楊　林，戴　蕓

（1.黃石市中心醫(yī)院（湖北理工學(xué)院附屬醫(yī)院）藥學(xué)部，湖北黃石435000；2.腎臟疾病發(fā)生與干預(yù)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北黃石435000）

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HPLC法測(cè)定注射用埃索美拉唑鈉的含量

楊林1，2，戴蕓1，2

（1.黃石市中心醫(yī)院（湖北理工學(xué)院附屬醫(yī)院）藥學(xué)部，湖北黃石435000；2.腎臟疾病發(fā)生與干預(yù)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北黃石435000）

摘要：目的：建立反相高效液相色譜法測(cè)定注射用埃索美拉唑鈉含量的方法。方法：采用Diamonsil C18色譜柱（4.6mm×150mm，5μm），流動(dòng)相為20mMK2HPO4緩沖液（pH值6.86）-甲醇（35∶65，V/V），流速為1mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為302nm。結(jié)果：埃索美拉唑鈉的線性范圍為50～200μg·mL-1，r=0.9997，平均回收率99.2%，RSD=0.6%（n=9）。結(jié)論：該方法快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，適用于注射用埃索美拉唑鈉的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：HPLC；埃索美拉唑鈉；注射；含量測(cè)定

質(zhì)子泵抑制劑（proton pump inhibitor，PPI）在臨床上主要應(yīng)用于治療酸相關(guān)性疾病，主要包括潰瘍病、胃食管反流?。℅ERD）和胃泌素瘤的治療[1]。第一個(gè)PPI——奧美拉唑（omeprazole，OPZ）于1988年上市[2,3]。OPZ是兩種光學(xué)異構(gòu)體的消旋混合物（S-奧美拉唑和R-奧美拉唑），其中S-奧美拉唑被稱為埃索美拉唑（esomeprazole），是第一個(gè)發(fā)展為異構(gòu)體的PPI，主要用于治療GERD、幽門螺桿菌（HP）陽(yáng)性的消化性潰瘍及與胃酸有關(guān)的消化系統(tǒng)紊亂性疾病，其血藥濃度和生物利用度比奧美拉唑或R-奧美拉唑，且抑酸作用更強(qiáng)[4，5]。本文建立了測(cè)定注射用埃索美拉唑鈉含量的高效液相色譜法，方法專屬性好，靈敏度高，快速準(zhǔn)確。

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器、藥品與試劑

日立L- 7000型高效液相色譜系統(tǒng)，配有L- 7110型泵、L- 7200型自動(dòng)進(jìn)樣器、L- 7420型UV檢測(cè)器；XW- 80A旋渦混合器（上海青浦滬西儀器廠）；BS110S型電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）；KQ 500DE型數(shù)控超聲波清潔器（昆山市超聲儀器有限公司）。

埃索美拉唑?qū)φ掌罚ㄖ貞c萊美藥業(yè)股份有限公司）；注射用埃索美拉唑鈉（阿斯利康制藥有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20093314，規(guī)格：40mg（以C17H19N3O3S計(jì)））；甲醇（G.R.美國(guó)Fisher Scientific公司）；KH2PO4（A.R.國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；水為純凈水；其它試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱為Diamonsil C18色譜柱（150mm×4.6 mm，5μm），柱溫為室溫，流動(dòng)相為20mMKH2PO4緩沖液（pH值6.86）-甲醇（35∶65，V/V），流速為1mL· min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為302nm，進(jìn)樣量為20μL。

在上述色譜條件下，埃索美拉唑鈉的保留時(shí)間為5.29min。埃索美拉唑?qū)φ掌泛桶Ｋ髅览蚬┰嚻飞V圖見(jiàn)圖1。

圖1　埃索美拉唑色譜圖Fig.1 Chromatograms of esomeprazole

結(jié)果表明，在該色譜條件下，空白基質(zhì)中的雜質(zhì)不干擾埃索美拉唑的測(cè)定。

2.2溶液制備

2.2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱取埃索美拉唑鈉對(duì)照品約10mg（以埃索美拉唑計(jì)），置25mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.2.2供試品溶液的制備精密稱取本品適量（相當(dāng)于埃索美拉唑100mg）置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，作為供試液。

2.3線性關(guān)系

精密量取“2.2.1”項(xiàng)下對(duì)照品溶液1.25、2、2.5、3.75、5mL分別置于10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，依“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定，以埃索美拉唑濃度（X）為橫坐標(biāo)，埃索美拉唑峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，做線性回歸，得相應(yīng)的回歸方程Y=6.842X- 0.584，r =0.9997，顯示埃索美拉唑血藥濃度在50～200μg· mL-1的范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

