林琎，高云，慕衛(wèi),#，王開運,*，許輝，劉杰

1. 山東農(nóng)業(yè)大學 植物保護學院，泰安 271018 2. 山東農(nóng)業(yè)大學農(nóng)藥環(huán)境毒理研究中心，泰安 271018 3. 山東省高校農(nóng)藥毒理與應用技術(shù)省級重點實驗室，泰安 271018 4. 山東省聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司，濟南 250100

新型殺菌劑氟吡菌胺對9種環(huán)境生物的急性毒性及其在斑馬魚體內(nèi)的生物富集

林琎1,3，高云1,2，慕衛(wèi)1,2,#，王開運1,3,*，許輝4，劉杰4

1. 山東農(nóng)業(yè)大學 植物保護學院，泰安 271018 2. 山東農(nóng)業(yè)大學農(nóng)藥環(huán)境毒理研究中心，泰安 271018 3. 山東省高校農(nóng)藥毒理與應用技術(shù)省級重點實驗室，泰安 271018 4. 山東省聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司，濟南 250100

為評價新型殺菌劑氟吡菌胺對環(huán)境生物的毒性風險，避免其在使用過程中對我國特有的環(huán)境生物產(chǎn)生危害，測定了氟吡菌胺對意大利蜜蜂、日本鵪鶉、斑馬魚、家蠶、斜生柵藻、大型溞、玉米螟赤眼蜂、赤子愛勝蚓和黑斑蛙蝌蚪等9種代表性環(huán)境生物的急性毒性，并以斑馬魚為試材，研究了氟吡菌胺的生物富集性，即根據(jù)魚類急性毒性結(jié)果LC50(96 h)=1.489 mg·L-1，設計生物富集試驗水樣濃度為LC50的1/2、1/10和1/100，即0.745 mg·L-1、0.149 mg·L-1和0.0149 mg·L-1，連續(xù)暴露8 d，采用液相色譜法測定3個濃度下氟吡菌胺在斑馬魚體內(nèi)的富集量。結(jié)果表明，氟吡菌胺對斑馬魚、斜生柵藻和大型溞3種水生生物的急性毒性為中毒級，對黑斑蛙蝌蚪急性毒性為高毒級，其對蜜蜂、鳥類、家蠶、蚯蚓和天敵赤眼蜂等環(huán)境生物均為低毒或低風險；斑馬魚在0.745、0.149和0.0149 mg·L-1的氟吡菌胺水溶液中暴露192 h時，生物富集系數(shù)BCF分別為33.65、26.39和193.25；根據(jù)化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則評價標準，10

氟吡菌胺；環(huán)境生物；急性毒性；生物富集因子

氟吡菌胺(fluopicolide)是德國拜耳公司開發(fā)的一種新型苯甲酰胺類內(nèi)吸性殺菌劑，化學名稱為2，6-二氯-N-[(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基)甲基]苯甲酰胺[1]，是德國拜耳公司開發(fā)的一種新型苯甲酰胺類內(nèi)吸性殺菌劑，主要用于防治蔬菜和葡萄上的常見卵菌綱病害，如立枯病、霜霉病、疫病、晚疫病、猝倒病等，具有保護和廣譜治療作用。氟吡菌胺具有很多含氟農(nóng)藥在性能上相對用量少、毒性低、藥效高、易代謝等特點[2]。自2005年在多個國家上市以來，氟吡菌胺在馬鈴薯、葡萄、辣椒、萵苣、黃瓜、大白菜、蔥、玫瑰、煙草、咖啡等多種作物上均有使用[3-10]，且銷量逐年上升。目前，國內(nèi)對氟吡菌胺的研究主要集中在毒力和藥效方面，而其環(huán)境風險評估研究較少。雖然氟吡菌胺對部分環(huán)境生物的急性毒性數(shù)據(jù)可在美國國家環(huán)境保護局(US EPA)網(wǎng)站上查詢到，如：山齒鶉急性經(jīng)口LD50>2 250 mg·kg-1，鴨急性經(jīng)口LD50>2 250 mg·kg-1，虹鱒LC50=0.36 mg·L-1(96 h)，藍鰓太陽魚LC50=0.75 mg·L-1(96 h)，大型溞EC50>1.8 mg·L-1(48 h)，水藻EC50>4.3 mg·L-1(72 h)，蚯蚓LC50>1 000 mg·kg-1(14 d)，蜜蜂觸殺LD50>100 mg·蜂-1，但對我國而言，這些數(shù)據(jù)僅供參考，為避免氟吡菌胺在使用過程中對我國特有的一些環(huán)境生物產(chǎn)生危害，有必要研究其對國內(nèi)代表性環(huán)境生物的急性毒性，其中包括家蠶、赤眼蜂等國內(nèi)特有非靶標生物。初步研究結(jié)果表明，氟吡菌胺對水生生物表現(xiàn)出較高的毒性，故采用斑馬魚作為生物試材，進行了3個濃度下的生物富集試驗，以期明確其施用后對水生生物的潛在危害，為氟吡菌胺的環(huán)境毒理試驗研究及其安全使用提供參考。

