翁善鋼

（外高橋出入境檢驗(yàn)檢疫局，上海浦東新區(qū)200137）

芽囊原蟲—一種可能的腸道病原體

翁善鋼

（外高橋出入境檢驗(yàn)檢疫局，上海浦東新區(qū)200137）

豬腹瀉性疾病是如今養(yǎng)豬業(yè)具有重要經(jīng)濟(jì)意義的疾病。引起腹瀉的病原體有多種，包括細(xì)菌、病毒、寄生蟲等。本文將主要介紹奧地利出現(xiàn)的一個腹瀉病例。

2015年3月，奧地利的一個豬場出現(xiàn)了一例芽囊原蟲（blastocystosis）病。這個豬場的仔豬產(chǎn)自存欄60頭母豬的封閉生產(chǎn)系統(tǒng)。仔豬在第28天斷奶。母豬常規(guī)接種細(xì)小病毒病和豬丹毒疫苗，仔豬接種圓環(huán)病毒病和支原體肺炎疫苗。豬場沒有其它可知的疾病信息。豬場獸醫(yī)稱，仔豬斷奶之后出現(xiàn)腹瀉，體重隨之下降，并未觀察到其它明顯的臨床癥狀，仔豬死亡率為5%。豬場采取了多種措施，如使用抗生素、調(diào)整飼料配方（把粗蛋白質(zhì)從18%降低到15%，粗纖維從3%增加到4%），不過這些措施并沒有效果。

1 臨床檢查和診斷

一頭使用黏菌素[5毫克/（千克體重·天），連續(xù)7天]治療的仔豬被送往奧地利的一家大學(xué)豬病診所進(jìn)行診斷。這頭仔豬患有嚴(yán)重的腹瀉，臨床檢查僅發(fā)現(xiàn)輕度的營養(yǎng)不良。對仔豬進(jìn)行剖檢及病理組織學(xué)檢查，同時對一段空腸單獨(dú)進(jìn)行了細(xì)菌學(xué)檢查。將腹瀉糞便樣本裝滿試管以確保滿足厭氧條件，立即送到研究所的細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行短螺旋體培養(yǎng)。為了排除圓環(huán)病毒2型相關(guān)的腸炎，用福爾馬林固定的腸道組織樣本進(jìn)行原位雜交試驗(yàn)以直接檢測腸道內(nèi)的圓環(huán)病毒2型。使用三重PCR檢測回腸和結(jié)腸黏膜樣本的胞內(nèi)勞森氏菌、短螺旋體和腸道螺旋體。對糞便進(jìn)行熒光顯微鏡檢查和傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡檢查以檢測球蟲卵囊和原生動物。

2 病理學(xué)檢查結(jié)果

未觀察到明顯的病理形態(tài)學(xué)變化。結(jié)腸消化物呈淺綠色液體狀。病理組織學(xué)檢查可見小腸黏膜有數(shù)個嗜酸性粒細(xì)胞。圓環(huán)病毒2型原位雜交試驗(yàn)和三重PCR未檢測到胞內(nèi)勞森氏菌、短螺旋體和腸道螺旋體。

3 細(xì)菌學(xué)檢測結(jié)果

空腸可見稀薄的類似于酵母的真菌和大腸桿菌。由于大腸桿菌在空腸的檢出率較低，故認(rèn)為臨床相關(guān)性較低，未能確定致病因子。細(xì)菌培養(yǎng)未檢測到短螺旋體。

4 寄生蟲學(xué)檢測結(jié)果

通過熒光顯微鏡法未檢測到球蟲蟲卵。檢測到豬結(jié)腸存在一定量的腸袋蟲桿菌（考慮為豬結(jié)腸本身存在的）。傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡檢測仔豬糞便可見大量圓形結(jié)構(gòu)體，大小為10～20微米。這些圓形結(jié)構(gòu)體呈現(xiàn)透明狀，沒有或幾乎沒有細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。

為了進(jìn)一步確定圓形結(jié)構(gòu)體，用傳統(tǒng)的迪夫快速（Diff-Quick）染色試劑盒對糞便涂片進(jìn)行染色。在100倍放大的情況下，圓形結(jié)構(gòu)體在光學(xué)顯微鏡下呈現(xiàn)為單細(xì)胞，主要為嗜堿性結(jié)構(gòu)體。檢測人員認(rèn)為通常在豬糞便中不會發(fā)現(xiàn)如此數(shù)量的該結(jié)構(gòu)體，因此認(rèn)為其是新的事物。檢測人員向多位病理學(xué)家、細(xì)菌學(xué)家和寄生蟲專家咨詢，一名微生物學(xué)家最終作出診斷稱這種結(jié)構(gòu)體為芽囊原蟲屬（Blastocystis sp）。

