薛艷超，孫蓓，王新，馮靖△，曹潔△

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阻塞性睡眠呼吸暫?；颊咄庵苎獌?nèi)皮祖細(xì)胞及促血管生成因子水平研究

薛艷超1，孫蓓2，王新1，馮靖1△，曹潔1△

摘要：目的觀察阻塞性睡眠呼吸暫停（OSA）患者外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPC）不同亞族和促血管生成因子水平的變化，探討不同程度OSA患者外周血EPC對(duì)血管修復(fù)的可能性。方法選取90例OSA患者和30例健康志愿者(對(duì)照組)，根據(jù)睡眠呼吸暫停低通氣指數(shù)(AHI)將90例OSA患者均分為輕、中、重度OSA組。密度梯度離心法提取單個(gè)核細(xì)胞，依據(jù)乙醛脫氫酶(ALDH)活性對(duì)EPC進(jìn)行分選，流式細(xì)胞儀聯(lián)合CD133、CD34、含激酶域插入片段受體(PE-KDR)相應(yīng)細(xì)胞表面標(biāo)志物測(cè)定CD133+KDR+EPC及CD133+CD34+EPC、CD34+KDR+EPC、ALDHloCD34+KDR+EPC的水平。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定患者外周血低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)及基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(SDF-1α)的水平。結(jié)果對(duì)于外周血CD133+KDR+EPC、CD133+CD34+EPC、CD34+KDR+EPC水平，重度OSA組>中度OSA組>輕度OSA組>對(duì)照組（均P < 0.05）；輕、中度OSA組的外周血ALDHloCD34+KDR+EPC水平高于對(duì)照組，重度OSA組低于其他3組（均P < 0.05）；血清HIF-1α、VEGF均是重度OSA組>中度OSA組>輕度OSA組>對(duì)照組，SDF-1α水平為重度OSA組<中度OSA組<輕度OSA組<對(duì)照組（均P < 0.05）。結(jié)論OSA患者可能都會(huì)誘導(dǎo)動(dòng)員并招募大量無(wú)效EPC，其數(shù)量龐大，但直接參與修復(fù)內(nèi)皮的ALDHloCD34+KDR+EPC并未增加，尤其對(duì)于重度OSA患者甚至有可能減少，OSA減弱了修復(fù)內(nèi)皮的可能性，加重了內(nèi)皮損傷，從而增加心血管事件的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

關(guān)鍵詞：阻塞性睡眠呼吸暫停；低氧誘導(dǎo)因子-1α；基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α；血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子；間歇低氧；內(nèi)皮祖細(xì)胞；乙醛脫氫酶