1 材料與方法(Materials and methods)

1.1 儀器與試劑

97%氟吡菌胺(CAS號：239110-15-7)，由山東農(nóng)業(yè)大學農(nóng)藥環(huán)境毒理研究中心提供，質(zhì)量分數(shù)為50%的蔗糖水、丙酮、BG11培養(yǎng)基等。

FA2004電子天平(精度0.0001 g，上海精天電子儀器有限公司)；CXZ380B光照培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠)；微量點滴儀(英國BURKARD SCIENTIFIC)；JPB-607A型便攜式溶解氧測定儀(上海精密科學儀器有限公司)；手持式酸度計(美國Beckman Coulter)；H193735水硬度測定儀(HANNA)；TES-1330A型數(shù)位式照度計(臺灣泰仕電子工業(yè)股份有限公司)；SC-3A50加濕器(美的集團股份有限公司)；蜂盒(8 cm×12 cm)；不銹鋼鳥籠；灌胃器；指形管；Agilent 1200高效液相色譜儀(C18反相柱，粒徑5 μm，4.6 mm×250 mm，美國安捷倫公司)；MD200-1A型氮吹儀(杭州奧盛儀器有限公司)；C18固相萃取小柱(CLEANERT，博納艾杰爾科技)；甲醇、乙腈(色譜純，F(xiàn)isher公司)；水(超純水)；氯化鈉、氯化鈣(分析純)等。

1.2 受試生物

意大利蜜蜂(Apis mellifera)，選擇成年工蜂作為試驗測試的標準蜂，體重約0.10 g；日本鵪鶉(Coturnix japonica)，同批孵化，30日齡，雌雄各半，體重(100±10) g；藍斑馬魚(Brachydanio rerio)，抽檢體長(2.59±0.305) cm；家蠶(Bombyx mori)，品種為春蕾×鎮(zhèn)珠，試驗用蠶為二齡起蠶；斜生柵藻(Scenedesmus obliquus)，引種于中國科學院水生生物研究所淡水藻種庫，使用BG11培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接擴大培養(yǎng)；大型溞(Daphnia magna)，引種于中國疾病預防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所，為62D.M純品系生物株，選用實驗室條件下，孤雌繁殖3代以上、出生時間為6～24 h、健康活潑的幼溞；玉米螟赤眼蜂(Trichogramma ostriniae)，用麥蛾卵繁蜂；赤子愛勝蚯蚓(Eisenia foetida)，挑選已出現(xiàn)繁殖環(huán)帶的健康成蚓，體重在400～550 mg之間的個體用于試驗；黑斑蛙蝌蚪(Tadpole rana nigromaculata)，抽檢體長(1.60±0.105) cm。

1.3 試驗方法

1.3.1 氟吡菌胺對9種環(huán)境生物的急性毒性試驗

將氟吡菌胺用吐溫-80助溶后，用超純水配制成1 000 mg·L-1儲備液備用，本實驗使用的助溶劑濃度不高于0.1 mg·L-1。

氟吡菌胺對9種環(huán)境生物的急性毒性試驗均參考《化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則》[10]中的推薦試驗方法進行。

