吳雪嬌　甄漢深*　杜喜枚

1. 廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西　南寧　530001；2. 武警廣西總隊(duì)醫(yī)院，廣西　南寧　530003

?

三七總皂苷提取工藝研究進(jìn)展

吳雪嬌1甄漢深1*杜喜枚2

1. 廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西南寧530001；2. 武警廣西總隊(duì)醫(yī)院，廣西南寧530003

對(duì)三七總皂苷的不同提取方法進(jìn)行綜述，其傳統(tǒng)提取有滲漉、回流法等；現(xiàn)代提取有超聲提取、超臨界流體萃取、微波提取、酶提取法等。筆者論述了當(dāng)提取工藝變化時(shí)tPNS提取率的變化情況，總結(jié)了tPNS提取工藝的研究進(jìn)展。

三七；三七總皂苷；提取工藝；研究進(jìn)展

三七[Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen]為五加科(Araliaceae)人參屬(Panax)植物三七的根與根莖[1]。三七總皂苷(total saponins of panar natoginseng,tPNS)是三七根部提取的有效成分，含有多種皂苷成分包括人參皂甙Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh、 三七皂甙R1、R2、R3、R4、R5、R6等70多種單體皂甙[2]，以三七皂甙R1、人參皂甙Rb1、Rg1含量最高[3]，tPNS的特征化合物為三七皂苷R1。在實(shí)際生產(chǎn)中由于不同的提取方法，三七的有效成分及其含量也會(huì)出現(xiàn)差別，為研究制劑的有效性、提高生產(chǎn)效率，本文對(duì)tPNS提取工藝的研究進(jìn)展綜述。

1　傳統(tǒng)提取法

1.1滲漉法唐紅芳等[4]采用滲漉法優(yōu)化工藝：75%乙醇浸泡24h，收集10倍量滲漉液，滲漉液中tPNS含量為5.6 mg /mL，提取率為95.9%。閆光軍等[5]采用滲漉速度對(duì)tPNS的提取效率影響最大，其次為乙醇用量和粉末粗細(xì)，而乙醇濃度在所考察范圍內(nèi)影響較小，最優(yōu)提取工藝：15倍量75%乙醇、滲漉速度5mL/min，平均提取率為93.1%。譚朝陽(yáng)等[6]以tPNS和三七總氨基酸為考察指標(biāo)，乙醇濃度對(duì)提取效率影響最大，隨著濃度的增大tPNS的含量相應(yīng)增加，而三七總氨酸的含量卻有所降低，最優(yōu)工藝為12倍量的50%乙醇，滲漉速度為1～3mL/(min·kg)。1.2回流提取法陳銳等[7]采用8倍量70%乙醇，回流3次，每次1h，可以較好的提取tPNS。陳光宇等[8]對(duì)比回流與超聲的差異，得出回流最優(yōu)方案：6倍量30%乙醇浸泡30min，回流30min，提取1次，此條件下三七皂苷R1、人參皂苷Rg1等皂苷的總含量較高。林偉鑫等[9]通過(guò)正交試驗(yàn)，得出最佳方案：分別用10倍量、8倍量50%乙醇回流提取2次，每次 2.0 h，此條件下提取率較高。藥材粒度對(duì)提取效率也有影響，曾以旺等[10]研究發(fā)現(xiàn)三七粗粉和最粗粉的提取率相當(dāng)，而為了讓過(guò)濾等的步驟方便，選擇用三七粗粉，最優(yōu)提取方案為：7倍量60%的乙醇浸泡過(guò)夜，每次1.5h，回流3次。

2　現(xiàn)代提取方法

2.1超聲波提取法本法多數(shù)以乙醇為溶劑。嚴(yán)勁松等[11]采用 Box-Benhnken設(shè)計(jì)優(yōu)化法對(duì)tPNS超聲提取工藝進(jìn)行研究，其最佳提取工藝為：72%乙醇，料液比為1∶11，超聲時(shí)間12min， tPNS的提取率為6.92%。丁艷芬等[12]以乙醇為溶劑，得出tPNS最佳提取工藝：40℃下，加75%乙醇(5倍量)，高頻(50KHZ)提取4次每次超聲30min。也有報(bào)道用水飽和正丁醇為溶劑，如秦楓等[13]采用12倍量水飽和正丁醇，提取溫度40℃提取2次，每次50min，提取率增加了近1%，此法可以省略萃取步驟、簡(jiǎn)化工藝。超聲頻率不同對(duì)提取率有一定影響，賁永光等[14]采用雙頻超聲(40 kHz /25 kHz)技術(shù)對(duì)tPNS提取率的影響，其提取效率更高，在80%乙醇，40℃，料液比為1∶20，超聲30min條件下tPNS提取率可達(dá)到82.41%。

