楊艷梅 鄭 毅 范茂攀 丁 凱

（1.云南云天化國際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料有限公司，云南昆明650051；2.西南林業(yè)大學(xué)林學(xué)院，云南昆明650224；3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院，云南昆明650201）

氮對(duì)土壤中精甲霜靈殘留量及其微生物的影響

楊艷梅1，2鄭 毅2范茂攀3丁 凱3

（1.云南云天化國際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料有限公司，云南昆明650051；2.西南林業(yè)大學(xué)林學(xué)院，云南昆明650224；3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院，云南昆明650201）

為了解氮素的存在對(duì)進(jìn)入紅壤中精甲霜靈殘留的影響，本研究通過室內(nèi)培養(yǎng)和盆栽試驗(yàn)，設(shè)定了N0、N1/2、N、N3/2分別為0.0、37.5、75.0、112.5mg/kg 4個(gè)氮肥水平，添加8.1mg/kg的精甲霜靈溶液，并采用甲醇浸提土壤中精甲霜靈，F(xiàn)ID氣相色譜法檢測(cè)，研究了土壤中殘留精甲霜靈的降解情況。結(jié)果表明：精甲霜靈在土壤中的降解存在吸附-解吸的現(xiàn)象，且消解動(dòng)態(tài)符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程；在4個(gè)不同氮水平中，75.0mg/kg水平下精甲霜靈在紅壤中的降解最快；微生物數(shù)量在施精甲霜靈后2 h～7 d都急劇減少，在第7天后開始增加。不同氮水平下土壤中微生物數(shù)量最終呈現(xiàn)出N＞N3/2＞N1/2＞N0的趨勢(shì)，N、N3/2水平與其他水平間的差異均達(dá)顯著程度，而N和N3/2水平間差異不顯著。施藥后17 d，微生物數(shù)量開始恢復(fù)，氮素和殘留的精甲霜靈都成了微生物的能源物質(zhì)，促進(jìn)了微生物的生長(zhǎng)和繁殖。