1.3.2 氟吡菌胺生物富集試驗分析方法的建立

1.3.2.1 氟吡菌胺標準曲線和最低檢出限

參照張小軍等(2011)[11]方法。液相色譜檢測條件：流動相為V(甲醇)∶V(水)=75∶25，檢測波長265 nm，流速1.0 mL·min-1，柱溫為20 ℃。

1.3.2.2 氟吡菌胺在水中溶解度的測定

參照農(nóng)藥理化性質(zhì)測定試驗導則中的方法[12]。稱取97.0%氟吡菌胺原藥0.0515 g于圓底燒瓶中，加入50 mL的超純水，將圓底燒瓶置于(30±1) ℃的水浴中，用攪拌棒攪拌30 min后，置于(20±1) ℃的水浴中攪拌30 min，10 000 r·min-1離心5 min，取上清液過0.45 μm水系濾膜，液相色譜檢測。

1.3.2.3 氟吡菌胺在水中添加回收率試驗

方法1：稱取0.0500 g的1 000 mg·L-1儲備液，超純水定容至50 mL，得到500 mg·L-1母液；用超純水梯度稀釋，得到50、5、0.5和0.1 mg·L-1水樣，分別取水樣5 mL加入5 mL甲醇，經(jīng)0.22 μm有機濾膜過濾，液相色譜檢測，外標法定量。

方法2：取0.5000 g的1 000 mg·L-1儲備液，超純水定容至500 mL，得到100 mg·L-1儲備液；用超純水稀釋得到0.015 mg·L-1水樣，取50 mL水樣，過C18固相萃取小柱(500 mg，6 mL)富集，小柱先用5 mL甲醇活化，5 mL超純水平衡，緩慢加入50 mL的0.015 mg·L-1水樣后，用10 mL甲醇淋洗，只接收淋洗液，氮吹后用甲醇定容至2 mL，過0.22 μm有機濾膜，液相色譜檢測，外標法定量。

1.3.2.4 氟吡菌胺在魚肉中添加回收率試驗

參照余向陽等(2008)的方法[13]，略有改動。魚肉中樣品添加量分別為5 mg·kg-1和0.5 mg·kg-1，混合均勻，靜置過夜。

魚肉樣品前處理：取魚肉樣品，加入2 g無水硫酸鈉混勻后，轉(zhuǎn)入10 mL離心管，用5 mL乙腈清洗裝魚肉的小燒杯，清洗液倒入離心管，勻漿2 min，于4 000 r·min-1下離心10 min，取上清液，殘渣再用5 mL乙腈提取一次，合并提取液，室溫氮氣吹干后，用正己烷定容至2 mL，氟羅里硅土小柱凈化。

凈化：在內(nèi)徑1.5 cm、長20 cm左右的聚乙烯層析柱中依次填入1.0 cm高的無水硫酸鈉、3.0 cm高的佛羅里硅土和1.0 cm高的無水硫酸鈉，用5 mL正己烷活化柱子，將上述2 mL提取液加入到柱頂，用5 mL正己烷洗滌，再用15 mL淋洗液(V(正己烷)∶V(二氯甲烷)=1∶1)進行洗脫，收集洗滌液和洗脫液，氮氣吹干后，用甲醇定容至2 mL，超聲5 min，過0.22 μm有機濾膜，液相色譜檢測，用氟吡菌胺甲醇標樣外標法定量。

1.3.3 氟吡菌胺對斑馬魚的生物富集試驗

采用3個月大藍斑馬魚幼魚為供試生物，試驗依據(jù)《化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價準則》標準方法進行[14]。根據(jù)魚類急性毒性結(jié)果：LC50(96 h)=1.489 mg·L-1，設計試驗富集水樣濃度為其1/2、1/10和1/100，即0.745 mg·L-1、0.149 mg·L-1和0.0149 mg·L-1。

取10%氟吡菌胺懸浮劑用超純水配制15 L藥液，每個濃度重復2次。每缸放入250條魚，共1 500條。每天喂食1次，每缸均勻喂食2 g魚食，于0、24、48、96、144和192 h分別取各處理中水樣與魚樣，測定水樣和魚樣中的農(nóng)藥含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

