92, 126.90, 126.87, 126.86, 123.45, 122.19, 122.14, 120.49, 115.65, 112.47, 111.73, 63.93, 60.84, 60.28, 56.11, 55.74, 44.90, 43.26, 41.97, 38.16, 37.10, 31.94, 30.05, 29.71, 22.70; ESI-MSm/z: 775.7{[M+H]+}。

4b: 灰色粉末，收率55.4%， m.p.147.6～148.3 ℃;1H NMRδ: 7.42(d,J=8.2 Hz, 1H), 7.16(d,J=8.3 Hz, 1H), 6.92(d,J=8.1 Hz, 2H), 6.86(dd,J=8.2 Hz, 2.4 Hz, 1H), 6.74(dd,J=49.7 Hz, 17.9 Hz, 3H), 6.61(s, 1H), 6.55(s, 1H), 6.35(d,J=8.0 Hz, 1H), 6.08(s, 1H), 3.94(s, 3H), 3.93(s, 3H), 3.89(s, 3H), 3.64(d,J=61.0 Hz, 3H), 3.50(m, 4H), 3.46(s, 3H), 3.24(s, 3H), 3.20～3.07(m, 4H), 2.98(dd,J=16.6 Hz, 5.7 Hz, 1H), 2.89～2.81(m, 3H), 2.79(s, 3H), 2.64(m, 2H), 2.47(s, 3H);13C NMRδ: 154.00, 150.14, 149.55, 149.20, 148.78, 148.6, 148.22, 147.78, 143.92, 142.20, 132.56, 130.94, 130.51, 129.80, 128.84, 128.42, 128.22, 128.15, 127.72, 126.71, 123.66, 122.26, 122.20, 120.50, 115.41, 113.25, 113.17, 112.38, 111.77, 110.92, 65.59, 63.79, 60.81, 60.34, 56.09, 56.06, 56.04, 56.02, 55.89, 55.87, 55.77, 44.64, 41.59, 38.16, 29.71, 22.70; ESI-MSm/z: 759.7{[M+H]+}。

4c: 淡黃色粉末，收率59.5%， m.p.184.4～186.3 ℃;1H NMRδ： 7.36(dd,J=8.2 Hz, 1.3 Hz, 1H), 7.33～7.27(m, 1H), 7.15(dd,J=8.1 Hz, 2.1 Hz, 1H), 6.84(m, 5H), 6.72～6.66(m, 1H), 6.58(s, 1H), 6.55(s, 1H), 6.35～6.31(m, 1H), 6.05(s, 1H), 4.57(m, 1H), 3.93(s, 3H), 3.91(d,J= 5.6 Hz, 1H), 3.86(d,J=5.8 Hz, 1H), 3.47(s, 3H), 3.46～3.42(m, 1H), 3.41(s, 3H), 3.38(d,J=7.4 Hz, 1H), 3.30～3.26(m, 1H), 3.24(s, 3H), 3.03～2.96(m, 1H), 2.93～2.88(m, 1H), 2.84～2.73(m, 4H), 2.65(s, 3H), 2.55(dd,J=60.5 Hz, 27.5 Hz, 3H), 2.30(s, 3H), 1.34(d,J=5.9 Hz, 6H);13C NMRδ： 157.69, 154.22, 150.27, 149.57, 149.54, 148.08, 146.62, 144.07, 142.35, 136.85, 132.59, 132.43, 130.64, 129.42, 129.31, 128.08, 125.93, 124.06, 123.26, 122.38, 122.25, 121.93, 120.56, 118.10, 117.33, 115.21, 115.03, 114.03, 112.34, 111.93, 69.86, 63.94, 60.85, 60.85, 60.36, 56.07, 56.07, 55.76, 44.64, 43.76, 41.23, 38.41, 29.68, 23.23, 22.12, 22.06, 22.03; ESI-MSm/z: 757.7{[M+H]+}。