2.2超臨界流體萃取法(SFE)劉鴻鋮[15]利用超聲輔助超臨界CO2萃取技術(shù)提取人參皂苷，最佳提取工藝：35MPa壓力,45℃,萃取2.5h,70%夾帶劑,原料：夾帶劑(g/ml)為1∶30，人參皂苷的得率最高。雷羽[16]通過(guò)反相微乳體系降低tPNS的極性，從而提高萃取效率，最佳提取工藝：313.5K-318.5K，15.0MPa-25MPa，AOT濃度0.07mol/L，以Na2CO3為堿化劑且隨著加入的增多tPNS的提取率增高。

2.3微波提取法林文等[17]利用微波提取法，tPNS最佳提取工藝：功率500W,物料比 20mL/ g,藥材粒度40目,55%乙醇,溫度為70℃,提取20min，tPNS的提取率 11.784 8%。王玉堂[18]研究常壓微波與高壓微波的不同，常壓微波最佳提取工藝：微波功率300 W，70%乙醇 ，溶劑用量 40mL，提取時(shí)間 40min；高壓微波最佳提取工藝條件：微波提取壓力500kPa，20mL70%乙醇、提取時(shí)間10min，但高壓微波熱影響較大。張春軍等[19]比較了冷浸、回流、微波等提取方法的差異，微波提取效率優(yōu)于冷浸、回流，最佳工藝為：微波功率600W，4倍量80%甲醇，提取10min。

3　酶提取法

李元波等[20]將酶提取法和冷浸法相結(jié)合， 發(fā)現(xiàn)復(fù)合酶法得到的tPNS的提取效率最高，tPNS的含量為12.01%，提取物得率為35.82%，最優(yōu)工藝為：纖維素酶15U/ g(生藥)，果膠酶140U/g(生藥)，pH4.5，50℃，80%乙醇，提取2.5h。楊婧娟[21]利用枯草芽孢桿菌能分泌活性較強(qiáng)的胞外酶的特性，采用響應(yīng)面法，最佳提取工藝條件：麩皮添加量31%，物料比1：1.2，PH7.6，tPNS的含量為12.25±0.21%，比乙醇回流法提高了35.36%，且一些稀有皂苷如Rh1、F1、Rg3含量相對(duì)增多。

4　其他方法

韓建軍等[22]采用x-Benhnken中心組合設(shè)計(jì)原理以及響應(yīng)面分析法研究影響tPNS提取率的各個(gè)因素， 71%乙醇，料液比1∶71，壓力403MPa，提取5min，tPNS的得率為11.82%。吳麗霞等[23]采用加壓技術(shù)對(duì)tPNS進(jìn)行提取，并與滲漉法、乙醇回流法、超聲波提取法相比較該方法較好，最佳工藝：藥材過(guò)40目篩，在60℃，4.5kg/cm2壓力下，浸提溶劑為70% 乙醇，料液比1∶10，提取60min，tPNS提取率可達(dá) 9.18%。

5　小結(jié)

三七總皂苷(tPNS)在臨床上用途廣泛，對(duì)其需求量日益增多。提取方法主要有傳統(tǒng)法和現(xiàn)代法，各有優(yōu)缺點(diǎn)，提取率各不相同。目前，工業(yè)化大生產(chǎn)多用乙醇回流法，但產(chǎn)品得率較低。在現(xiàn)代各種提取方法中，微波提取效率優(yōu)于冷浸、回流。酶提取法提取效率高，但要控制好pH(pH為4.5)。超聲波提取法和超臨界流體萃取法提取效率較好，但對(duì)設(shè)備要求高，在工業(yè)生產(chǎn)時(shí)投入和維護(hù)成本較大。建議進(jìn)一步深入研究tPNS的提取技術(shù)，以探求更方便、經(jīng)濟(jì)、高效的tPNS提取方法。

[1]李娟,王如峰.三七皂苷類成分及對(duì)心血管作用的研究進(jìn)展[J].2015,40(17):3480-3481.

[2] 王瑩,褚揚(yáng).三七中皂苷成分及其藥理作用的研究進(jìn)展.[J]中草藥,2015,46(9):1381-1382.