氟吡菌胺對9種環(huán)境生物的急性毒性試驗數(shù)據(jù)采用寇氏法分析，分別計算氟吡菌胺對9種環(huán)境生物的急性毒性端點數(shù)據(jù)值及其95%置信區(qū)間。

氟吡菌胺對斑馬魚的生物富集試驗，魚體對供試物的生物富集系數(shù)(BCF)等于平衡時魚體內(nèi)的供試物含量(mg·kg-1)與平衡時水體中的供試物含量(mg·L-1)的比值，按照BCF的大小，對農(nóng)藥生物富集等級進行劃分。

2 結(jié)果與分析(Results and analysis)

2.1 氟吡菌胺對9種環(huán)境生物的急性毒性結(jié)果

急性毒性試驗結(jié)果表明，氟吡菌胺對意大利蜜蜂接觸毒性和經(jīng)口毒性的LD50(48 h)>100 μg·蜂-1，對日本鵪鶉經(jīng)口急性毒性LD50(168 h)>1 000 mg·kg-1體重，對赤子愛勝蚓急性毒性LC50(14 d)>100 mg·kg-1土，對家蠶急性毒性LC50(96 h)為276.53 mg·L-1，即氟吡菌胺對蜜蜂、鵪鶉、蚯蚓和家蠶均為低毒級；對玉米螟赤眼蜂為低風險性(安全系數(shù)>264.1)。對斑馬魚急性毒性LC50(96 h)為1.489 mg·L-1，對植物藻急性抑制毒性EC50(72 h)為1.238 mg·L-1、大型溞急性活動抑制EC50(48 h)為4.155 mg·L-1，即氟吡菌胺對斑馬魚、植物藻和大型溞3種水生生物的急性毒性均為中毒級；對黑斑蛙蝌蚪急性毒性LC50(96 h)為0.943 mg·L-1，為高毒級。經(jīng)與US EPA數(shù)據(jù)(英國郝特福德大學生命科學院農(nóng)業(yè)與環(huán)境研究室匯總的全球可用農(nóng)化信息)比對，結(jié)果大致相同。但本研究評價了該藥劑對我國特有非靶標生物如家蠶、天敵赤眼蜂和黑斑蛙等的毒性，可避免氟吡菌胺在我國施用產(chǎn)生的潛在風險性，詳見下表1。

2.2 氟吡菌胺生物富集試驗分析方法建立2.2.1 氟吡菌胺溶解度、標準曲線和最低檢出限

經(jīng)過3次溶解度平行測定，得出氟吡菌胺在水中的溶解度為(4.065±0.214) mg·L-1，具體見表2。用氟吡菌胺甲醇系列濃度溶液進行液相色譜分析，保留時間為7.4～7.6 min，其濃度和峰面積得出標準曲線為y=11455x+1167.7，R2=1，最低檢出限為0.03 mg·L-1×20L=6×10-7mg。

表1 美國國家環(huán)境保護局(US EPA)數(shù)據(jù)和本研究結(jié)果的對比Table 1 Comparison between US EPA data and results of the current study

表2 氟吡菌胺在水中溶解度Table 2 Water solubility of fluopicolide

2.2.2 氟吡菌胺在水中的添加回收率

氟吡菌胺在超純水中的添加回收率實驗設計5個添加回收水平，前4個處理方法一致，均為水樣與甲醇體積比為1∶1混合后過膜檢測；0.015 mg·L-1的水樣處理方法為，取50 mL水樣過C18固相萃取柱，濃縮后過膜檢測，結(jié)果見表3。回收率均在95%～118.38%之間，符合分析試驗對添加回收率的要求。

2.2.3 氟吡菌胺在魚肉中的添加回收率

氟吡菌胺在魚肉中的添加回收率實驗設計2個添加回收水平(0.5和5 mg·kg-1)，結(jié)果見表4。洗滌液和3次5 mL的洗脫液分別接收后測定，總回收率均在91%～107%之間，符合分析試驗對添加回收率的要求。

