王　拓，付冬梅，鐘　科，孫　勇

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血液提取物誘導軟組織修復再生的研究進展

王拓，付冬梅，鐘科，孫勇

血液提取物；軟組織；修復；研究進展

目前，種植義齒是口腔臨床中牙列缺損的主要修復方式。隨著人們審美水平的提高，骨整合不再是權衡種植成功率高的唯一標準。因為軟組織缺損直接影響種植義齒的穩(wěn)定性和美觀性，因此，軟組織美學成為當今種植領域的研究熱點。1984年，Assoian等[1]發(fā)現(xiàn)了第1代血液提取物——富血小板血漿(platelet-rich plasma，PRP)，它是自體外周血通過梯度離心得到的血小板凝膠(plateletgel，PG)[2]，富含大量生長因子，能夠很好地促進組織再生和修復，從而開啟了口腔軟組織缺損修復新的理念及路徑。后來又出現(xiàn)第2代富血小板纖維蛋白（platelet-rich fibrin，PRF）、改良型富血小板纖維蛋白（advanced platelet-rich fibrin，APRF）和第3代濃縮生長因子（concentrated growth factors，CGF）等，筆者簡要介紹幾種血液提取物誘導軟組織缺損修復再生的機制及研究進展。

1　PRP

PRP富含高濃度的血小板及少量血漿，當PRP與凝血酶和鈣離子混合后，血小板被凝血酶激活后聚集在一起，起到止血的作用，然后由α顆粒釋放生長因子[3]。分泌的生長因子包括血小板源性生長因子(PDGF)、表皮樣生長因子(EGF)、血管內皮生長因子(VEGF)、類胰島素樣生長因子(IGF-1)、轉化生長因子(TGF-β)、成纖維細胞生長因子(FGF)、骨鈣素及纖維蛋白原等[4-5]。研究證實，PRP釋放的生長因子約為體內正常濃度的3～8倍[6]。PRP中還含有較多的白細胞，既可以消滅體內的病原體，又可以清除壞死組織，增強機體的免疫力及抗感染能力。PRP的血漿中還包含纖維素、親玻粘連蛋白及纖粘連蛋白[7]，纖維蛋白提供一個三維結構，將血小板釋放的生長因子聚集起來，并將軟組織缺損部位粘連在一起，起到止血、消炎的作用，從而促進傷口自然愈合。

2　PRF

繼PRP之后，Choukroun等[8]在2000年發(fā)現(xiàn)了新一代血液濃縮物——PRF，PRF為第2代血液濃縮制品，雖然PRF與PRP所含成分基本相同，但與PRP相比具有以下優(yōu)點：制備方法簡單快速，不添加異種抗凝劑、凝血酶等化學制劑，避免了交叉感染、免疫排斥及過敏反應的發(fā)生；大量血小板介導α-顆粒釋放多種生長因子，促進細胞遷移和增殖，有利于損傷組織的愈合。另外，壓制成的PRF凝膠結構與人類天然的血凝塊相似，不僅具有良好的彈性，還具有纖維蛋白構成的疏松多孔的三維網(wǎng)狀結構[9]，損傷發(fā)生后，PRF可誘導損傷部位血管活化、上皮封閉損傷組織，體內的葡萄糖胺聚糖既容易被纖維蛋白滯留，又對細胞因子有很強的親和力，使得血小板釋放的細胞因子PDGF、VEGF、TGF-β和TGF s等牢固存儲于纖維蛋白網(wǎng)狀結構中，并緩慢地呈周期性、節(jié)律性地釋放，從而減少了生長因子的丟失，并發(fā)揮相互協(xié)調作用，使得PRF具有更強的促進組織修復再生的能力[10]。但PRP作用時間短暫，只能在植入早期起作用，一般需與骨粉等混合應用[11]。而PRF作為一種自體生物材料，可單獨應用于口腔植骨術。

近年來，Ghanaati等[12]又發(fā)現(xiàn)了一種新的富血小板纖維蛋白（advanced platelet-rich fibrin，A-PRF），稱為改良型富血小板纖維蛋白，它需要特制的離心管，離心速度與PRF也不同。它的組分與PRF基本相同，但各成分的比例可能不同，目前還沒有文獻報道其促進組織修復再生的臨床應用效果，與PRF的差異比較也有待進一步研究。

