許燕麗，鄒麗蘭，陳婉秋

(深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,廣東 深圳　518108)

?

女性下生殖道HPV不同感染類型的血清INF-ε水平

許燕麗，鄒麗蘭，陳婉秋

(深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,廣東 深圳518108)

[摘要]目的：探討女性下生殖道人乳頭瘤病毒(HPV)感染類型與血清干擾素-ε(INF-ε)水平的關系。方法：將2014年1月至2015年1月在我院確診為下生殖道HPV感染的女性患者230例作為研究對象，依據(jù)HPV感染的類型分為HPV低危型感染組(105例)和HPV高危型感染組(125例)，選取同期婦科健康體檢的婦女(30例)作為對照組。3組都進行血清INF-ε水平和HPV感染及類型的檢測。結果：對照組與HPV低危型感染組之間的血清INF-ε水平無顯著性差異，而HPV高危型感染組血清INF-ε水平顯著低于對照組(P<0.05)。結論：女性下生殖道HPV高危型感染者血清INF-ε水平下降。

[關鍵詞]人乳頭瘤病毒；干擾素-ε；高危型

人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)在女性生殖道病毒感染中常見且后果嚴重，扁平濕疣類病變、宮頸上皮內瘤變Ⅰ(cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ，CINⅠ)多由HPV低危型導致，而女性常見的第二大腫瘤——宮頸癌99%伴隨高危型HPV感染。干擾素-ε(INF-ε)是2001年Conldin發(fā)現(xiàn)的新型Ⅰ類干擾素，具有抗病毒、抗腫瘤的作用。為了探討HPV不同感染類型患者血清INF-ε水平是否有變化，研究血清INF-ε與HPV感染及其類型的關系，我們選取230例HPV感染者和30例健康體檢女性，檢測其血清INF-ε的變化，探討血清INF-ε與HPV感染類型的關系。

1資料與方法

1.1研究對象選取2014年1月到2015年1月230例在我院就診的婦科下生殖道HPV感染患者作為研究對象。納入標準：有性生活史、非妊娠期；患者年齡18～70歲，并取得患者的知情同意及倫理學委員會的通過；無盆腔放射治療史，無子宮切除史者。選取同期婦科健康體檢的婦女30例作為對照組。

1.2分組230例婦科下生殖道HPV感染患者根據(jù)HPV感染類型分組，其中HPV低危型感染組105例,HPV高危型感染組125例。選取30例同期在本院體檢中心體驗的健康女性作為對照組，HPV陰性。3組年齡、孕產(chǎn)史、體質量指數(shù)等臨床指標無顯著性差異。

1.3方法

1.3.1HPV感染型檢測所有受檢者取材前72 h內禁止性生活，禁止陰道用藥及陰道檢查。均提取宮頸脫落細胞中DNA片段，用信號放大法(基因雜交捕獲二代技術)，通過雜交捕獲試驗檢測特異DNA片段，及PCR擴增判定患者下生殖道HPV感染及其類型。

1.3.2血清干擾素(INF-ε)檢測所有受檢者于卵泡期(月經(jīng)周期第5～8天)采集空腹靜脈血3 mL，置于含有依地酸二鈉(ENTA-Na2)的抗凝試管中，應用1 000 r/min速度離心2 h以分離血漿。取血清置于-70 ℃的冰箱中儲存，作為樣本備檢。應用自動酶標儀(Elecsys2010型)檢測樣本中INF-ε水平，所用INF-ε水平檢測ELISA試劑盒購自美國Roch公司。每次測定的INF-ε水平繪制標準曲線，保持其與吸光度的相關系數(shù)在0.995～1.000范圍內。采用雙盲法進行測定。

1.4統(tǒng)計學處理采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計檢驗，計量資料比較采取方差分析。

2結果

HPV低危型感染組105例的INF-ε為10.87±3.20 ng/L，HPV高危型感染組125例的INF-ε為8.34±2.41 ng/L，對照組30例的INF-ε為11.78±2.10 ng/L。HPV低危型感染組與對照組比較血清INF-ε水平無顯著性差異(P=0.11)。而HPV高危型感染組與對照組比較顯著降低(P<0.01)。

3討論

人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)具有嗜黏膜和上皮性，易導致感染部位的良、惡性病變，與腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關。目前，HPV已鑒定出100多個型別。國際癌癥研究協(xié)會(International Agency for Research OilCancer，IARC)將HPV分為：⑴低危型HPV，包括HPV6、HPV11、HPV40、HPV42、HPV43、HPV44、HPV54、HPV61、HPV70、HPV72、HPV81、cp6108等12種，主要引起下生殖道、肛周皮膚和陰道下部的外生性濕疣類病變、扁平濕疣類病變、宮頸上皮內瘤變Ⅰ(CINⅠ),一般不誘發(fā)癌變；⑵高危型HPV，包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68、HPV73、HPV82等15種，與CINⅡ、CINⅢ及宮頸癌的發(fā)生密切相關[1-2]。

