翁善鋼

（外高橋出入境檢驗檢疫局，上海浦東新區(qū)200137）

豬腸道螺旋體病的流行與診治

翁善鋼

（外高橋出入境檢驗檢疫局，上海浦東新區(qū)200137）

20世紀80年代，有學者在一項研究過程中給豬口服了弱β-溶血性的小腸螺旋體菌株P43/6/ 78T。這項人工感染試驗的結果是豬出現了含有血斑的黏液性腹瀉，同時還出現了結腸炎的病變。這一分離菌株目前被認為是毛腸短狀螺旋體（Brachyspira pilosicoli）的典型菌株。毛腸短狀螺旋體被認為是豬腸道（或結腸）螺旋體病[Porcine Intestinal（or Colonic）Spirochetosis,PIS/PCS]的病因。

1 病原學

使用多電位酶切電泳（MLEE）研究表明，毛腸短狀螺旋體是一個獨特的菌種，菌株表現出廣泛的多樣性，菌群是重組的。重組和基因重排可能一部分由GTA活性引起。

毛腸短狀螺旋體6～10 μm長，0.25～0.30 μm寬，特征是每個細胞兩端和尖端附著4～7根周質鞭毛。毛腸短狀螺旋體菌株95/1 000有1個2.59 Mbp大小的環(huán)狀染色體、GTA的基因、1個完整的噬菌體，但沒有質粒。毛腸短狀螺旋體的外膜含有脂寡糖（LOS），不同菌株具有血清異質性。

毛腸短狀螺旋體能在厭氧條件下培養(yǎng)。在胰酶大豆血瓊脂培養(yǎng)3～5 d后，毛腸短狀螺旋體能形成薄薄的霧狀擴散表面，圍繞著弱β-溶血區(qū)。接種前切割瓊脂能提高毛腸短狀螺旋體的回收率，但通常看不到增強的溶血區(qū)。一旦分離，螺旋體在各種厭氧液體培養(yǎng)基中很快生長。

2 流行病學

大多數養(yǎng)豬國家都有PIS/PCS報道。這一情況的增加源于診斷方法的改進，常用的抗生素類生長促進劑的禁用，以及其它主要的腸道疾病在許多國家目前已得到較好的控制。經常出現腹瀉的豬場感染毛腸短狀螺旋體的概率較高，而沒有腹瀉的豬場很少或者沒有感染的發(fā)生。

多種動物可能會自然感染毛腸短狀螺旋體。典型病變和癥狀在各種宿主動物中都有記載。源自豬、狗和人的分離菌株遺傳學上較近。

毛腸短狀螺旋體通過糞便-口腔途徑進行傳播，感染可能由帶菌豬傳入未感染豬群。如果豬場做不到充分的清潔和消毒，疾病能在不同批次間再發(fā)生。野生動物和鳥類可能是傳染源。在一個豬場，毛腸短狀螺旋體曾從雞和污水池中的水檢測到，而污水池中有野鴨。從污水池中獲得的分離株與從豬體內獲得的分離株屬于同一個基因型，這一結果與以往的研究觀察一致，表明野生水禽可能污染供水，因此這表明了豬感染毛腸短狀螺旋體的一個潛在渠道。嚙齒動物不能成為毛腸短狀螺旋體重要、長期的儲存宿主。

一項芬蘭的研究稱，大部分豬場有獨特的毛腸短狀螺旋體基因型，不同的豬場很難找到相同的基因型。豬場內的基因型似乎相當穩(wěn)定，因為在3年后重新進行檢測的3個豬場仍找到了相同的基因型。

毛腸短狀螺旋體通過糞便排出，排毒可以是間歇性的，某些豬可能持續(xù)很多星期。它對環(huán)境有相對的抵抗力，在4℃的湖水中能存活66 d，在10℃土壤中存活119 d，在含10%豬糞的土壤以及糞便中可存活210 d。毛腸短狀螺旋體對許多常用的消毒劑敏感，盡管某些消毒劑的效力因糞便這樣的有機物而降低。

3 發(fā)病機制

毛腸短狀螺旋體的細胞是活動的，不同菌株吸引黏蛋白的能力不同。一旦進入大腸，螺旋體能穿透覆蓋在結腸黏膜上的黏液。在感染的初級階段，毛腸短狀螺旋體細胞能大量附著在盲腸和結腸上皮細胞的腸腔表面。附著發(fā)生在隱窩單位之間的成熟的頂端腸上皮細胞，但不會發(fā)生在隱窩較深處的未成熟細胞。