[3] 蘇靜,朱衛(wèi)泉.RP-HPLC梯度洗脫法測(cè)定血栓通片中三七皂苷R1、人參皂苷Rb1及人參皂苷Rg1的含量[J].藥物分析雜志,2005,25(2):212.

[4] 唐紅芳,毛麗珍.正交試驗(yàn)法研究三七提取工藝[J].中草藥,2001,32(1):26-27.

[5] 閆光軍,陳建,邵明杰.滲漉法提取三七總皂苷的工藝研究[J].山東醫(yī)藥工業(yè),2003, 22(5):4-5.

[6] 譚朝陽(yáng),尤昭玲,袁宏佳.三七滲漉提取工藝的研究[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2010,17 (4):51-52.

[7] 陳銳,楊建龍.復(fù)方三七止痛顆粒有效成分提取工藝的研究[J].Strait Pharmaceutical Journal ,2015,27(8):7-8.

[8] 陳光宇,何群.三七醇回流法與超聲法提取工藝比較研究[J].中國(guó)藥師,2013,16(7):975-976.

[9] 林偉鑫,姚曦.三七總皂苷提取、大孔樹(shù)脂純化工藝研究[J].食品與藥品,2015,17(3):156-157.

[10] 曾以旺,王少平.三七乙醇提取工藝優(yōu)選[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2014,16(12):44-46.

[11] 嚴(yán)勁松,高申蓉.湖北恩施產(chǎn)三七總皂苷的提取工藝研究[J].中國(guó)中醫(yī)藥指南,2012,10(32):455-456.

[12] 丁艷芬,陳金東,黎福南,等.三七總皂苷超聲波提取工藝研究[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥,2012,14(1):38-40.

[13] 秦楓,劉靖,陳玉勇,等.三七總皂苷含量測(cè)定方法及超聲提取工藝研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(8):3062-3063,3231.

[14] 賁永光,丘泰球,李金華.雙頻超聲強(qiáng)化對(duì)三七總皂苷提取的影響[J].江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)2007,28(1) :12-16.

[15] 劉鴻鋮.人參有效成分超臨界萃取法提取與純化的研究[D].長(zhǎng)春：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),2014:51.

[16] 雷羽.超臨界CO2反相微乳萃取三七總皂苷的研究[J].江西化工,2008,(2):105-106.

[17] 林文,李紅娟.微波提取三七總皂苷的工藝研究[J].中成藥,2009,31(11):1759-1760.

[18]王玉堂.人參中人參皂苷的提取、分離和測(cè)定[D].長(zhǎng)春：吉林大學(xué),2008,64-67.

[19] 張春軍,董琦,董凱.三七及竹節(jié)參中皂甙的不同提取方法[J].中國(guó)林副特產(chǎn),2011,(4):27-28.

[20] 李元波，殷輝安，唐明林．復(fù)合酶解法提取三七皂甙的實(shí)驗(yàn)研究[J]．天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2005，17(4)：488-492.

[21]楊婧娟. 三七總皂苷的發(fā)酵輔助提取及其活性評(píng)價(jià)[D].杭州：浙江大學(xué)，2013.

[22] 韓建軍,寧娜.響應(yīng)面法對(duì)三七總皂苷超高壓提取工藝的優(yōu)化[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2015,54(10):2453-2458.

[23] 吳麗霞,梁翠霞.加壓提取三七總皂苷及其含量測(cè)定[J].遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013,34(5):60-61.

(編輯：李雁丹)

Progress in Extract Technology of total Saponins of Panax Notoginseng

WU Xuejiao1ZHEN Hanshen1*DU Ximei2

1.Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001,China；2.Guangxi Armed Police Corps Hospital, Nanning 530003,China

Summary of the different extraction methods of saponins of notoginseng Panax (tPNS， total)， The traditional extraction method and reflux percolation； Modern extraction，ultrasonic extraction， supercritical fluid extraction，microwave extraction，enzyme extraction method， etc.The change of tPNS extraction rate is discussed when the extraction process is changed，Research Progress on the extraction process of tPNS.

Roadix Notoginseng；tPNS；Extract technology；Study progress

2016-05-23

吳雪嬌(1992-)，女，漢族，碩士研究生，研究方向?yàn)樗帉W(xué)和中藥學(xué)的科研工作。E-mail：2027617008@qq.com

甄漢深，教授，從事藥學(xué)和中藥學(xué)的教學(xué)和科研工作。E-mail：8zhen@163.com

R914.1

A

1007-8517(2016)16-0048-02