氮；精甲霜靈；降解；紅壤；微生物；殘留量

Key words：nitrogen；metalaxyl-M；degradation；microorganism；residual amount

精甲霜靈又稱高效甲霜靈，是甲霜靈兩個(gè)異構(gòu)體中的一個(gè)，即R-甲霜靈，化學(xué)名稱為N-（2，6-二甲苯基）-N-（甲氧基乙?；?D-丙胺酸甲酯。精甲霜靈是一種具有保護(hù)治療作用的內(nèi)吸性殺菌劑，在多種作物上通過拌種、拌土、噴施等措施，專用于防治卵菌綱引起的霜霉病、霜疫霉病、疫病和晚疫病等病害。有研究顯示，精甲霜靈對(duì)立枯絲核菌、瓜果腐霉菌和大豆疫霉菌菌絲生長(zhǎng)抑制率分別達(dá)到100%、100%和84.82%［1］，因此，精甲霜靈被廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上。而病菌對(duì)精甲霜靈較容易產(chǎn)生抗性［2-4］，也因此在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用的精甲霜靈常與不同防病機(jī)制的農(nóng)藥進(jìn)行復(fù)配，以達(dá)到更好的殺菌效果。羅志明等［5］用28.7%精甲霜靈·咯菌腈·噻蟲嗪FS處理蔗種后發(fā)現(xiàn)甘蔗鳳梨病的防效明顯優(yōu)于對(duì)照50%多菌靈WP，劉煜財(cái)?shù)龋?］試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)11%精甲霜靈·咯菌腈·嘧菌酯的種衣劑對(duì)玉米絲黑穗病有較好的防治效果，馮鐵瑛等［7］研究也發(fā)現(xiàn)選用6.25%精甲霜靈·咯菌腈FS對(duì)水稻立枯病的防治效果較好。進(jìn)入土壤中的精甲霜靈主要靠微生物作用來進(jìn)行降解［8］，而進(jìn)行復(fù)配后的精甲霜靈對(duì)微生物的作用可能就更強(qiáng)，如毒死蜱與百菌清復(fù)配后對(duì)微生物的抑制效果更強(qiáng)［9］。而施化肥是保證糧食穩(wěn)定生產(chǎn)的一種必不可少的農(nóng)業(yè)措施，相對(duì)有機(jī)質(zhì)而言，化肥更容易被土壤微生物利用［10］，因此，化肥的施用不僅直接影響土壤化學(xué)成分變化，而且還能引起土壤微生物活性的變化，進(jìn)而引起土壤微生物群落結(jié)構(gòu)改變，同時(shí)，化肥還能改變土壤的物理性狀，影響土壤上植被的生長(zhǎng)，從而間接影響土壤微生物群落結(jié)構(gòu)［11］。而氮肥不僅在維持土壤有機(jī)碳的穩(wěn)定性中占有重要的作用［12］，還是影響微生物量碳的主導(dǎo)因素，無論是適量施用還是過量施用都會(huì)對(duì)微生物量碳有較大的影響［13］；相反，土壤中若氮源不足，微生物生長(zhǎng)則會(huì)受到抑制，因此加入氮肥后，微生物生長(zhǎng)加快，活性提高，農(nóng)藥降解加快［14］。目前，施肥對(duì)農(nóng)藥降解的研究較少，McGhee等［15］試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，施用硝酸銨可以促進(jìn)2，4-D降解，28 d后，施氮處理比對(duì)照增加了近2.5倍；王鴻顯等［16］試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，過碳酰胺的施用可以促進(jìn)Brij35的降解，且降解時(shí)間越長(zhǎng)降解率越高。但更多研究表明，施用氮肥尤其是無機(jī)氮肥，農(nóng)藥降解會(huì)受到抑制［17-19］。因此，本試驗(yàn)通過研究氮肥水平與土壤中精甲霜靈殘留的降解關(guān)系，以確定氮肥的施用是否會(huì)促進(jìn)土壤中精甲霜靈殘留的降解及適宜的施氮水平，為進(jìn)一步的田間試驗(yàn)研究提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1）土壤：土壤基本理化性狀為，有機(jī)質(zhì)36.25 g/kg，全氮1.28 g/kg，堿解氮153.19 mg/kg，pH 6.24；質(zhì)地為粉質(zhì)粘土，其中沙粒含量7.90%，粘粒含量45.98%，粉粒含量46.12%，TiO2含量6.01%；為山原紅壤。

2）供試農(nóng)藥：68%精甲霜·錳鋅水分散粒劑（先正達(dá)投資有限公司，中國）施用量為2 700 g/hm，精甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)品（100μg/mL）由上海農(nóng)藥研究所提供。

3）肥料：尿素（N≥46.4%），過磷酸鈣（P2O5≥14.0%），硫酸鉀（K2O≥50.0%）。

4）供試作物：小白菜（Brassica rapa var.chinensis），金綠。

1.2 儀器與試劑

1）儀器：Agilent 7890A氣相色譜儀（FID檢測(cè)器），色譜柱為HP-INNOWax Polyethylene Glyco，30 m×320μm×0.5μm，可控溫加熱水浴鍋均產(chǎn)自美國，往復(fù)式振蕩器及實(shí)驗(yàn)室常用儀器均為國產(chǎn)儀器。

2）試劑：甲醇（色譜純）、精甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)品（純度99.0%），甲醇、二氯甲烷、無水Na2SO4，NaCl；淀粉、硝酸鉀、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、瓊脂（日本）、葡萄糖、蛋白胨、孟加拉紅、鏈霉素，以上試劑若無特別強(qiáng)調(diào)，則均是分析純的。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和處理

本試驗(yàn)分室內(nèi)培養(yǎng)和大棚盆栽，都設(shè)4個(gè)處理：1）缺氮處理（N0），不施氮肥；2）低氮處理：正常供氮量的50%（N1/2）；3）正常供氮處理（N）；4）高氮處理：正常供氮的3/2倍（N3/2）。正常氮肥用量都為75mg/kg，氮磷鉀肥配比為N∶P2O5∶K2O=1.0∶1.0∶2.5，溶于水；每個(gè)處理設(shè)4個(gè)重復(fù)。根據(jù)NY/T 788—2004《中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》中推薦高劑量和推薦高劑量的1.5倍設(shè)置施精甲霜靈濃度。