毛腸短狀螺旋體的定植和/或疾病表達會受到飼糧影響。對豬場風險因素的分析顯示，使用自家混合的和/或非顆粒飼糧能降低患病率。豬的試驗性飼糧中添加羧甲基纖維素能增加腸道內容物的黏度，加強毛腸短狀螺旋體的定植。含高水平可溶性非淀粉多糖（可溶性纖維）的谷物，如大麥和黑麥，也可以增加黏度，因此能增強毛腸短狀螺旋體的定植。與此相一致的是，飼喂豬的飼糧以煮熟的米飯（高度可消化和低水溶性纖維）為主，與飼喂常規(guī)飼糧相比能減少毛腸短狀螺旋體的定植。飼喂顆粒飼料而非玉米粉會增加定植的風險，但發(fā)酵的液體飼料或乳酸對定植沒有影響。

4 臨床癥狀

PIS/PCS最常發(fā)生于斷奶后不久或剛混養(yǎng)在一起的生長豬飼喂新的飼糧，但也可能發(fā)生于肥育豬，偶爾發(fā)生于妊娠母豬和近期剛引進的種豬。PIS/ PCS可能感染同一豬舍內的豬或出現在不同日齡的豬中。同一豬場的斷奶豬、生長豬和肥育豬能表現出各種癥狀，并非所有感染的豬都出現腹瀉。不過，亞臨床感染仍會抑制生長速度。

最初的臨床癥狀是肋腹空鼓，有松軟、黏稠的糞便通過，這可能是肥育豬唯一的癥狀，但斷奶豬和生長豬通常形成綠色或褐色水樣或黏液樣腹瀉，偶爾包含厚稠黏液，有時有血斑。腹瀉通常是自限性的，持續(xù)2～14 d，不過有些豬可能會復發(fā)。感染豬出現發(fā)育不良，會陰沾有糞便，有時發(fā)燒，但通常會繼續(xù)采食。糞便稀松的豬出現顯著的體況損失，飼料轉化率降低，延遲達到上市體重。

接種試驗中，毛腸短狀螺旋體通過糞便排毒可達2～7 d，不過潛伏期可能會延長至20 d。試驗感染條件下，17%～100%的豬只會感染，17%～67%的豬只會發(fā)生腹瀉，8%～100%的豬只有結腸炎?；加蠵IS/ PCS的豬只會有并發(fā)的疾病加重疾病的發(fā)生，特別是腸道疾病。

5 病變

大體病變局限于盲腸和結腸，可能是微小的，尤其是在早期階段。臨床癥狀出現后不久，盲腸和結腸變得松弛，水腫的漿膜表面充滿液體，腸系膜和結腸淋巴結腫大。大腸內容物通常呈大量的水樣綠色或黃色的泡沫狀，黏膜表面可能出現輕度充血，病灶出現糜爛和壞死。炎癥后期可導致多病灶糜爛、潰瘍或黏膜出血性結腸炎。黏膜增厚，表面可見局部瘀血或點狀出血。在慢性病例或消退性病變中，出血可能會被附著的小塊纖維蛋白所覆蓋，壞死性物質和呈錐形鱗狀物附著在黏膜上的食糜。

病變一般局限于黏膜和黏膜下層，也可延伸到肌層。黏膜通常增厚、水腫，偶見充血，以膨脹伸長的隱窩充滿黏液、細胞碎片和退化的炎癥細胞為特征。毛腸短狀螺旋體存在于隱窩和固有層可能與嗜中性粒細胞的胞吐作用（隱窩膿腫）和固有層中性粒細胞和淋巴細胞的混合浸潤有關。慢性感染中，固有層通常受到大量單核細胞、淋巴細胞和漿細胞浸潤。隱窩細胞有絲分裂的速度加快，隱窩單位之間的黏膜表層可能出現不成熟的立方形或鱗狀上皮細胞。結腸表面的柱狀上皮細胞由螺旋體的暗紋覆蓋，細胞的一端附著在螺旋體上，形成特征性的“假刷狀緣”。這種附著對于PIS/PCS具有診斷性，但不是每個病例都能觀察到這種現象。

