何軼群 郭莉 陳漢彪

(廣東省婦幼保健院 醫(yī)學遺傳中心，廣東 廣州 510080)

應用染色體微陣列分析產(chǎn)前診斷17q12微缺失一例

何軼群 郭莉 陳漢彪

(廣東省婦幼保健院 醫(yī)學遺傳中心，廣東 廣州 510080)

染色體17q12缺失綜合征(chromosome 17q12 deletion syndrome)呈常染色體顯性遺傳，表型可為特殊面容、發(fā)育遲緩、多囊腎、腎功能異常、青少年發(fā)病的成人型糖尿病(maturity-onset diabetes of the young 5, MODY5)、自閉癥、癲癇、精神分裂癥、生殖和骨骼系統(tǒng)發(fā)育異常等。染色體17q12缺失綜合征的表型復雜多樣，當染色體17q12缺失片段包含HNF1B基因時，?？蓪е履I臟疾病或MODY5發(fā)生。Rosenfeld等[1]報道，包含HNF1B基因的染色體17q12片段發(fā)生缺失，外顯率約為34.4%。本文報道了1例應用常規(guī)G顯帶核型分析技術(shù)和染色體微陣列分析技術(shù)進行檢測，發(fā)現(xiàn)胎兒染色體17q12片段發(fā)生微缺失，缺失片段包含HNF1B基因，并探討該胎兒超聲異常表型和17q12微缺失及HNF1B基因的相關(guān)性。

1 對象與方法

1.1 對象 孕婦，33歲，G3P1A1，因“停經(jīng)32+周，超聲發(fā)現(xiàn)胎兒室管膜下囊腫，胎兒腸管節(jié)段性擴張，雙腎回聲異常，不除外成人型多囊腎可疑”來本科室就診。孕婦平素月經(jīng)規(guī)則，孕期順利，無特殊不適。無抽煙、嗜酒史，無胎兒畸形家族史。孕婦超聲提示：宮內(nèi)妊娠，單活胎。胎兒雙側(cè)室管膜下囊腫聲像。胎兒雙腎實質(zhì)回聲異常。胎兒頭顱MR提示：胎兒雙側(cè)室管膜下囊腫，余顱腦未見明顯異常。胎兒腹部MR提示：胎兒小腸不完全腸梗阻，腹腔內(nèi)少許積液。早期唐氏篩查：低風險。

1.2 方法

1.2.1 制片及G顯帶 采集胎兒臍帶血約2ml，并進行接種、培養(yǎng)、收獲、滴片、G顯帶及分析。

1.2.2 染色體微陣列分析 采集胎兒臍帶血約2ml，使用QIAamp DNA Blood Mini Kit(產(chǎn)自QIAGEN公司)進行基因組DNA提取，使用Sure Print G3 Human CGH Array Kit(8×60K)的芯片(產(chǎn)自安捷倫公司)進行微陣列比較基因組雜交的檢測。

2 結(jié)果

2.1 G顯帶核型分析 胎兒臍血G顯帶核型分析結(jié)果為46,XN，未見異常核型(圖1)。

圖1 胎兒臍血G顯帶核型分析結(jié)果圖

2.2 染色體微陣列分析 經(jīng)胎兒臍血樣本進行染色體微陣列分析，結(jié)果顯示17號染色體17q12(31461588-33242217)位置發(fā)生缺失，片段大小約1.78Mb(圖2)。

圖2 胎兒臍血染色體微陣列分析結(jié)果圖

注：箭頭處示染色體17q12缺失位置，片段大小約1.78Mb。

該缺失片段包含HNF1B基因(OMIM:189907)，且HNF1B基因為MODY5的致病基因。

3 討論

Bellanne-Chantelot等[2]報道，位于染色體17q12的HNF1B基因發(fā)生缺失或突變時，與青少年發(fā)病的成人型糖尿病有關(guān)，其中基因缺失的頻率占70%，患者常表現(xiàn)為腎囊腫和糖尿病。Mefford等[3]報道，位于染色體17q12的HNF1B基因缺失與腎臟疾病和糖尿病密切相關(guān)。Bellanné-Chantelot等[4]報道，在伴非糖尿病腎病的早發(fā)性糖尿病患者中，40%患者攜帶HNF1B基因突變。Dotto RPet等[5]研究發(fā)現(xiàn)MODY5患者的腎臟功能異常與雜合的HNF1B基因缺失有關(guān)。Edghill等[6]報道，在病因不明的腎臟疾病患者中，14%攜帶HNF1B基因突變。大量研究報道HNF1B基因發(fā)生缺失或突變時，常表現(xiàn)為多囊腎、腎功能異常和(或)糖尿病，證實HNF1B基因為MODY5的致病基因。據(jù)報道，在HNF1B基因攜帶突變或缺失的患者中，36%患者出現(xiàn)MODY5癥狀[2]，64%在兒童時期即伴隨腎臟畸形[7]，89%患者產(chǎn)前超聲檢查即可發(fā)現(xiàn)腎臟疾病[8]，且產(chǎn)前超聲檢查往往可發(fā)現(xiàn)腎臟回聲異?；蚰I囊腫等。此外，還有報道顯示，HNF1B基因缺失或突變導致MODY5發(fā)生，往往在胚胎發(fā)育早期即可出現(xiàn)嚴重的腎臟畸形[9]。而本例胎兒超聲提示雙腎異常，且臍血染色體微陣列分析結(jié)果提示染色體17q12(31461588-33242217)位置缺失，缺失片段包含HNF1B基因。因此，本例胎兒超聲提示腎臟異常，可能與17q12(31461588-33242217)位置的HNF1B基因發(fā)生缺失有關(guān)。在臨床診療上，超聲提示腎臟異常時，可利用染色體微陣列分析排除胎兒染色體微缺失或微重復。