1）室內(nèi)培養(yǎng)試驗(yàn)：分別稱取20.00 g風(fēng)干土壤8份（過1mm篩孔），于口徑9 cm的培養(yǎng)皿中，分別加入10.00mL肥料溶液，于通風(fēng)櫥中待溶劑揮發(fā)后，繼續(xù)滴加10.00ml精甲霜靈溶液（濃度8.1mg/kg），待溶劑揮發(fā)后，將各組土壤充分混勻，然后分別轉(zhuǎn)入250 mL三角燒瓶中，調(diào)節(jié)土壤水分至飽和持水量的60%。用棉塞將瓶口塞緊，置于25°C培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)，當(dāng)天（施精甲霜靈后2 h）、1、5、12、19 d取樣測(cè)定土壤中精甲霜靈含量。

2）大棚盆栽試驗(yàn)：稱取10.0 kg供試土壤（過1 cm篩孔）與基肥（N：60%，P2O5：100%，K2O：40%）混勻后裝盆，然后移栽，待植株成活后澆灌900mL精甲霜靈溶液（濃度8.1 mg/kg），于施精甲霜靈后2 h、3 d、7 d、11 d、17 d取樣測(cè)定土壤中精甲霜靈的含量。盆栽管理為，干旱時(shí)正常灌水，每次灌水1 L，植株進(jìn)入旺長(zhǎng)期（移栽后10 d）后進(jìn)行追肥（N：40%，K2O：60%）。

1.4 取樣與分析測(cè)定

對(duì)于室內(nèi)培養(yǎng)試驗(yàn)，施精甲霜靈后按不同的間隔時(shí)間從培養(yǎng)箱里直接取出樣品浸提。盆栽試驗(yàn)則用土鉆于施精甲霜靈后不同的間隔時(shí)間進(jìn)行采樣，每盆分3～4點(diǎn)取土，混合后剔除石頭等雜物后用四分法帶走200 g左右，裝入塑料自封袋貯藏于1～3℃的冰箱中。

1.4.1 精甲霜靈殘留量測(cè)定

1）儀器條件：進(jìn)樣口溫度為205℃，保持1min，然后以8℃/min進(jìn)行升溫至250℃，保持7min；載氣為氮?dú)猓兌取?9.999%；檢測(cè)器溫度為240℃；柱箱溫度為240℃；H2流量為40 mL/min；空氣流量為400mL/min；N2流量為26.939 mL/min；進(jìn)樣量為1.00μL；進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣。上述色譜條件下，保留時(shí)間約12.375min，外標(biāo)定量法測(cè)定。

2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：在上述檢測(cè)條件下，分別取濃度為1.00、5.00、10.00、15.00、20.00、40.00、60.00、100.00 ng/μL標(biāo)準(zhǔn)工作液，繪制精甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)曲線，以峰面積作為定量指標(biāo)，得回歸方程為y=2.877 6x-8.632 6，r2=0.994 9，這證明在試驗(yàn)條件范圍內(nèi)儀器響應(yīng)信號(hào)與進(jìn)樣量成良好的線性關(guān)系。

3）測(cè)定方法步驟：準(zhǔn)確稱取土壤20.00 g置于250mL三角瓶中，加入100 mL甲醇，震蕩提取1 h，過濾，吸取濾液60 mL轉(zhuǎn)入250 mL分液漏斗中，加入5%氯化鈉溶液50 mL，用50、40、30m L二氯甲烷萃取3次，合并萃取液，過無水硫酸鈉漏斗脫水，濃縮至近干（水浴70～80℃），1 mL甲醇溶解定容，過0.45 um濾膜，待檢測(cè)［20-21］。

1.4.2 土壤微生物數(shù)量的測(cè)定 采用稀釋平板計(jì)數(shù)法，參照文獻(xiàn)［22］。

1.5 分析方法

數(shù)據(jù)用Excel 2010進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，差異性分析（Tukey法）和相關(guān)性分析用Spss 19.0軟件分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同施氮水平下精甲霜靈在土壤中的殘留動(dòng)態(tài)