間歇低氧（IH）是阻塞性睡眠呼吸暫停（OSA）的2個(gè)病理生理特征之一。OSA是眾多心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，OSA并發(fā)心血管疾病的主要病理生理機(jī)制是內(nèi)皮損傷和功能障礙[1]。研究表明IH激活低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α (SDF-1α)等血管活性物質(zhì)合成的增加，進(jìn)而動(dòng)員并招募內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPC)參與受損血管的修復(fù)及重建[2]。最近研究發(fā)現(xiàn)，依據(jù)乙醛脫氫酶(ALDH)的活性可有效分選出功能性EPC，即直接參與修復(fù)內(nèi)皮的EPC為低ALDH活性內(nèi)皮祖細(xì)胞(ALDHloCD34+KDR+EPC)[3]。OSA患者內(nèi)皮功能的維持與穩(wěn)定取決于內(nèi)皮損傷與EPC修復(fù)能力間的動(dòng)態(tài)平衡。目前以O(shè)SA患者作為研究對(duì)象，通過(guò)測(cè)定AL?DHloCD34+KDR+EPC數(shù)量的變化來(lái)探討受損血管修復(fù)能力的相關(guān)研究甚少。因此，本研究通過(guò)測(cè)定OSA患者外周血HIF-1α、SDF-1α、VEGF和EPC不同亞族的水平，探討不同程度OSA患者外周血EPC對(duì)血管修復(fù)的可能性。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象納入2013年12月—2014年12月于我科睡眠呼吸診療中心經(jīng)多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)儀(PSG)診斷為OSA的患者90例，年齡40～79歲。根據(jù)呼吸暫停低通氣指數(shù)(apneahypopnea index, AHI)分為輕度OSA組(5次/h≤AHI<15次/h) 30例，男25例，女5例，年齡（54.3±11.1）歲；中度OSA組(15 次/h≤AHI<30次/h)30例，男25例，女5例，年齡（52.3±12.0）歲；重度OSA組(AHI≥30次/h)30例，男26例，女4例，年齡（52.9±11.6）歲。同期納入年齡、性別相匹配的30名健康志愿者(AHI＜5次/h)作為對(duì)照組，其中男24例，女6例，年齡（51.5±8.9）歲。4組性別（χ2=0.480，P=0.923）、年齡（F=0.343, P=0.794）差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。OSA診斷標(biāo)準(zhǔn)參考阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南(2011年修訂版)[4]，排除伴有包括高血壓病、糖尿病、進(jìn)行藥物治療的高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化性血管疾病和其他慢性疾病者。本研究獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2主要試劑及儀器APC-CD133抗體（Miltenyi公司），PE-cy7-CD34抗體、含激酶域插入片段受體(PE-KDR)抗體（BD公司），人外周血淋巴細(xì)胞分離液（Solarbio公司），Aldefluor試劑、人類造血祖細(xì)胞富集試劑盒（Stemcell公司），胎牛血清（Gibco公司）；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒（南京建成生物科技公司），流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（BD公司），多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)儀（美國(guó)飛利浦公司）。

1.3方法

1.3.1PSG監(jiān)測(cè)所有受試者均使用PSG連續(xù)進(jìn)行7h以上的睡眠呼吸監(jiān)測(cè)，包括心電圖、腦電圖、眼電圖、下頜肌電圖、口鼻氣流、胸腹運(yùn)動(dòng)及血氧飽和度。監(jiān)測(cè)指標(biāo)包括嗜睡分?jǐn)?shù)、AHI、最低血氧飽和度（LSpO2）等。

1.3.2血標(biāo)本的留取所有患者均于PSG監(jiān)測(cè)結(jié)束后，空腹抽取肘正中靜脈血14mL，其中10mL置于含EDTA的真空采血管中，4℃冰箱中保存，24h內(nèi)用于單個(gè)核細(xì)胞（mononu?clear cells，MNC）的提取及流式細(xì)胞儀檢測(cè)；另4mL置于非抗凝管中，室溫靜置30min后，4℃3 000 r/min離心10min，留取血清，標(biāo)記后于-80℃冰箱中保存。

1.3.3MNC的分離和流式細(xì)胞儀檢測(cè)向10mL新鮮血液中加入0.5mL人類造血祖細(xì)胞富集因子抗體，混勻，靜置20min后，將血液按1∶1稀釋于磷酸鹽緩沖液(PBS)，采用密度梯度離心法提取MNC，加入紅細(xì)胞裂解液，按照ALDH廠家手冊(cè)對(duì)MNC進(jìn)行染色，然后將PE-KDR、PE-cy7-CD34和APC-CD133加入ALDH染色的MNC中，避光孵育，ALDH assay buffer洗滌，用250μL的ALDH assay buffer重懸細(xì)胞，上流式細(xì)胞儀檢測(cè)，測(cè)定CD133+KDR+EPC、CD133+CD34+EPC、CD34+KDR+EPC及ALDHloCD34+KDR+EPC的細(xì)胞比例，結(jié)果以每微升全血中高乙醛脫氫酶活性/低乙醛脫氫酶活性(ALDHhi/ALDHlo)所占外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC)的百分比× EPC百分比表示。