HNF1B是調(diào)節(jié)肝臟內(nèi)基因特異性表達的一種轉(zhuǎn)錄因子，它能識別一些特異靶序列，通過與這些調(diào)控區(qū)的順式作用元件相結(jié)合，對靶基因的轉(zhuǎn)錄起到激活或阻遏作用。HNF1B基因廣泛表達于肝臟、腎臟、胰腺等組織，并參與轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡共同調(diào)節(jié)許多基因的表達。由于調(diào)節(jié)血糖功能的基因表達受組織特異性轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)節(jié)，所以HNF1B基因缺失或突變可能會導致進行性葡萄糖耐量減退，胰島素分泌受損，從而導致血糖異常。據(jù)報道，HNF1B還參與肝臟、腎臟等器官的形態(tài)發(fā)生，對大鼠胚胎發(fā)育的研究提示HNF1B對腎臟發(fā)育的最早的誘導期及細胞分化后期十分重要[10]。Barbacci等[11]報道，HNF1B對早期胚胎發(fā)育具有重要作用，HNF1B缺失可能影響肝臟、腎臟等器官的發(fā)育。Hiesberger等報道，HNF1B在腎集合管上皮細胞中表達，且參與腎小管分化。動物實驗證明，PKHD1(polycystickidney and hepatic disease 1)基因在腎臟的正常表達受HNF1B調(diào)控，而PKHD1的表達在腎小管形態(tài)的形成過程中非常重要[12]。大量證據(jù)顯示，HNF1B基因缺失或突變?yōu)镸ODY5的致病機制之一。本例胎兒HNF1B基因發(fā)生缺失，可能導致腎臟異常和糖尿病。

隨著分子生物學技術(shù)的發(fā)展，染色體微陣列分析技術(shù)對于傳統(tǒng)細胞遺傳學方法來說，是一個很好的完善和補充，尤其是攜帶染色體微缺失或微重復的產(chǎn)前診斷病例，使得染色體微陣列分析技術(shù)的優(yōu)越性得到體現(xiàn)。

[1] Rosenfeld JA, Coe BP,Eichler EE,et al.Estimates of penetrance for recurrent pathogenic copy-number variations[J].Genet Med,2013, 15(6):478-481.

[2] Bellanné-Chantelot C, Clauin S, Chauveau D, et al. Large genomic rearrangements in the hepatocyte nuclear factor-1beta (TCF2) gene are the most frequent cause of maturity-onset diabetes of the young type 5[J]. Diabetes, 2005, 54(11):3126-3132.

[3] Mefford HC, Clauin S, Sharp AJ, et al. Recurrent reciprocal genomic rearrangements of 17q12 are associated with renal disease, diabetes, and epilepsy[J]. Am J Hum Genet, 2007, 81(5):1057-1069.

[4] Bellanné-Chantelot C, Chauveau D, Gautier JF, et al.Clinical spectrum associated with hepatocyte nuclear factor-1beta mutations[J]. Ann Intern Med, 2004, 140(7):510-517.

[5] Dotto RP, Giuffrida FM, Franco L, et al. Unexpected finding of a whole HNF1B gene deletion during the screening of rare MODY types in a series of Brazilian patients negative for GCK and HNF1A mutations[J]. Diabetes Res Clin Pract, 2016, 116:100-104.

[6] Edghill EL, Bingham C, Ellard S, et al. Mutations in hepatocyte nuclear factor-1beta and their related phenotypes. J Med Genet, 2006, 43(1):84-90

[7] Ulinski T, Lescure S, Beaufils S, et al. Renal phenotypes related to hepatocyte nuclear factor-1b(TCF2) mutations in a pediatric cohort[J]. J Am SocNephrol, 2006, 17:497-503.

[8] Decramer S, Parant O, Beaufils S, et al.Anomalies of the TCF2 gene are the main cause of fetal bilateral hyperechogenickidneys[J]. J Am SocNephrol, 2007, 18:923-933.

[9] 王從容, 項坤三. 肝細胞核因子-1β 基因與MODY5[J]. 中國糖尿病雜志, 2002, 10(3): 171-174.

[10] Lazzaro D, De Simone V, De Magistris L, et al. LFB1 and LFB3 homeoproteins are sequentially expressed during kidney development[J]. Development, 1992, 114(2):469-479.

[11] Barbacci E, Reber M, Ott MO, et al. Variant hepatocyte nuclear factor 1 is required for visceral endoderm specification[J]. Development, 1999 , 126(21):4795-4805.

[12] Hiesberger T, Bai Y, Shao X, et al. Mutation of hepatocyte nuclear factor-1beta inhibits Pkhd1 gene expression and produces renal cysts in mice[J]. J Clin Invest, 2004, 113(6):814-825.

編輯：宋文穎

10.13470/j.cnki.cjpd.2016.04.018

R714.55

B

2016-11-01)