4d: 灰色粉末，收率60.7%， m.p.122.3～123.6 ℃;1H NMRδ： 7.40～7.34 (m, 3H), 7.22～7.18(m, 1H), 7.16(dd,J=7.9 Hz, 2.0 Hz, 2H), 7.12(t,J=7.2 Hz, 2H), 7.06(dd,J=15.6 Hz, 7.9 Hz, 4H), 6.87(d,J=7.8 Hz, 1H), 6.83(dd,J=8.1 Hz, 1.8 Hz, 1H), 6.57(s, 2H), 6.34(d,J=7.9 Hz, 1H), 6.06(s, 1H), 3.93(s, 3H), 3.54(d,J=12.9 Hz, 1H), 3.46(s, 3H), 3.44(s, 3H), 3.40(dd,J=11.7 Hz, 6.4 Hz, 3H), 3.24(s, 3H), 3.04(dd,J=19.2 Hz, 8.3 Hz, 3H), 2.88～2.78(m, 6H), 2.70(s, 3H), 2.65(d,J=14.1 Hz, 1H), 2.35(s, 3H);13C NMRδ： 156.02, 155.24, 152.88, 148.48, 148.41, 147.77, 146.36, 146.30, 142.89, 140.86, 133.27, 132.90, 131.56, 131.28, 130.35, 130.24, 129.90, 129.32, 128.75, 128.75,128.13, 127.82, 126.17, 125.99, 125.78, 124.30, 122.35, 122.08, 121.07, 119.41, 118.06, 118.06,117.35, 114.85, 111.50, 110.54, 64.56, 62.60, 59.73, 59.18, 55.09, 54.66, 43.62, 41.81, 40.92, 40.85, 36.98, 29.54, 23.50, 20.80; ESI-MSm/z: 791.7{[M+H]+}。

4e: 灰色粉末，收率63.6%， m.p.164.7～166.1 ℃;1H NMRδ： 7.38(s, 1H), 7.17(m, 5H), 6.84(dd,J=23.1 Hz, 7.8 Hz, 3H), 6.57(d,J=3.5 Hz, 2H), 6.33(d,J=6.7 Hz, 1H), 6.06(s, 1H), 3.92(s, 3H), 3.51(m, 1H), 3.49(s, 3H), 3.43(s, 6H), 3.40～3.32(m, 2H), 3.24(s, 3H), 3.01(s, 3H), 2.82(m, 4H), 2.70(s, 3H), 2.67～2.57(m, 2H), 2.51(d,J=7.1 Hz, 2H), 2.34(s, 3H), 0.94(d,J=6.6 Hz, 6H);13C NMRδ： 154.10, 149.56, 149.28, 147.92, 146.71, 144.00, 142.29, 140.81, 132.58, 130.64, 130.23, 129.65, 129.55, 129.52, 129.49, 129.13, 129.10, 129.06, 129.03, 128.98, 126.37, 123.85, 123.79, 122.31, 122.17, 122.17, 120.55, 115.34, 112.37, 111.87, 60.76, 60.38, 56.08, 55.73, 45.22, 44.86, 43.59, 41.69, 37.42, 37.09, 32.75, 31.92, 30.24, 30.04, 29.71, 22.71, 22.44, 22.44; ESI-MSm/z: 755.7{[M+H]+}。

4f: 淡黃色粉末，收率48%， m.p.172.1～174 ℃;1H NMRδ： 7.71(s, 1H), 7.53(s, 1H), 7.36(d,J=42.3 Hz, 2H), 7.16(s, 1H), 6.86(d,J=33.4 Hz, 3H), 6.73(d,J=14.0 Hz, 1H), 6.57(d,J=15.2 Hz, 2H), 6.34(s, 1H), 6.07(s, 1H), 4.08(m, 2H), 3.93(s, 3H), 3.83(s, 3H), 3.62(m, 1H), 3.46(s, 6H), 3.42～3.36(m, 1H), 3.25(s, 3H), 3.12～2.80(m, 7H), 2.76(s, 3H), 2.73～2.67(m, 1H), 2.56(m, 2H), 2.42(s, 3H);13C NMRδ： 159.39, 154.06, 149.77, 149.51, 149.12, 147.72, 147.08, 143.97, 142.13, 133.48, 132.58, 132.31, 130.93, 130.47, 130.30, 129.36, 129.20, 128.85, 127.66, 127.53, 126.67, 126.64, 126.34, 123.59, 122.23, 122.16, 120.49, 115.57, 112.43, 111.76, 65.59, 63.90, 60.88, 60.27, 56.10, 55.71, 55.27, 44.74, 43.28, 41.71, 31.93, 30.57, 29.71, 29.37, 22.70; ESI-MSm/z: 729.6{[M+H]+}。

1.3生物活性測定

(1) 細胞培養(yǎng)

將HL60和A549細胞接種于含10%胎牛血清，100 U·mL-1青霉素和100 μg·mL-1鏈霉素的1640培養(yǎng)液中，于37 ℃在5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。實驗細胞采用對數(shù)生長期細胞。

(2) CCK-8法活性初篩

選用對數(shù)生長期的貼壁腫瘤細胞，用0.25%胰蛋白酶消化制成單細胞懸液后，將細胞密度調(diào)整為5．0×104個/mL，每孔接種細胞懸液100 μL，共96孔，于37 ℃在飽和濕度下含5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12 h。每孔加入不同濃度的藥物，每組3個復孔，對照組加入相同體積培養(yǎng)基，陽性藥物為1，于37 ℃在飽和濕度下含5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h。終止培養(yǎng)前1 h，每孔加入10 μL CCK-8溶液，混勻，在細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)孵育1 h。于490 nm波長處檢測各孔的OD 值，計算細胞存活率(細胞存活率/%=D實驗組/D對照組×100%，對照組存活率記為100%)。