1.3.4HIF-1α、SDF-1α及VEGF水平檢測(cè)按照ELISA試劑盒廠家手冊(cè)，測(cè)定患者血清HIF-1α、SDF-1α及VEGF的水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用±s表示。多組間比較采用單因素方差分析（One-Way ANOVA），組間多重比較采用Bonferroni法，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

Tab.1　Comparison of general data in four groups表1　各組患者一般情況比較?。╪=30,±s）

Tab.1　Comparison of general data in four groups表1　各組患者一般情況比較?。╪=30,±s）

＊＊P＜0.01；a與（1）比，b與（2）比，c與（3）比，P < 0.05

組別對(duì)照組（1）輕度OSA組（2）中度OSA組（3）重度OSA組（4）F BMI (kg/m2) 23.8±2.7 25.6±3.0a28.6±0.8ab33.4±2.0abc101.800＊＊嗜睡分?jǐn)?shù)(分) 4.2±2.8 7.1±4.1a10.0±4.6ab19.9±3.4abc98.190＊＊AHI（次/h) 1.7±1.4 11.5±3.1a22.7±4.0ab68.4±28.1abc127.700＊＊LSpO2(%) 0.922±0.019 0.874±0.020 0.822±0.015a0.509±0.169abc141.300＊＊

2.1各組患者一般情況比較見(jiàn)表1。對(duì)于體質(zhì)指數(shù)（BMI）、嗜睡分?jǐn)?shù)、AHI，均是重度OSA組＞中度OSA組＞輕度OSA組＞對(duì)照組；重度OSA組的LSpO2低于對(duì)照組、輕度OSA組、中度OSA組，中度OSA組低于對(duì)照組(均P < 0.05)。

2.2各組患者外周血EPC不同亞族的水平比較對(duì)于CD133+KDR+EPC、CD133+CD34+EPC、CD34+KDR+EPC水平，均是重度OSA組＞中度OSA組＞輕度OSA組＞對(duì)照組，而輕、中度OSA組的ALDHloCD34+KDR+EPC水平高于對(duì)照組，重度OSA組低于其余3組(均P < 0.05)，見(jiàn)表2。

Tab.2　Comparison of CD133+KDR+EPC, CD133+CD34+EPC, CD34+KDR+EPC, ALDHloCD34+KDR+EPC levels in peripheral blood between four groups表2　各組患者外周血CD133+KDR+EPC、CD133+CD34+EPC, CD34+KDR+EPC及ALDHloCD34+KDR+EPC水平比較　（n=30,±s）

Tab.2　Comparison of CD133+KDR+EPC, CD133+CD34+EPC, CD34+KDR+EPC, ALDHloCD34+KDR+EPC levels in peripheral blood between four groups表2　各組患者外周血CD133+KDR+EPC、CD133+CD34+EPC, CD34+KDR+EPC及ALDHloCD34+KDR+EPC水平比較?。╪=30,±s）

＊＊P＜0.01；a與（1）比，b與（2）比，c與（3）比，P<0.05

組別對(duì)照組（1）輕度OSA組（2）中度OSA組（3）重度OSA組（4）F CD133+KDR+EPC (/10 000 events) 51.90±18.85 79.08±12.52a97.34±16.18ab119.20±45.50abc34.340＊＊CD133+CD34+EPC (/10 000 events) 18.71±8.50 31.91±8.89a45.19±18.23ab76.65±31.91abc49.250＊＊組別對(duì)照組（1）輕度OSA組（2）中度OSA組（3）重度OSA組（4）F CD34+KDR+EPC (/10 000 events) 53.29±18.78 86.09±17.03a123.42±32.73ab239.44±87.23abc84.760＊＊ALDHloCD34+KDR+EPC (/10 000 events) 20.45±8.99 37.69±11.16a29.52±11.15ab13.01±6.36abc37.380＊＊

2.3各組血清HIF-1α、SDF-1α及VEGF水平比較HIF-1α和VEGF水平均為重度OSA組>中度OSA組>輕度OSA組>對(duì)照組；而SDF-1α水平為重度OSA組<中度OSA組<輕度OSA組<對(duì)照組(均P < 0.05)，見(jiàn)表3。

