尚　磊,梁　立,孟　妍,單寅鑫

(黑龍江職業(yè)學(xué)院　150080)

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豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸薄層鑒別方法的研究

尚磊,梁立,孟妍,單寅鑫

(黑龍江職業(yè)學(xué)院150080)

摘要：建立豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。采用薄層色譜法對豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸中的黃芪、防風(fēng)、金銀花三味藥材進(jìn)行了定性鑒別。在薄層層析色譜中均能檢出黃芪、防風(fēng)、金銀花，且斑點(diǎn)清晰、陰性無干擾。結(jié)論 該方法簡便、準(zhǔn)確、可靠，可用于豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸；質(zhì)量控制；薄層色譜法；定性鑒別

豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸是以中醫(yī)經(jīng)方玉屏風(fēng)散為基礎(chǔ)，加入金銀花、蒲公英等藥材而研制成的新型中藥復(fù)方緩釋微丸制劑。該制劑具有殺菌抑菌、調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫機(jī)能以及非特異性抗菌的作用，能顯著提高豬對常見傳染病的抗病力。為控制豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸的質(zhì)量，本文采用薄層色譜法(TLC法)對該制劑中的黃芪、防風(fēng)、金銀花三味藥材進(jìn)行了定性鑒別，從而為控制豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸的內(nèi)在質(zhì)量提供了依據(jù)。試驗(yàn)方法如下。

1儀器與試藥

儀器：AGB5型十萬分之一電子天平(METTLER TOLEVO公司)，電熱恒溫水浴鍋(天津泰斯特有限公司)， DHG一9030A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科技有限公司) ，KQ5200B型超聲波振蕩器(昆山超聲儀器公司)，WFH-201B型紫外透射反射儀(上海精科)。

試藥：黃芪甲苷對照品、防風(fēng)對照藥材、金銀花對照藥材、綠原酸對照品(中國食品藥品檢定研究院)，豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸(黑龍江職業(yè)學(xué)院藥物制劑室)，硅膠G薄層預(yù)制板(青島海洋化工廠)，所用試劑均為分析純(天津津東天正)。

2薄層色譜鑒別

2.1　黃芪的TLC鑒別

取本品10g，研細(xì)，加正丁醇50mL，超聲處理30min，濾過，濾液加1%氫氧化鈉溶液洗滌3次，每次15mL，棄去堿液，再用正丁醇飽和的水洗至中性，棄去水液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。再按處方比例，取缺黃芪的其他各味藥，按制備工藝加工制成陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(2010版《中國藥典》一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及陰性對照溶液各15μl、對照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(65：35：10)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的棕褐色斑點(diǎn)，陰性無干擾。見圖1。

2.2　防風(fēng)的TLC鑒別

取本品10g，研細(xì)，加水40mL使溶解，濾過，濾液用石油醚(30～60℃)振搖提取2次(25mL、20mL)，合并石油醚液，揮干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取防風(fēng)對照藥材2g，加水250mL，煎煮30分鐘，濾過，濾液濃縮至約10mL，加乙醇30mL振搖，靜置，濾過，濾液蒸至無醇味，用石油醚(30～60℃)振搖提取2次(25mL、20mL)，合并石油醚液，揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液。再按處方比例，取缺防風(fēng)的其他各味藥，按制備工藝加工制成陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(2010版《中國藥典》一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液及陰性對照溶液各10μl、對照藥材2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(1：1)為展開劑[1]，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性無干擾。見圖2。

2.3　金銀花的TLC鑒別

取本品10g，研細(xì)，將其置于索氏提取器中，加甲醇30 mL回流提取4小時，取甲醇提取液，回收甲醇，定容為5mL，作為供試品溶液。另取綠原酸對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。

另取金銀花對照藥材粉末0. 2g，加甲醇5mL，放置12小時，濾過，濾液作為對照藥材溶液。再按處方比例，取缺金銀花的其他各味藥，按制備工藝加工制成陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(2010版《中國藥典》一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水(7：4：3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品和對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)綠色熒光斑點(diǎn)，陰性無干擾。見圖3。

圖1黃芪TLC圖譜
注：1、4 黃芪甲苷對照品溶液2、5 陰性對照樣品溶液3、6 供試品溶液

圖2防風(fēng)TLC圖譜
注：1、3、5 陰性對照樣品溶液2 防風(fēng)對照藥材溶液4、6 供試品溶液

圖3金銀花TLC圖譜
注：1 綠原酸對照品溶液2 金銀花對照藥材溶液3、4、5 供試品溶液6 陰性對照樣品溶液

3討論與小結(jié)

豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸的君藥為黃芪，黃芪主要有效成分黃芪甲苷常作為黃芪原藥材及含黃芪制劑的質(zhì)量控制的指標(biāo)成分。但因?yàn)楸酒窞橹兴帍?fù)方制劑，化學(xué)成分較為復(fù)雜，直接測定干擾成分多，故本試驗(yàn)采用堿試液洗滌處理樣品，可有效減少干擾，且分離度較好。近代藥理研究顯示，金銀花是一種作用很強(qiáng)的廣譜抗菌中藥，其提取物對金黃色葡萄球菌的抑菌率可達(dá)90%，對大腸桿菌亦有50%的抑菌效果[2]，金銀花的主要成分是綠原酸，故本試驗(yàn)選取綠原酸作為對照品進(jìn)行薄層鑒別。本研究采用TLC法對豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸中的幾味有代表性的中藥材進(jìn)行定性鑒別，經(jīng)驗(yàn)證，可用于豬用加味玉屏風(fēng)緩釋微丸制劑的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)：

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:616.

[2] 張紅峰,白艷軍,藍(lán)宇淑,等.中藥金銀花提取物體外抑菌作用[J].華東師范大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2000(1):107-110.

基金項(xiàng)目：黑龍江省佳木斯市2014年度重點(diǎn)科研課題：佳木斯地區(qū)養(yǎng)豬場適度規(guī)模體系研究(14091)。

作者簡介：孫凡花(1981-)，碩士，副教授，研究方向：動物營養(yǎng)與飼料 、畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)管理。