2.4精密度試驗(yàn)

精密量取“2.2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣20μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。計(jì)算得RSD為0.7%（n=6），結(jié)果顯示本法精密度良好。

2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“2.2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液于24h內(nèi)，按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣20μL，每隔3h測(cè)定一次，記錄色譜圖。計(jì)算得連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。計(jì)算得RSD為0.5%，結(jié)果顯示該對(duì)照品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取3份已知含量的同一批號(hào)的樣品適量（相當(dāng)于埃索美拉唑10mg），分別置50mL容量瓶中，分別加入埃索美拉唑鈉對(duì)照品10、20、30mg，加5mL甲醇溶解后加水制成3個(gè)不同濃度的溶液，依法各測(cè)定3次，計(jì)算回收率分別為98.6%、98.3%和99.6%；平均回收率為98.8%，RSD=0.6%，結(jié)果顯示本法準(zhǔn)確度好。

2.7樣品含量測(cè)定

精密量取“2.2.2”項(xiàng)下供試液20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取埃索美拉唑鈉對(duì)照品適量同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算其含量，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　注射用埃索美拉唑鈉含量測(cè)定結(jié)果Tab.1 Content of esomeprazole sodium for injection

3　討論

埃索美拉唑鈉是新型的PPI，中文全稱5-甲氧基- 2-（（S）-（（4-甲氧基- 3,5-二甲基- 2-吡啶基）甲基）亞硫酰基）- 1H-苯并咪唑，較以往的PPI能更有效地緩解GERD癥狀，提供更有效的長(zhǎng)期維持治療。本研究采用HPLC法建立注射用埃索美拉唑鈉的含量測(cè)定方法，選擇302nm作為測(cè)定吸收波長(zhǎng)。研究發(fā)現(xiàn)，柱溫對(duì)化合的分離和峰形沒(méi)有顯著影響，故選擇柱溫為室溫。

參考近幾年發(fā)表的文獻(xiàn)資料[6-8]，對(duì)多種不同的流動(dòng)相[如磷酸鹽緩沖液（取KH2PO40.687g和KH2PO40.102g，加水適量使溶解并稀釋至1000mL，H3PO4調(diào)節(jié)pH值至7.6）-乙腈（75∶25，V/V）；20mMNH4AC緩沖液（pH 7.6）：乙腈（72∶28，V/V）等]進(jìn)行預(yù)試。經(jīng)過(guò)摸索，結(jié)果顯示20mMKH2PO4緩沖液（pH值6.86）-甲醇（35∶65，V/V）為流動(dòng)相時(shí)峰形較好，保留時(shí)間合適，主峰、雜質(zhì)峰能達(dá)到基線分離。

參考文獻(xiàn)

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［3］Talpes S, Knoerzer D, Huber R, et al. Esomeprazole MUPS 40 mg tablets and esomeprazole MUPS 40 mg tablets encapsulated in hard gelatine are bioequivalent［J］. Int J Clin Pharmacol Ther, 2005, 43 （1）: 51- 56.

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化工安全

Determination of esomeprazole sodium for injection by HPLC

YANG Lin1，2，DAI Yun1，2
（1.Department of Pharmacy, Huangshi Central Hospita（lAffiliated Hospital of Hubei Polytechnic University）, Huangshi 435000, China；2.Hubei Key Laboratory of Kidney Disease Pathogenesis and Intervention, Huangshi 435000, China）

Abstract：Objective: To establish a method for the determination of esomeprazole sodium for injection by HPLC. Method: The analysis was performed on a Diamonsil C18 column（4.6mm×150mm，5μm）with the mobile phase of 20mM potassium dihydrogen phosphate buffer solution（pH6.86）-methanol（35∶65, V/V）at a flow rate of 1 mL·min-1. The wavelength used for detection was 302 nm. Result: The calibration curve of esomeprazole was linear in the range of 50～200μg·mL-1（r=0.9997）. The mean recoveries were 99.2%（RSD=0.6%，n=9）. Conclusion: The method was proved to be rapid, simple and accurate and have been successfully applied for determination of esomeprazole sodium for injection.

Key words：HPLC；esomeprazole sodium；injection；content determination

通訊作者：戴蕓（1974-），女，大專學(xué)歷，主管藥師。

作者簡(jiǎn)介：楊林（1971-），男，湖北省黃石市人，主管藥師，1990年畢業(yè)于黃石衛(wèi)校藥劑專業(yè)，研究方向：臨床藥學(xué)。

收稿日期：2015- 08- 31

中圖分類號(hào)：R917

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

DOI：10.16247/j.cnki.23-1171/tq. 20160131