Tab.3　Comparison of serum levels ofhIF-1α, SDF-1α and VEGF between four groups表3　各組血清HIF-1α、SDF-1α、VEGF水平比較（n=30,±s）

Tab.3　Comparison of serum levels ofhIF-1α, SDF-1α and VEGF between four groups表3　各組血清HIF-1α、SDF-1α、VEGF水平比較（n=30,±s）

＊＊P＜0.01；a與（1）比，b與（2）比，c與（3）比，P<0.05

組別對(duì)照組(1)輕度OSA組(2)中度OSA組(3)重度OSA組(4) FhIF-1α(μg/L) 1.30±0.21 1.70±0.15a1.87±0.35ab2.56±0.26abc129.500＊＊SDF-1α(ng/L) 2 173.00±316.50 1 971.00±275.50a1 587.00±241.70ab1 180.00±313.20abc69.450＊＊VEGF(ng/L) 36.79±5.59 53.29±6.57a98.00±7.00ab155.60±12.80abc1183.000＊＊

3　討論

OSA是臨床上一種常見(jiàn)的睡眠紊亂性疾病，其特征為上氣道的反復(fù)塌陷導(dǎo)致復(fù)發(fā)性低氧血癥、睡眠片段化和日間嗜睡。OSA并發(fā)血管損傷的主要機(jī)制是OSA模式IH造成內(nèi)皮損傷[1]。IH誘導(dǎo)動(dòng)員并招募EPC歸巢于受損血管區(qū)域，從而修復(fù)血管內(nèi)皮的完整性和功能[5]，且主要參與受損血管修復(fù)的EPC 為ALDHloCD34+KDR+EPC[3]。內(nèi)皮損傷最終表現(xiàn)為IH激活的內(nèi)皮損傷過(guò)程與EPC修復(fù)過(guò)程之間的動(dòng)態(tài)平衡，從而促進(jìn)心血管事件的發(fā)生[6]。

本研究結(jié)果顯示，輕、中、重度OSA組患者的BMI均高于對(duì)照組，表明BMI越高，OSA患者AHI的次數(shù)增加越明顯，這與Viswanath等[7]認(rèn)為BMI可增加OSA的發(fā)生率的結(jié)論一致。

目前關(guān)于OSA與EPC數(shù)量關(guān)系的文獻(xiàn)報(bào)道很多，但研究結(jié)果并不一致。本研究結(jié)果顯示，重度OSA組患者外周血CD133+KDR+EPC、CD133+CD34+EPC、CD34+KDR+EPC水平最高，對(duì)照組最低；Berger 等[8]通過(guò)對(duì)急性心肌梗死(AMI)合并睡眠呼吸紊亂（SDB）患者研究發(fā)現(xiàn)，AMI合并SDB患者的EPC水平明顯高于單獨(dú)AMI患者，并認(rèn)為是IH導(dǎo)致了EPC水平的增加，與本研究結(jié)果一致。Lui等[9]研究發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組相比，OSA患者的CD133+KDR+EPC水平降低，其認(rèn)為與晚期糖基化終產(chǎn)物的增加有關(guān)。Murri等[10]發(fā)現(xiàn)OSA患者CD133+CD34+EPC水平低于對(duì)照組，與本研究結(jié)果是相反的，他們認(rèn)為EPC水平與OSA嚴(yán)重程度、氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平呈負(fù)相關(guān)。而Yun等[11]通過(guò)檢測(cè)內(nèi)皮集落形成單位來(lái)測(cè)定EPC，結(jié)果發(fā)現(xiàn)OSA組與對(duì)照組的EPC水平并無(wú)明顯差異。本研究結(jié)果表明，OSA患者程度越重，外周血中CD133+KDR+EPC、CD133+CD34+EPC、CD34+KDR+EPC水平增加越明顯，提示EPC水平與OSA嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。形成這種差異的原因可能與受試者的數(shù)量、男女比例、EPC的表型及EPC評(píng)價(jià)方法的不同[5]等因素有關(guān)。