5 結(jié)果分析

鑒于未檢測到一定數(shù)量的臨床常見腸道病原體，大量的芽囊原蟲感染被認(rèn)為在此病例中起到了關(guān)鍵的作用。芽囊原蟲是一種原生動物，經(jīng)常在人類和其它動物中發(fā)現(xiàn)，如豬和牛。其細(xì)胞被細(xì)胞膜包裹且主要由一個大的中央液泡構(gòu)成，細(xì)胞核位于細(xì)胞的周圍。芽囊原蟲的首次報道出現(xiàn)在1911年，但其發(fā)病機(jī)理和致病性目前尚未完全了解。豬的結(jié)腸可以發(fā)現(xiàn)一定量的芽囊原蟲?，F(xiàn)有的研究調(diào)查顯示，在豬只受到免疫抑制的情況下，芽囊原蟲不僅在結(jié)腸定植還可以在小腸內(nèi)定植。人類和豬均很少觀察到小腸組織的病變。

在此病例中，霉菌毒素造成的免疫抑制可能是芽囊原蟲在仔豬腸道大量定植的原因。2014年，在歐洲中部有大量的玉米存在霉菌毒素污染，特別是毒素A和B類單端孢霉烯族毒素。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）屬于B類單端孢霉烯族毒素，T2毒素屬于A類單端孢霉烯族毒素，它們都具有嚴(yán)重的免疫抑制作用。鑒于大量玉米含有高濃度的霉菌毒素，研究人員建議豬場在飼料中完全禁止使用玉米。研究人員認(rèn)為霉菌毒素（特別是T2毒素和DON）是導(dǎo)致免疫抑制的化合物，其幫助了芽囊原蟲在腸道的定植。這一因素加上衛(wèi)生和消毒程序管理不善可能造成芽囊原蟲污染了豬舍，故影響到后續(xù)幾個批次的豬。

6 預(yù)防和治療

芽囊原蟲的治療非常困難，因?qū)ζ溆行У目捎盟幤贩浅Ｓ邢?。甲硝咪唑是首選藥物，但在歐洲已不允許其在食品動物中使用了。其它咪唑類藥物如替硝唑和酮康唑也不允許使用。

唯一合法的治療芽囊原蟲的方法是口服甲氧芐氨嘧啶-對氨基苯磺酰胺（TMP/STX），或者飲水加入巴龍霉素。巴龍霉素是氨基糖苷類抗生素，不能被全身充分吸收，一旦給藥，此藥物停留在腸道內(nèi)腔內(nèi)且隨糞便排出。在人藥中，巴龍霉素用于治療芽囊原蟲病、隱孢子蟲病、阿米巴病和皮膚利什曼病。

在此病例中，飼料中添加TMP/STX治療腹瀉，但這對該病癥未起到改善作用，故豬場獸醫(yī)決定使用巴龍霉素治療（40毫克/千克體重，連續(xù)使用10天）。

單獨(dú)使用抗生素治療芽囊原蟲病并不能起到很好的效果。通常應(yīng)該與管理措施聯(lián)合使用，如徹底的清潔和消毒程序。

數(shù)月后，該豬場的臨床狀況顯著改善。在3個生產(chǎn)批次使用了巴龍霉素，治療的批次未發(fā)現(xiàn)腹瀉現(xiàn)象，且死亡率降低到小于1%。由于使用巴龍霉素治療斷奶仔豬的成本很高，豬場獸醫(yī)停止使用抗生素治療，轉(zhuǎn)而在感染豬的飼料中添加氧化鋅（2 500毫克/千克）和木炭。

總之，芽囊原蟲必須加入到豬腹瀉病例的鑒別診斷名單上，特別是在玉米等糧食作物大量被霉菌毒素污染的年份更應(yīng)如此。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)擴(kuò)大診斷面，當(dāng)豬嚴(yán)重腹瀉時還應(yīng)檢查豬糞便中的芽囊原蟲。

（編輯：柳青）

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2016-03-17

翁善鋼（1985-），男，江蘇常熟人，碩士，主要從事各類動物疫病流行病學(xué)及其防控對策研究.E-mail：sgweng@163.com