(3) MTT法活性復篩

選取濃度為10 μmol·mL-1時對兩種腫瘤細胞的抑制率大于50%的化合物，采用MTT法進行復篩。準備方法同1.3(2)。每孔中加入5 mg·mL-1MTT 20 μL，在培養(yǎng)箱中保溫3～4 h。每孔加入100 μL 溶解液，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中保溫過夜，使生成的甲臢晶體充分溶解。測定570 nm處吸收值D。通過軟件計算樣品對各腫瘤細胞的IC50。

(4) 對PTK的抑制活性的測定

采用ELISA法，用無K+的PBS酶稀釋反應底物Poly(Glu,Tyr)4 ∶1至20 μg·mL-1， 125 μL/孔包被酶標板，置37 ℃反應12～16 h。棄去孔中液體，用T-PBS(含0.1%Tween-20的無K+的PBS， 200 μL/孔)洗板3次，每次5 min。于37 ℃干燥酶標板1～2 h。每孔加入經(jīng)反應緩沖液(50 mmol·mL-1HEPES pH 7.4, 50 mmol·mL-1MgCl2, 0.5 mmol·mL-1MnCl2, 0.2 mmol·mL-1Na3VO4, 1 mmol·mL-1DTT) 稀釋的ATP溶液49 μL，每孔中加入1 μL待測化合物，再加入50 μL用反應緩沖液稀釋的c-Met, ALK, FGFR1, RET, EGFR, ErbB2激酶域重組蛋白啟動反應，每次實驗需設(shè)無ATP對照孔兩孔。置37 ℃搖床(100 r·min-1)反應1 h。棄去孔中液體，用T-PBS洗板3次。加入抗體PY99稀釋液(抗體用含BSA 5 mg·mL-1T-PBS 1∶500稀釋)，100 μL/孔，于37 ℃搖床反應0.5 h。棄去孔中液體，T-PBS洗板3次。加入辣根過氧化物酶標記的羊抗鼠二抗稀釋液(抗體用含BSA 5 mg·mL-1的T-PBS 1 ∶2 000稀釋)，100μL/孔，于37 ℃搖床反應0.5 h。棄去孔中液體，T-PBS洗板3次。加入2 mg·mL-1的OPD顯色液100μL/孔[用含有0.03%H2O2的0.1 mmol·mL-1檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液(pH 5.4)稀釋]，于25 ℃避光反應1～10 min。加入2 mol·mL-1H2SO450 μL/孔中止反應，用酶標儀讀數(shù)，測定波長為490 nm處樣品的OD值。采用酶標儀隨機附帶軟件以四參數(shù)法回歸求得IC50。抑制率/%=1-(OD化合物-OD無對照孔)/(OD陰性對照-OD無ATP對照)×100%。

2結(jié)果與討論

2.1合成

鈀催化的Suzuki反應是構(gòu)建C-C鍵化合物的重要反應，其具有底物范圍廣、反應條件溫和以及良好的區(qū)域選擇性等優(yōu)點。借助Suzuki反應，科學家們?nèi)斯ず铣闪怂６舅匾约熬弁愄烊划a(chǎn)物似蛇霉素[13]。本文先將1的5-位選擇性的溴代，再采用Suzuki反應合成了6個新型的漢防己甲素衍生物(4a～4f)。其中，2的合成是本實驗的關(guān)鍵步驟。當溴的滴加速度過快時，由于反應過程放熱，使體系的溫度超過-15 ℃，產(chǎn)生較多雜質(zhì)。通過調(diào)整溴的滴加速度，保持反應溫度低于-15 ℃，雜質(zhì)減少，產(chǎn)率達94%，適合大量制備。Suzuki反應要求嚴格除氧，氧氣的存在會使產(chǎn)率降低，反應全過程在氮氣氛下進行。后處理采用了制備薄層色譜法。由于4和2的極性相近，在實驗過程中，進行了二次展開，使得4與未反應完的2的Rf值相差較大，得以分離。

2.2生物活性

4a～4f對HL60細胞和A549細胞的抑制活性見表1。由表1可見，4b, 4c和4e有一定的抑制活性。

4a～4f對蛋白質(zhì)酪氨酸激酶的抑制活性見表2。由表2可見， 4b和4c對受體酪氨酸激酶FGFR1的抑制活性大于50%，且活性較漢防己甲素有一定程度提高。

綜上所述，4b和4c不僅對HL60和A549細胞有一定抑制活性且對酪氨酸激酶FGFR1的選擇性較高?？梢詫ζ淅^續(xù)進行結(jié)構(gòu)修飾，以期發(fā)現(xiàn)活性更好的化合物。