可見，洗滌液、洗脫液1、2、3中均可檢出氟吡菌胺，故洗滌液和洗脫液均應當收集，且確定洗脫用溶劑體積為15 mL。

2.3 氟吡菌胺對斑馬魚的生物富集試驗結(jié)果

用10%氟吡菌胺懸浮劑配制0.745 mg·L-1、0.149 mg·L-1和0.0149 mg·L-1的3個濃度水溶液，將2.5 cm左右斑馬魚放入持續(xù)染毒192 h，每天測量水樣中氟吡菌胺的含量和魚體中的氟吡菌胺的含量，結(jié)果見表5，典型液相色譜圖見圖1。

表3 氟吡菌胺在水中的添加回收率Table 3 Recoveries of fluopicolide in water

表4 氟吡菌胺在魚肉中的添加回收率Table 4 Recoveries of fluopicolide in fish

注：洗滌液為通過固相萃取柱的正己烷，洗脫液1、2、3分別為15 mL淋洗液中的第1個5 mL、第2個5 mL和第3個5 mL，分別接收后檢測氟吡菌胺的含量。

Note: Washing liquid is the n-hexane which flows through the solid phase extraction column. Elution liquid is in a total volume of 15 milliliter, and elution liquid 1, 2 and 3 are the first 5 milliliter of the eluent, the second 5 milliliter and the third 5 milliliter. Ater elution, the elution liquid was collected to detect the concontraiton of fluopicolide.

表5 氟吡菌胺在斑馬魚中的生物富集結(jié)果Table 5 Bioaccumulation results of fluopicolide in Brachydanio rerio

圖1 斑馬魚對氟吡菌胺生物富集的典型液相色譜圖注：A水樣空白對照；B魚樣空白對照；C水樣0 d分析(初始濃度為0.745 mg·L-1)；D水樣8 d分析(初始濃度為0.745 mg·L-1)；E魚樣8 d分析(水樣初始濃度0.0149 mg·L-1)；F魚樣8 d分析(水樣初始濃度0.745 mg·L-1)。Fig. 1 Typical liquid chromatogram for bioaccumulation of fluopicolide in zebrafishNote: A. Water sample blank control; B. Fish sample blank control; C. Water sample colleted at the very beginning (on day 0) (Initial concentration in water is 0.745 mg·L-1); D. Water sample colleted at the eighth day (Initial concentration in water is 0.745 mg·L-1); E. Fish sample colleted at the eighth day (Initial concentration in water is 0.0149 mg·L-1); F. Fish sample colleted at the eighth day (Initial concentration in water is 0.745 mg·L-1).

由表5可知，氟吡菌胺在水樣中含量隨時間逐漸降低，魚體中氟吡菌胺的含量逐漸升高，通過計算，192 h時，0.745 mg·L-1、0.149 mg·L-1和0.0149 mg·L-1氟吡菌胺的生物富集系數(shù)BCF分別為33.65、26.39和193.25。根據(jù)化學農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則評價標準，10

3 討論(Discussion)

就氟吡菌胺而言，US EPA數(shù)據(jù)庫中僅有對蜜蜂接觸毒性的報道，而缺少對蜜蜂經(jīng)口毒性、家蠶、赤眼蜂、兩棲類的毒性數(shù)據(jù)，本文填補了這些急性毒性數(shù)據(jù)的空白。首先，氟吡菌胺對蜜蜂不論接觸毒性還是經(jīng)口毒性，均大于100 μg·蜂-1，為低毒級，表明氟吡菌胺對有益昆蟲(蜜蜂)有較高的安全性，這意味著該藥在施用過程中，即使噴施在開花期的作物上，蜜蜂吸食后引起的死亡風險仍可接受；其次，氟吡菌胺對家蠶的毒性LC50(96 h)=276.53 mg·L-1，為低毒級，表明氟吡菌胺在經(jīng)濟昆蟲(家蠶)所食用的桑葉上也可以施用，可在桑葉上用于防治卵菌綱病害；此外，氟吡菌胺對天敵玉米螟赤眼蜂的安全系數(shù)為264.1，即在田間推薦用量的264.1倍下施用，也不會對赤眼蜂造成危害，對該類天敵為低風險，這更增加了該藥劑在推廣過程中的安全性。鑒于氟吡菌胺對天敵赤眼蜂低風險，也可考慮在已經(jīng)投放天敵赤眼蜂進行生物防治的地塊，同時施用氟吡菌胺防治卵菌綱病害。