Ⅰ型干擾素在宿主中很重要，因其具有抗病原體作用和活化先天性和獲得性免疫細胞[3]。Ⅰ型干擾素包括IFN-ɑ、IFN-β、IFN-ε等6種。Ⅰ型干擾素是在病毒感染早期發(fā)展起重要作用的一群大家族細胞因子，典型的Ⅰ型干擾素如IFN-α或IFN-β在許多類型細胞病毒感染后被上調了。

INF-ε不同于其他Ⅰ型干擾素(IFN-α或 IFN-β)，它具有獨特的表達模式以及分泌和調節(jié)機理。首先。INF-ε不像其他細胞因子是由免疫細胞表達和誘導免疫細胞表達，INF-ε是持續(xù)性表達，即此類干擾素能夠在沒有外來刺激物的作用下，其含量能夠持續(xù)地在某些組織細胞中保持一定的水平[4]。INF-ε在小鼠和人類女性下生殖道的上皮細胞持續(xù)表達[3]，而且INF-ε基因缺陷的小鼠容易感染單純皰疹病毒2和衣原體[5]。

大部分細胞分泌Ⅰ型干擾素對周邊細胞具有抗病毒作用，但IFN-ε轉染細胞的上清液卻幾乎沒有抗病毒的功能。小鼠和人類的IFN-ε前體在通過表達載體進行轉染時功能欠佳，并且IFN-ε的分泌量也很少。IFN-ε和 limitin (IFN-ζ)的化學結構分析二者的信號肽和成熟部分導致了前體功能欠佳。HeLa細胞(宮頸癌細胞系)中轉染FLAG標記的IFN-ε的免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)IFN-ε分泌途徑受到抑制[6]。

基于IFN-ε在生殖細胞持續(xù)表達以及在HeLa細胞中IFN-ε前體物質功能欠佳， IFN-ε的分泌可能需要一個復合因子，比如某種伴侶蛋白，而這種蛋白是需要生殖器官的細胞來表達。另一方面這種特殊的復合因子可能根據(jù)環(huán)境因素如激素或者細胞因子來調節(jié)IFN-ε的分泌[6]。

本次研究所用臨床病例樣本較少，血清IFN-ε與宮頸高危HPV感染風險相關性以及其關系還需要進行多指標、大樣本、深度研究來進一步明確。

參考文獻：

[1]BOSCH F X, MANOS M M, MUNOJ N, et al. Prevalence of human papilloma virus in cervical cancer[J]. a worldwide perspective.JNatl Cancer Inst, 1995, 87(11): 796-802.

[2]李慧弘．人乳頭瘤病毒與生殖系統(tǒng)腫瘤[J]．腫瘤學雜志，2010，16(11)：864-868．

[3]HERVAS-STUBBS S, PEREZ-GRACIA J L, ROUZAUT A, et al. Direct effects of type I interferons on cells of the immune system[J]. Clin Cancer Res, 2011, 17(9): 2619-2627.

[4]WIJESUNDARA D K, YANG Xi, RANASINGHE C, et al. Unraveling the convoluted biological roles of type Ⅰ interferons in infection and immunity:a way forwardfor therapeutics and vaccine design[Z], 2014: 412.

[5]FUNG K Y, MANGAN N E, CUMMING H, et al. Interferon-ε protects the female reproductive tract from viral and bacterial infection[J]. Science, 2013, 339(6123): 1088-1092.

[6]HERMANT P, FRANCIUS C, CLOTMAN F, et al. IFN-ε is constitutively expressed by cells of the reproductive tract and is inefficiently secreted by fibroblasts and cell lines[J]. PLoS One, 2013, 8(8): e71320.

Serum INF-ε Level of Women with Human Papilloma Virus Infection in Low Genital Tract

XU Yanli,ZOU Lilan,CHEN Wanqiu

(Gynecology and Obstetrics,Shenzhen Baoan Shiyan People's Hospital, Guangdong Shenzhen518108,China)

[Abstract]Objective:To explore the relationship between Serum INF-εlevel and the type of Human Papillomavirus Infection in low genital tract of female.Methods:In 230 cases of HPV infection in shiyan Hospital during Jan.2014 to Jan.2015 which were divided by HPV test to 105 patients with Low-risk Human Papilloma virus Infection and 125 patients with high-risk Human Papillomavirus Infection.30 heath women of taking physical health examination were control group. serum INF-εlevel were detected in the three groups.Results:There was no difference between the heath women and the patients with Low-risk Human Papilloma virus Infection in INF-εlevel.The women with high-risk Human Papilloma virus Infection in low genital tract were obviously lower than heath women in INF-εlevel.Conclusion:The Serum INF-ε level is low in women with hign-risk Human Papillomavirus Infection in low genita l tract.

[Keywords]human papilloma virus;interferon-ε;high-risk type

(收稿日期：2015-07-13)

[中圖分類號]R711.7

[文獻標識碼]A

DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2016.02.019

通信作者：許燕麗，2006xuyanli@163.com

優(yōu)先數(shù)字出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20160315.1356.002.html