ALDH是一種對(duì)細(xì)胞間乙醛起氧化作用的酶[12]。盡管ALDH是一種細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)蛋白，但其表達(dá)水平可利用乙醛即丹磺酰氨基乙醛的熒光，通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)[13]。最近，有研究根據(jù)ALDH的活性分選兩群EPC，并檢測(cè)其表面標(biāo)志物及其作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ALDHloCD34+KDR+EPC具有較強(qiáng)的修復(fù)能力[3]。因此，對(duì)于區(qū)分所謂的“功能性EPC”來(lái)說(shuō)，ALDH是一種有效的標(biāo)志物。更有研究表明，ALDHloCD34+KDR+EPC對(duì)局部缺血組織有重要的再生能力[14]。本研究依據(jù)ALDH活性聯(lián)合EPC表面標(biāo)志物分選EPC，結(jié)果發(fā)現(xiàn)重度OSA組患者ALDHloCD34+KDR+EPC水平最低，輕度OSA組ALDHloCD34+KDR+EPC水平最高，提示OSA患者動(dòng)員招募EPC大量增加，但在重度OSA患者中，真正參與修復(fù)內(nèi)皮的ALDHloCD34+KDR+EPC卻降低，減弱了對(duì)受損血管的修復(fù)能力，加重了內(nèi)皮損傷，從而增加了心血管疾病發(fā)生的可能性，符合OSA是眾多心血管疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因素的結(jié)論。

OSA的主要病理生理基礎(chǔ)是睡眠過(guò)程中反復(fù)發(fā)生的IH，誘導(dǎo)相關(guān)基因表達(dá)及相應(yīng)活性物質(zhì)的合成，進(jìn)而導(dǎo)致心血管疾病的發(fā)生，HIF-1α是其中的關(guān)鍵調(diào)控因子之一。OSA模式的IH激活HIF-1α，誘導(dǎo)SDF-1α及VEGF的表達(dá)增加，動(dòng)員和招募EPC，最終參與新血管的形成[2]。本課題組以往通過(guò)建立不同的動(dòng)物低氧模型，發(fā)現(xiàn)HIF-1α的蛋白及mRNA表達(dá)水平隨著間歇低氧頻率及程度的增加而升高，且低氧程度越重，HIF-1α的表達(dá)水平越高[15]。而本研究進(jìn)一步對(duì)OSA患者研究發(fā)現(xiàn)，隨著OSA嚴(yán)重程度的加重，血清HIF-1α的蛋白水平增加，這與國(guó)內(nèi)外的研究結(jié)果一致，并且符合HIF-1α對(duì)低氧具有適應(yīng)性反應(yīng)的調(diào)控機(jī)制。

VEGF是缺血缺氧過(guò)程中一種重要的基因產(chǎn)物。缺氧情況下，VEGF的活性增強(qiáng)，動(dòng)員與招募EPC進(jìn)入外周血循環(huán)，并歸巢至受損血管處，參與血管的修復(fù)。本研究結(jié)果表明重度OSA組患者血清VEGF增加明顯，其EPC水平也是增加的，與VEGF 對(duì)EPC的動(dòng)員作用是一致的。然而,有報(bào)道認(rèn)為OSA患者血清VEGF水平增加，但EPC水平是減少的，原因可能與EPC在OSA血管內(nèi)皮損傷中的消耗有關(guān)[5]。