本文得出氟吡菌胺對兩棲類的急性毒性LC50(96 h)=0.943 mg·L-1，毒性等級為高毒，結(jié)合氟吡菌胺對藻類、魚類、溞類的急性毒性數(shù)據(jù)，可知氟吡菌胺對水生生物的毒性均在中高毒，這4種水生生物對同濃度氟吡菌胺的敏感性大小為：藻類>兩棲類>魚類>大型溞類，因此，可用藻類作為氟吡菌胺環(huán)境監(jiān)測的最敏感試材，減少使用兩棲類和魚類等進行試驗造成的成本浪費，同樣也體現(xiàn)出對脊椎動物的福利。

氟吡菌胺對魚的急性毒性、對胚胎、仔魚和成魚慢性毒性試驗以及在魚體內(nèi)的富集，均表明氟吡菌胺對魚類有一定影響[15]，US EPA數(shù)據(jù)庫顯示氟吡菌胺的生物富集系數(shù)為121，屬于中等富集性農(nóng)藥[16]，本論文中，采用斑馬魚對氟吡菌胺進行了生物富集的研究，0.745 mg·L-1、0.149 mg·L-1和0.0149 mg·L-1濃度下暴露192 h后，氟吡菌胺的生物富集系數(shù)BCF分別為33.65、26.39和193.25，由此結(jié)果判斷氟吡菌胺也屬于中等富集性農(nóng)藥；對于此結(jié)果本論文和US EPA數(shù)據(jù)相符合，但本論文在3個濃度下的富集均進行了研究，并發(fā)現(xiàn)在0.0149 mg·L-1濃度下，生物富集系數(shù)最高，由此，不能因為農(nóng)藥在水中的含量低，就認為該農(nóng)藥在水生生物中不產(chǎn)生富集，相反的是，一些關(guān)于直鏈烷基苯磺酸鹽(LAS)的研究表明，化學物質(zhì)的BCF隨水中暴露濃度的增加而降低[17-19]。影響水中化學物質(zhì)的生物富集有很多因素，首先是水溶性，通常水溶性在0.5～50 mg·L-1之間的農(nóng)藥有被生物體富集的可能性，水溶性<0.5 mg·L-1的農(nóng)藥很容易被生物富集，氟吡菌胺在水中的溶解度為(4.065±0.214) mg·L-1，因此其有被生物體富集的可能性；另外，藥劑的毒性效應、生物有效性、水中化學物質(zhì)濃度、水體和生物體內(nèi)脂肪含量等都有可能對生物富集的大小產(chǎn)生影響[20]，氟吡菌胺主要施用于蔬菜和水果，由于其具有強內(nèi)吸性[21]，在施用過程中，不僅可通過內(nèi)吸進入植株，而且還可通過各種農(nóng)耕措施和雨水沖刷流入水體，導致水體污染。但目前國內(nèi)對該藥的殘留尚無報道，2013年11月，歐盟食品安全局經(jīng)歐盟專家組評估后對氟吡菌胺的殘留限量定為土豆0.03 mg·kg-1，木薯、紅薯、山藥、竹芋為0.01 mg·kg-1，甜菜、辣根、大頭菜、蘿卜等為0.15或0.2 mg·kg-1，啤酒花為0.7 mg·kg-1[22-23]；我國于2014年8月1日發(fā)布的《食品安全國家標準-食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中，規(guī)定氟吡菌胺在馬鈴薯上的最大殘留限量為0.05 mg·kg-1[24]；林琎等[15]的研究表明，氟吡菌胺在水中劑量超過0.0298 mg·L-1時，即會對斑馬魚胚胎、仔魚的生長發(fā)育及成魚的繁殖造成影響，同時本研究中的生物富集試驗也證明，在0.0149 mg·L-1濃度下暴露8 d，氟吡菌胺會在魚體中大量富集，即192 h持續(xù)暴露后，其在魚肉中的含量可達到1.546 mg·kg-1。因此本研究進一步明確了氟吡菌胺對水環(huán)境的潛在風險，并提出應當規(guī)定其在水體中的含量控制在0.0149 mg·L-1以下。