在室內(nèi)培養(yǎng)和盆栽條件下土壤中精甲霜靈的殘留情況見圖1～2。

由圖1～2可知，無論在室內(nèi)培養(yǎng)還是在盆栽條件下，精甲霜靈進(jìn)入土壤后其降解規(guī)律都符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)消解方程CT=COe-KT，且相關(guān)系數(shù)都達(dá)顯著水平。精甲霜靈在室內(nèi)培養(yǎng)的降解過程中，第2次采樣（施精甲霜靈后1 d）時(shí)其殘留量增加至一個(gè)極值后又接著降低，而在盆栽中則未出現(xiàn)。施精甲霜靈后2 h，精甲霜靈在培養(yǎng)土壤中（圖1）的殘留量為34.05～39.46 ng/μL，在盆栽土壤中（圖2）的殘留量為12.48～15.57 ng/μL，顯著低于培養(yǎng)土壤中的殘留量；施精甲霜靈后1 d，培養(yǎng)土壤中精甲霜靈殘留量除N水平外其他水平下的殘留量增加了3.35%～27.85%，而在盆栽土壤中卻降低了9.75%～51.03%；第5次采樣時(shí)，培養(yǎng)土壤中的精甲霜靈降解了81.56%～87.24%，而在盆栽中降解了80.68%～88.76%，其殘留量顯著低于培養(yǎng)試驗(yàn)中的。研究結(jié)果表明，精甲霜靈在土壤中的殘留除受植株的影響因素外，還受其他因素的影響。由圖1～2可以得到培養(yǎng)和盆栽條件下精甲霜靈在土壤中的消解方程，見表1。

表1 不同試驗(yàn)條件下土壤中精甲霜靈的消解方程Tab.1 The dissipation equation ofmetalaxyl-M in soil under different test condition

由表1可知，在培養(yǎng)條件下精甲霜靈在土壤中的消解半衰期為1.97～2.29 d，N水平下的精甲霜靈殘留降解最快，其次是N0、N1/2水平下的，N3/2水平下的降解得最慢。在盆栽試驗(yàn)中，精甲霜靈在土壤中的消解半衰期為1.55～2.06 d，在不同氮水平下，精甲霜靈降解的快慢趨勢(shì)與室內(nèi)培養(yǎng)一致。最終精甲霜靈在土壤中的殘留量所呈現(xiàn)出的高低趨勢(shì)也與消解半衰期得到的結(jié)果一致，即N3/2＞N1/2＞N0＞N。試驗(yàn)結(jié)果表明，在N水平下，土壤中的精甲霜靈降解得較快。

2.2 不同施氮水平下土壤中微生物數(shù)量的變化

盆栽試驗(yàn)中不同氮水平下土壤中細(xì)菌、放線菌、真菌、微生物數(shù)量的變化情況見圖3～6。

由圖3可知，精甲霜靈施用后2 h，土壤中細(xì)菌的數(shù)量隨施氮量的增加而減少，除N1/2和N水平之間外，其他氮水平間均達(dá)顯著水平；精甲霜靈施用后2 h～3 d，不同氮水平下的細(xì)菌數(shù)量急劇減少，第3天后，減少速率減緩，至第11天后出現(xiàn)增加的情況；精甲霜靈施用后17 d，細(xì)菌數(shù)量N0水平顯著低于N水平，而N水平與N1/2、N3/2水平間差異性卻不顯著。

由圖4可知，施用精甲霜靈后2 h，在不同氮水平下土壤中放線菌數(shù)量呈現(xiàn)出N1/2＞N0＞N＞N3/2的高低趨勢(shì)，兩氮水平間的差異顯著。施用精甲霜靈后，N1/2、N、N3/2水平下的放線菌數(shù)量一直降低，至第11天后才出現(xiàn)增加的情況，而N0水平下的放線菌數(shù)量在減少至第7天后就開始增加，至第11天時(shí)出現(xiàn)極值后又再次降低，因此，精甲霜靈施用后17 d，放線菌數(shù)量低于其他氮水平，N0與N水平間差異顯著，而N與N1/2、N3/2水平間差異不顯著。

由圖5可知，施用精甲霜靈后2 h，N水平土壤中真菌數(shù)量顯著高于N1/2水平，而N1/2水平顯著高于N3/2水平，N0水平真菌數(shù)量最低。2 h后，N0和N水平真菌數(shù)量的變化情況如放線菌數(shù)量的變化情況一樣，但N水平真菌數(shù)量的降低程度和增加程度都比N0水平大；N1/2水平。土壤中真菌數(shù)量在施用精甲霜靈后2 h～17 d都在緩慢地減少，而N3/2水平真菌數(shù)量在施藥后卻出現(xiàn)增加情況，至第3天后才急劇降低，第7天真菌減少至最小值后急劇增加至第11天，第11天后再次減少；第17天時(shí)，N和N3/2水平真菌數(shù)量顯著高于N1/2水平，而N1/2水平又顯著高于N0水平。