3　CGF

CGF由Sacco于2006年提出[13]，是繼PRF后的新一代血液提取物，與PRF一樣，CGF由靜脈外周血離心分離制作而成，無需任何抗凝劑及凝血酶等制品，不會引起免疫排斥反應及其他傳染病。但需特定的意大利Medifuge離心機、特定離心管及離心速度，通過專門的CGF工具盒制備。與PRF不同的是，CGF中的纖維蛋白及生長因子更多，凝膠塊更大、更黏稠，抗張強度更高。CGF促進組織再生修復作用的基礎是高濃度的濃縮生長因子及三維網(wǎng)狀支架[14]。CGF可與骨移植材料混合，植入損傷處[15]，可加速骨組織及軟組織的愈合。當機體受損傷后，血清中的Hagemann因子能將機械損傷轉化為可接受的生化信號，滲出的血液和纖維蛋白迅速凝集成血塊[16]；大量單核細胞遷移并轉化為巨噬細胞，吞噬血塊中的細菌及無活力細胞，加強中性粒細胞對機體的防御能力。同時，凝血過程中產(chǎn)生的凝血酶激活血小板α顆粒，釋放各種生長因子及免疫調節(jié)因子，一方面起到消炎、止痛及修復損傷的作用；另一方面促進損傷組織新生血管化，組織細胞可部分增殖分化為成纖維細胞，合成膠原纖維，有利于創(chuàng)傷的愈合。同時，血小板傳遞信號，循環(huán)血中的各種干細胞、局部上皮細胞及成骨細胞等遷移至缺損區(qū)，進行增殖分化，促進組織修復再生及愈合。有研究表明，CGF能明顯縮短術區(qū)恢復的時間，提高骨組織及軟組織愈合質量[17]。

4　血液提取物中生長因子促進軟組織損傷愈合的作用機制

生長因子能夠促進細胞的增殖及分化、膠原的合成及血管新生，同時抑制破骨細胞的功能，對組織缺損的修復再生起重要作用[18]。另外，纖維蛋白參與凝血過程，并收縮創(chuàng)面，為細胞增殖提供三維空間支架等[19-20]。

當組織損傷時，血管內血液外流，血小板在局部形成血栓并釋放PDGF，是最早出現(xiàn)的生長因子。它能促進創(chuàng)傷局部細胞的有絲分裂，刺激血管內皮細胞分裂，促進血管再生及膠原蛋白的合成，從而加速創(chuàng)傷組織的修復再生[21]；它還能刺激成骨細胞增殖，從而促進骨組織再生[22]。TGF-β的作用主要是促進成骨細胞及前成骨細胞的增殖分化，同時抑制破骨細胞的形成[23]。一定濃度的TGF-β可誘導成纖維細胞增殖分化，合成大量膠原蛋白，有利于創(chuàng)傷組織的修復愈合[24]。創(chuàng)傷前期，局部炎癥較重，TGF-β含量較少，膠原合成不足，傷口愈合較慢，容易裂開。表皮生長因子能促進纖維組織及基質的合成，且能夠激活磷脂酶A，從而促進前列素的合成，前列素能夠促進骨吸收和后期骨形成[25]。VEGF的主要作用是促進內皮細胞增殖分化，誘導新生血管的生成，提供豐富的營養(yǎng)物質，改善軟組織周圍血供，有利于機體新陳代謝，為損傷組織的修復再生創(chuàng)造更好的微環(huán)境。其次，還能激活堿性磷酸酶的活性，使局部鈣鹽沉積，骨折愈合更快。另外，通過改善骨折周圍軟組織的血供促進軟組織修復，間接促進骨折愈合。血小板還可釋放IGF1，與PDGF協(xié)同誘導表皮和內皮的再生修復[5]，還可促進成纖維細胞及軟骨細胞生長，誘導血管內皮細胞聚集到損傷部位，產(chǎn)生更多的新生血管。

5　展望

目前，血液提取物在組織缺損修復中已廣泛運用，尤其是PRF和CGF，而且，在醫(yī)學美容及創(chuàng)面愈合等領域中已取得了很好的成果。雖然已有基礎研究及相關的臨床觀察證實了PRF、APRF、CGF能明顯提高口腔軟組織缺損修復的愈合率，但是還沒有對它們之間促進愈合的效果及相互作用進行系統(tǒng)的基礎與臨床研究，尚需要進一步的深入探討，以便在臨床工作中為各種血液提取物在軟組織缺損中的應用提供理論依據(jù)，從而更好地指導種植手術中軟組織缺損修復材料的選擇。

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R 274.3

A

1004-0188（2016）03-0334-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2016.03.042

全軍“十二五”科研面上課題（CWS11J024）

646000四川瀘州，四川醫(yī)科大學口腔醫(yī)學院（王拓，付冬梅）；成都軍區(qū)機關醫(yī)院口腔科(王拓，付冬梅，鐘科，孫勇)

孫勇，電話:028-86687041

（2015-11-30）