此外，由斑馬魚在試驗過程中的癥狀推測，氟吡菌胺對其心臟發(fā)育有顯著影響，斑馬魚屬于脊椎動物，且與人類基因的保守度高達85%[25]，考慮到人類及脊椎動物的健康，應當加強對該藥施用后相鄰水體的殘留監(jiān)測，并注意在水系統(tǒng)相鄰的作物生產(chǎn)區(qū)域慎用該農(nóng)藥。

致謝：感謝山東農(nóng)業(yè)大學植保學院博士生李北興在文章修改中給予的幫助。

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Acute Toxicity of Fluopicolide to 9 Kinds of Environmental Organisms and Its Bioaccumulation in Zebrafish

Lin Jin1,3, Gao Yun1,2, Mu Wei1,2,#, Wang Kaiyun1,3,*, Xu Hui4, Liu Jie4

1. College of Plant Protection, Shandong Agricultural University, Tai’an 271018, China 2. Center of Pesticide Environmental Toxicology, Shandong Agricultural University, Tai’an 271018, China 3. Key Laboratory of Pesticide Toxicology & Application Technique, Shandong Agricultural University, Tai’an 271018, China 4. United Pesticide Industry Co., Ltd., Jinan 250100, China

Received 25 April 2016 accepted 6 June 2016

In order to evaluate the toxicity risk of fluopicolide to environmental organisms and reduce its risk to the special organisms in China, 9 types of environmental organisms were used to determine the acute toxicity. Tested organisms include Apis mellifera, Coturnix japonica, Brachydanio rerio, Bombyx mori, Scenedesmus obliquus, Daphnia magna, Trichogramma ostriniae, Eisenia foetida and Rana nigromaculata tadpoles. Bioaccumulation of fluopicolide was researched by using zebrafish as model organism. According to acute toxicity to fish (LC50(96 h)=1.489 mg·L-1), biological enrichment experiments were carried out with three concentrations. In detail, 0.745 mg·L-1, 0.149 mg·L-1and 0.0149 mg·L-1were adopted, which equal 1/2, 1/10 and 1/100 of the LC50(96 h) to zebrafish. After continuous exposure for 8 days, bioaccumulation was detected using liquid chromatography. The results indicated that fluopicolide had moderate toxicity to zebrafish (Brachydanio rerio), Scenedesmus obliquus and Daphnia magna, whereas it showed high toxicity to tadpoles. Moreover, it exhibited low toxicity or low risk to other tested environmental organisms. After continuous exposure for 192 h, bioconcentration factors (BCF) were determined as 33.65, 26.39 and 193.25 for 0.745 mg·L-1, 0.149 mg·L-1and 0.0149 mg·L-1, respectively. According to "Environmental Safety Evaluation Test Guidelines of Chemical Pesticides" in China, 10 < BCF ≤ 1000, fluopicolide is moderate-enrichment pesticides.

fluopicolide; environmental organisms; acute toxicity; bioconcentration factor

國家十二五科技支撐計劃(2011BAE06B02)

林琎(1978-)，女，博士，研究方向為農(nóng)藥環(huán)境毒理及安全性評價，E-mail：linjin@sdau.edu.cn；

*通訊作者(Corresponding author)， E-mail: kywang@sdau.edu.cn

10.7524/AJE.1673-5897.20160425002

2016-04-25 錄用日期：2016-06-06

1673-5897(2016)6-296-10

X171.5

A

王開運(1954-)，男，教授，博士生導師，主要研究方向為農(nóng)藥學及植物化學保護。

慕衛(wèi)(1971-)，女，教授，碩士生導師，主要研究方向為農(nóng)藥殘留分析及農(nóng)藥環(huán)境安全評價。

# 共同通訊作者(Co-corresponding author)， E-mail: muwei@sdau.edu.cn

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