由圖6可知，施藥后2 h，N1/2水平土壤中的微生物數(shù)量顯著高于N0、N水平，N0、N水平又顯著高于N3/2水平，N0、N水平間微生物數(shù)量無顯著性差異；施藥后2 h～7 d，土壤微生物數(shù)量急劇下降，至第7天時(shí)下降了54.39%～61.09%，N1/2、N水平下微生物數(shù)量顯著高于N0水平，N0水平顯著高于N3/2水平；施藥7 d后，N0、N水平下的微生物數(shù)量出現(xiàn)了增加又降低的現(xiàn)象，即刺激效應(yīng)；至第17天時(shí)，N0水平下的微生物數(shù)量下降得更低，而N水平卻仍然出現(xiàn)了增加的趨勢(shì)，N1/2、N3/2水平下的微生物數(shù)量自第7天起就開始恢復(fù)，至施藥后17 d時(shí)，分別增加了5.62%、32.17%，而施用過克菌丹、氯硝胺后微生物數(shù)量要在施藥后157 d才能恢復(fù)［23］。因此，氮素的存在促進(jìn)了微生物數(shù)量的恢復(fù)，且在最終不同氮水平下土壤中微生物數(shù)量呈現(xiàn)出N＞N3/2＞N1/2＞N0的趨勢(shì)，N、N3/2水平與其他水平間的差異均達(dá)顯著程度，而N和N3/2水平間差異不顯著。

2.3 土壤氮素、微生物和精甲霜靈相互間的關(guān)系

土壤氮素與細(xì)菌、放線菌、真菌數(shù)量的相關(guān)性分析結(jié)果見表2。

表2 氮含量分別與細(xì)菌、放線菌、真菌數(shù)量的相關(guān)性Tab.2 The correlation of nitrogen levels and bacteria，actinomycetes and fungi amount amount

由表2可知，精甲霜靈施用后2 h～7 d，土壤氮素與細(xì)菌數(shù)量呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，說明此時(shí)期氮肥的施用抑制了細(xì)菌的生長(zhǎng)；至第11天時(shí)，該相關(guān)性由負(fù)相關(guān)變?yōu)檎嚓P(guān)，氮素促進(jìn)了細(xì)菌的生長(zhǎng)。對(duì)放線菌而言，在施用精甲霜靈后3天內(nèi)，土壤氮素與其數(shù)量也呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系；但在第7天時(shí)卻呈一定的正相關(guān)關(guān)系，可在第11天時(shí)又恢復(fù)顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，這說明在施用精甲霜靈后2 h～11 d氮肥的施用不利于放線菌的生長(zhǎng)；而在第17天時(shí)土壤氮素與放線菌數(shù)量呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，說明土壤氮素明顯地促進(jìn)了放線菌的生長(zhǎng)。精甲霜靈施用后，土壤氮素與真菌數(shù)量的相關(guān)性除第7天外的其他時(shí)間點(diǎn)都是正相關(guān)關(guān)系，尤其是施藥后11～17 d正相關(guān)關(guān)系達(dá)到顯著水平，說明氮素的施用促進(jìn)了真菌的生長(zhǎng)繁殖。

表3 微生物數(shù)量與氮素及精甲霜靈殘留量的相關(guān)性Tab.3 The correlation of nitrogen levels and microorganism＇s amount and the correlation of microorganism＇s amount and metalaxyl-M residues