毛腸短狀螺旋體細胞可在膨脹的結腸隱窩內觀察到，穿過結腸上皮細胞之間的緊密連接，在杯狀細胞和固有層內發(fā)生浸潤。毛腸短狀螺旋體可從有嚴重臨床疾病或免疫受損的人體血流中分離到。目前還沒有豬有全身擴散或螺旋體血癥的記錄，但不能排除其發(fā)生。上皮細胞損傷后，隨后發(fā)生局部浸潤和結腸炎，能引起盲腸和結腸內容物中水含量增加，同時產生過多的黏液。上皮細胞糜爛導致被未成熟細胞替代，結腸表面對水、電解質和揮發(fā)性脂肪酸的吸收減少，進而導致飼料轉化率降低，增重減少。

6 診斷

受感染的豬應進行尸檢。同一個生產批次豬的體重可能并不均勻。通常可觀察到局部區(qū)域發(fā)生輕度或偶發(fā)嚴重的結腸炎。使用特異性抗體進行免疫組化染色，或使用特異性寡核苷酸探針的熒光原位雜交技術（Fluorescence in situ hybridization,FISH）能用于確認毛腸短狀螺旋體以黏附在結腸腸細胞表面的形式存在于膨脹的腸道隱窩，偶爾出現在固有層。

PIS/PCS的確診需要出現毛腸短狀螺旋體，但能從糞便中分離獲得并不總是與腹瀉或者附著在上皮有關，其重要性需在完整的診斷調查背景下給予解釋。從結腸壁獲得的拭子用于準備相差顯微鏡的濕涂片，或將它們固定后使用革蘭氏染色觀察。CVS培養(yǎng)基用于分離毛腸短狀螺旋體較好，而BJ培養(yǎng)基可能抑制毛腸短狀螺旋體的生長。

診斷通常使用特異性PCR檢測進行，靶基因是16S rRNA、23S rRNA或nox基因。雙重和多重PCR有時還能同時檢測其它腸道病原體。將螺旋體定量化的實時PCR試驗檢測螺旋體也已有報道。限制性片段長度多態(tài)性（restriction fragment length polymorphism,RFLP）分析可用于鑒定毛腸短狀螺旋體分離株。使用針對毛腸短狀螺旋體特定外膜蛋白產生的單抗進行的間接熒光抗體檢測，具有用于糞便診斷的潛力，但基于單抗從糞便中對毛腸短狀螺旋體進行免疫磁珠分離，與培養(yǎng)后使用PCR檢測相比，并不能夠提高檢測的敏感性。迄今為止，還沒有常規(guī)的商業(yè)檢測可用來檢測毛腸短狀螺旋體菌種特異性血清抗體。

7 防控

抗生素治療可用于減少毛腸短狀螺旋體感染，維持豬的生產性能，同時提高豬的福利。此外，近期引進未受感染的豬、改變飼糧或出現其它應激因素，可能需要預防患病率的突然上升。受感染的豬應通過飲水給藥或飼料投藥進行治療。盡管有關毛腸短狀螺旋體體外抗菌素藥敏性的信息有限，很多對豬痢疾短螺旋體有效的抗菌素在進行對毛腸短狀螺旋體分離株有效性的檢測時，已表現出低水平的最低抑菌濃度（minimum inhibitory concentration,MIC），包括泰妙菌素、伐奈莫林、卡巴氧、地美硝唑，其次是林可霉素。幾乎沒有菌株被發(fā)現對泰樂菌素易感，對某些抗生素具有抗性已有記錄，包括泰妙菌素。奧喹多斯可能是一種有效的預防藥物，其對毛腸短狀螺旋體的MIC值<1.0 μg/mL，從飼料中添加100 mg/kg奧喹多斯的豬群中分離不到毛腸短狀螺旋體。

限制豬接觸污染環(huán)境的管理策略能降低PIS/PCS的影響。更換連續(xù)流動系統(tǒng)，并使用全進全出系統(tǒng)能降低感染風險。因為有儲存宿主（如野鳥）的存在，所以避免毛腸短狀螺旋體進入豬群是困難的。目前，尚無有效的疫苗用于預防毛腸短狀螺旋體病。有一種自體疫苗能誘導全身性的抗體滴度，但攻毒后豬仍會被毛腸短狀螺旋體定植并發(fā)生腹瀉。

（編輯：柳青）

S858.285.1

A

1002-1957(2016)05-0111-02

2016-03-16

翁善鋼（1985-），男，江蘇常熟人，碩士，主要從事各類動物疫病流行病學及其防控對策研究.E-mail：sgweng@163.com