SDF-1α是細(xì)胞膜半胱氨酸-X-半胱氨酸（CXC）趨化因子家族一員，通過(guò)SDF-1α/半胱氨酸-X-半胱氨酸趨化因子受體（CXCR）4軸，進(jìn)而動(dòng)員EPC進(jìn)入外周血循環(huán)，并遷移至受損血管部位。SDF-1α在缺血組織的過(guò)度表達(dá)能促使EPC從外周血聚集并誘導(dǎo)新生血管形成[5]。目前OSA患者的血清與EPC數(shù)量及功能之間的關(guān)系存在爭(zhēng)議。本研究結(jié)果表明，SDF-1α隨著OSA程度的加重逐漸降低，這與Berger等[8]研究一致。筆者認(rèn)為可能機(jī)制為隨著OSA患者嚴(yán)重程度的加重，EPC水平增加，SDF-1α 與EPC的表面受體CXCR4結(jié)合增加，使得其血漿濃度降低。

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（2015-09-15收稿2015-10-08修回）

（本文編輯閆娟）

T Endothelial progenitor cells (EPCs) and promote angiogenesis factor levels in peripheral blood in patients with obstructive sleep apnea

XUE Yanchao1, SUN Bei2, WANG Xin1, FENG Jing1△, CAO Jie1△

1 Generalhospital of Tianjinmedical University, Tianjin 300052, China; 2 Institute of Endocrinology of Tianjinmedical University

Abstract：Objective To explore the repair possibilities of endothelial progenitor cells (EPCs）in peripheral blood in patients with different extents of obstructive sleep apnea (OSA) throughmeasuring the levels of pro-angiogenic factors and different subgroups EPCs in peripheral blood in patients with OSA.Methods Ninety adult patients with OSA, 30healthy controls withmatched age and gender were enrolled for this study.The subjects performed Polysomnography, were divided in?to four group based on Apneahypopnea Index (AHI).The serum levels ofhIF-1α, SDF-1α and VEGF were assessed by ELISA.Mononuclear cells were isolated from peripheral blood with density gradient centrifugation, and flow cytometry was used to detect levels of CD133+KDR+EPC, CD133+CD34+EPC, CD34+KDR+EPC and ALDHloCD34+KDR+EPC based on AL?DH activity, and CD133, CD34, PE-KDR related cell surfacemarkers.Results The levels of CD133+KDR+EPC, CD133+CD34+EPC, CD34+KDR+EPC werehigher in OSA groups than those of control group, both of which werehigher in severe OSA group than those of inmild andmoderate OSA groups.The levels of ALDHloCD34+KDR+EPC werehigher inmild andmoderate OSA groups than that of the control groups, and the levels of ALDHloCD34+KDR+EPC were significantly lower in se?vere OSA group than those of control,mild andmoderate OSA groups.Serum levels ofhIF-1α.VEGF were significantlyhigh?er in OSA groups compared to those in control groups, both of which werehigher in severe OSA group than those ofmild andmoderate OSA groups.Serum levels of SDF-1α were significantly lower in severe OSA groups than those ofmild,moderate OSA and control groups (P < 0.05).Conclusion Themobilization and recruitment of different subtypes of EPCs are obvious?ly increased in patients with OSA, but ALDHloCD34+KDR+EPC with vascular repair capacity keeps to invariability, even de?book=20,ebook=25creases in patients with severe OSA, which results in endothelial damage, and increases the risk of cardiovascular disease.

Key words：obstructive sleep apnea;hypoxia-inducible factor-1α; stromal cell derived factor-1α; vascular endothelial growth factor; intermittenthypoxia; endothelial progenitor cells; acetaldehyde dehydrogenase

Corresponding Author△E-mail: zyyhxkfj@126.com; tjcaojie@sina.com

通訊作者△E-mail:zyyhxkfj@126.com; tjcaojie@sina.com

作者簡(jiǎn)介：薛艷超(1988)，女，碩士在讀，主要從事睡眠低氧性疾病研究

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81270144，30800507，81570084,2015BAI12B00，2012BAI05B02）

中圖分類號(hào)：R56

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

DOI:10.11958/20150161

作者單位：1天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院呼吸科（郵編300052）；2天津醫(yī)科大學(xué)代謝病醫(yī)院內(nèi)分泌研究所