土壤氮素與微生物數(shù)量、微生物數(shù)量與精甲霜靈殘留量的相關(guān)性見表3。

由表3可知，施藥后2 h～11 d，土壤氮素與微生物數(shù)量一直呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，但負(fù)相關(guān)程度自施藥第3天后就逐漸減弱，至第17天時(shí)變成了顯著的正相關(guān)關(guān)系。微生物數(shù)量與精甲霜靈的殘留量在施藥后呈一定的負(fù)相關(guān)關(guān)系，然而在施藥后第3天卻變成顯著的正相關(guān)關(guān)系；施藥后7～11 d，微生物數(shù)量與精甲霜靈殘留量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系；在施藥后17 d時(shí)也變成正相關(guān)關(guān)系。這說明施藥后2 h～3 d，氮肥的存在抑制了微生物的生長(zhǎng)，但是抗性微生物的存在可以利用土壤中精甲霜靈，從而降解精甲霜靈，而抗性微生物數(shù)量增長(zhǎng)到一定程度后就轉(zhuǎn)向土壤中較好利用的氮素，并以氮素為主要能源物質(zhì)，因此在施藥后7～11 d與氮肥水平的負(fù)相關(guān)程度減弱，故與精甲霜靈殘留量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。施藥后17 d，微生物數(shù)量開始恢復(fù)，氮素和殘留的精甲霜靈都成了微生物的能源物質(zhì)，促進(jìn)了微生物的生長(zhǎng)、繁殖。

3 結(jié)論與討論

精甲霜靈在土壤中的降解符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)消解方程，然而在施用精甲霜靈后1天時(shí)發(fā)現(xiàn)室內(nèi)培養(yǎng)條件下土壤中精甲霜靈殘留量增加，但在大棚盆栽土壤中卻未出現(xiàn)此種情況。本研究中精甲霜靈的消解半衰期較短，為1.55～2.29 d，而大多數(shù)研究表明精甲霜靈在土壤中的半衰期為2.91～12.77 d［21，24-26］。其主要原因如下：1）山原紅壤理化性狀與其他土壤明顯不同。賀小敏［27］和Fernandes等［28］研究表明甲霜靈進(jìn)入土壤后會(huì)與土壤顆粒進(jìn)行明顯的吸附-解吸過程；王化國等［29］研究顯示，14C-甲霜靈用甲醇提取后，其未提取殘留還可以釋放出來；而本研究土壤中粘粒和粉粒共占了92.1%，對(duì)精甲霜靈的吸附可以造成巨大的影響，因此當(dāng)被吸附的這一部分精甲霜靈被釋放出來后，就能增加土壤溶液中精甲霜靈的含量。2）影響精甲霜靈降解的因素頗多。在盆栽試驗(yàn)中，除了植株這個(gè)因素與室內(nèi)培養(yǎng)的條件不同外，土壤中的精甲霜靈很有可能發(fā)生了光解作用。雖然胡娟對(duì)甲霜靈在水中的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究表明，在太陽光照射的條件下，甲霜靈在純水中比較穩(wěn)定［30］，但影響精甲霜靈進(jìn)行光解的因素較多；胡娟［31］研究結(jié)果也表明，甲霜靈在堿性緩沖液中較容易發(fā)生光解反應(yīng)，其半衰期為6.49min，而TiO2對(duì)甲霜靈的光解也有一定的促進(jìn)作用。大棚試驗(yàn)中，溫度較高，土壤水分蒸發(fā)較快，為確保植株能正常生長(zhǎng)和精甲霜靈不被淋失，需灌水次數(shù)較多，土壤就能長(zhǎng)時(shí)間保持濕潤(rùn)狀態(tài)，而光照條件成了一個(gè)不可控制的主要因素，因此在TiO2存在的情況下，土壤中的精甲霜靈必然會(huì)發(fā)生光解反應(yīng)，進(jìn)而使降解加快，以致沒出現(xiàn)其殘留量增加的情況。3）精甲霜靈與無機(jī)氮肥的施用存在明顯的交互效應(yīng)。土壤微生物的作用是影響精甲霜靈降解的主要因素［9，29］，而精甲霜為廣譜性殺菌劑，殺菌劑除了作用于靶真菌，對(duì)靶真菌以外的大多微生物種類也有不利的影響［32］。Atlas等［33］發(fā)現(xiàn)滅菌丹在施藥后7～14 d能使真菌數(shù)量減少，但細(xì)菌數(shù)量卻不受影響；Siegel［34］也發(fā)現(xiàn)苯菌靈的施用后，真菌數(shù)量減少了25%～35%，放線菌數(shù)量也減少，細(xì)菌數(shù)量卻不受影響；Moorman［35］和Agnihotri［36］卻發(fā)現(xiàn)克菌丹施用后，真菌數(shù)量減少而細(xì)菌數(shù)量增多。因此，精甲霜靈的施用勢(shì)必會(huì)造成土壤中微生物群落結(jié)構(gòu)的破壞，對(duì)農(nóng)藥的降解產(chǎn)生不利的影響。而Bailey和Coffey［37］發(fā)現(xiàn)微生物在沒有其他物質(zhì)為能源的條件下，是不能對(duì)精甲霜靈起降解作用的，但添加了蔗糖后微生物就能把精甲霜靈作為能源物質(zhì)來進(jìn)行代謝，且微生物可以對(duì)附近可利用的養(yǎng)分做出快速反應(yīng)，并迅速吸收［38］。施入低濃度或適量的無機(jī)氮后就可被微生物迅速吸收利用，因此在精甲霜靈施用后2 h，N1/2水平下土壤中的微生物數(shù)量顯著高于其他氮素，也就是說，適宜的氮肥施用量促進(jìn)了土壤中精甲霜靈殘留的降解。