表1　4a～4f對HL60細胞和A549細胞的抑制活性

表2　4a～4f對PTKs的抑制率

3結(jié)論

合成了6個新型的漢防己甲素衍生物。初步抗腫瘤活性表明:4b, 4c和4e對HL60細胞和A549細胞有一定抑制活性。其中，4b和4c對受體酪氨酸激酶FGFR1的抑制活性較強，可作為潛在藥物進一步修飾。

在本文的研究基礎(chǔ)上，其他同系列化合物的抗腫瘤活性、構(gòu)效關(guān)系、作用機制等的研究正在進行中，以期獲得更多有效的抗腫瘤藥物。

參考文獻

[1]Cai X H, Wang S, Chen B A. Research advances on the pharmacological effects of tetrandrine[J].Chinese Journal of Natural Medicines,2011,9(6):473-480.

[2]Wu J M, Chen Y, Chen J C,etal. Tetrandrine induces apoptosis and growth suppression of colon cancer cells in mice[J].Cancer Letters,2010,287(2):187-195.

[3]Kuo P L, Lin C C. Tetrandrine-induced cell cycle arrest and apoptosis in Hep G2 cells[J].Life Sciences,2003,73(2):243-252.

[4]Xu W L, Shen H L, Ao Z F,etal. Combination of tetrandrine as a potential-reversing agent with daunorubicin,etoposide and cytarabine for the treatment of refractory and relapsed acute myelogenous leukemia[J].Leukemia Research,2006,30(4):407-413.

[5]唐海濤,陳國廣,方正,等. 多靶點受體酪氨酸激酶抑制劑的研究進展[J].中國新藥雜志,2009,18(6):502-506.

[6]郭建軍,朱晶,趙永躍,等. 不可逆性酪氨酸激酶抑制劑的研究進展[J].中國藥理學通報,2015,31(6):749-754.

[7]張媛,程雨蘭,周金培,等. 以c-Met為腫瘤治療靶點的受體酪氨酸激酶抑制劑的研究進展[J].中國藥科大學學報,2015,46(1):16-27.

[8]Wiriyachitra P, Cava M P. Aromatic hydroxylation of some isoquinoline-type alkaloids[J].The Journal of Organic Chemistry,1977,42(13):2274-2277.

[9]Miyaura N, Yamada K, Suzuki A. A new stereospecific cross-coupling by the palladium-catalyzed reaction of 1-alkenylboranes with 1-alkenyl or 1-alkynyl halides[J].Tetrahedron Letters,1979,20(36):3437-3440.

[10]朱銘,楊超,余章彪,等. 芝麻酚與3-羥基氧化吲哚拼接衍生物的合成及其抗腫瘤活性[J].合成化學,2014,22(4):444-447.

[11]樊睿,班樹榮,方蓮花,等. 新型查耳酮衍生物的合成及其初步抗蛋白酪氨酸激酶(PTKs)活性研究[J].中國藥物化學雜志,2011,21(3):178-182.

[12]朱麗萍, 左治鈞, 秦瑩穎. Suzuki反應的國內(nèi)外研究進展[J].地下水,2015,37(3):281-283.

Synthesis of Novel Tetrandrine Derivatives and Their Biological Activities

WEI Xiao1, YANG Yi-fang2, ZHAO Zheng-bao1*

(1.School of Pharmaceutical Science, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China；2. Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry, Shanghai, 200040, China)

Abstract：Six novel tetrandrine derivatives(4a～4f) were synthesized by Suzuki coupling reaction of boronic acid derivatives and 5-bromotetrandrine， which was obtained by bromination, using tetrandrine as the starting material. The structures were characterized by1H NMR, (13)C NMR and ESI-MS. The inhibition activities of 4a～4f against A549 and HL60 cancer cell lines were investigated by CCK-8 assay. The compounds which had better inhibition activities were secondary screened by MTT assay. The inhibitory activities of 4a～4f against PTKs were tested by ELISA. The results showed that 4b, 4c and 4e exhibited well inhibition activities against the two cancer cell lines. 4b and 4c showed better inhibition activities against FGFR1.

Keywords：Tetrandrine; synthesis; biological activity; PTKs

中圖分類號：O621.3; O625.1

文獻標志碼：A

DOI：10.15952/j.cnki.cjsc.1005-1511.2016.03.15405

作者簡介：衛(wèi)笑(1990-)，女，漢族，山西臨汾人，碩士研究生，主要從事藥物合成研究。 E-mail: xiao_w2562@163.com通信聯(lián)系人： 趙正保，博士，教授， Tel． 0351-4690242, E-mail: zhengbao_z@163.com

基金項目：國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(2009ZX09301-007)

收稿日期：2015-12-16