在本研究中，精甲霜靈的消解半衰期較短，而土壤中殘留的精甲霜靈在施藥后17 d仍能檢測(cè)到，說明精甲霜靈在土壤里出現(xiàn)了滯留的情況。而化學(xué)物質(zhì)在環(huán)境中的轉(zhuǎn)化及其立體選擇性對(duì)作物中殘留的影響主要是基于它們?cè)诃h(huán)境中的持久性［39］，因此植株中精甲霜靈的殘留情況有待進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)是按NY/T 788—2004《農(nóng)殘?jiān)囼?yàn)準(zhǔn)則》設(shè)計(jì)的殘留試驗(yàn)，跟大田生物試驗(yàn)的結(jié)果還是有一定的出入，因此有必要進(jìn)行進(jìn)一步研究探討。

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（責(zé)任編輯 韓明躍）

Effect of Nitrogen on Metalaxyl-M Residues and Microorganism in the Soils

Yang Yanmei1，2，Zheng Yi2，F(xiàn)an Maopan3，Ding Kai3
（1.Yunnan YTH International Agricultural Means of Production Co.Ltd，Kunming Yunnan 650051，China；2.College of Forestry，Southwest Forestry University，Kunming Yunnan 650224，China；3.College of Resource and Environmental，Yunnan Agricultural University，Kunming Yunnan 650201，China.）

In order to find out the effectof nitrogen on themetalaxyl-M residue in the krasnozem，the nitrogen fertilizer levels of N0，N1/2，N and N3/2were separately set for 0.0 mg/kg，37.5 mg/kg，75.0 mg/kg and 112.5 mg/kg and 8.1 mg/kg ofmetalaxyl-M were added in the incubation experiment and the pot experiment，and the metalaxyl-M residue were extracted by methanol，then were detected by gas chromatography with FID to research the degradation ofmetalaxyl-M in krasnozem under four differentnitrogen levels.The results showed thatmetalaxyl-M residues were degraded with a processof adsorption-desorption in soil，and the dissipation dynamics could be described by first-order rate equation.The degradation speed rate of metalaxyl-M under nitrogen fertilizer levels of 75.0 mg/kg was the fastest among four different nitrogen fertilizer levels.The amount of soilmicroorganisms also rapidly reduced after themetalaxyl-M treatment during the 2h-7d，and returned at the 7thday.Themicrobe quantity in different nitrogen levels was N＞N3/2＞N1/2＞N0；besides，itwas significant among N，N3/2level and others，butnot significantbetween N and N3/2.Microbe quantity began to recover after17 days.It suggested thatboth nitrogen and metalaxyl-M residue were energy substance formicroorganisms，promoting their growth and propagation.

S714.8

A

2095-1914（2016）02-0035-07

10.11929/j.issn.2095-1914.2016.02.006

2015-09-21

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31260504，31460551，31210103906）資助；國家“973”計(jì)劃項(xiàng)目（2011CB100405）資助；農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)科研專項(xiàng)課題項(xiàng)目（201103003）資助。

第1作者：楊艷梅（1989—），女，碩士生。研究方向：氮肥的施用對(duì)農(nóng)藥降解的影響。Email：yangyanmei＿89@126.com。

鄭毅（1964—），男，教授。研究方向：土壤肥料與病害控制。Email：yzheng@ynau.edu.cn。