鐘敏 肖巧請(qǐng) 王玨 趙承兵

硫酸多糖類藥物含量測(cè)定方式探析

鐘敏 肖巧請(qǐng) 王玨 趙承兵

本文綜合近幾年國(guó)內(nèi)外研究的結(jié)果和資料,分析和闡述硫酸多糖類藥物含量的測(cè)定方式。以5個(gè)不同批次的硫酸軟骨素為例,對(duì)比和闡述部頒標(biāo)準(zhǔn)法與間苯三酚分光光度法在測(cè)定硫酸軟骨素含量上所產(chǎn)生的不同結(jié)果。

硫酸多糖類；含量；測(cè)定方式；準(zhǔn)確性

硫酸多糖類型的藥物內(nèi)含天然提取的糖胺聚糖以及硫酸多糖等,其中主要涉及到肝素和甘糖酯等［1］。根據(jù)我國(guó)相關(guān)衛(wèi)生部門的藥品檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),其內(nèi)部含量的主要檢測(cè)方式為將其中的酸水解形成氨基己糖成分［2］。除此之外,其在堿性條件之下,在和乙酰丙酮出現(xiàn)反應(yīng)的過(guò)程中,和對(duì)二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生顯色性轉(zhuǎn)變,并作為其中重要的對(duì)照品,其中較為常用的含量測(cè)試方法為分光光度方法［3］。本文實(shí)驗(yàn)中分析兩種不同檢驗(yàn)方式在硫酸軟骨素含量測(cè)定中的不同效果 ,具體報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 提取軟骨素原料作為研究對(duì)象,硫酸軟骨素A為對(duì)照品,將五種不同批次的硫酸軟骨素原料分為五組,分別為A、B、C、D、E組。其中氨基葡萄糖的對(duì)照品來(lái)自于上海試劑藥廠,另外,乙酰丙酮、間苯三酚以及二甲氨基苯甲醛都屬于分析純。對(duì)比和分析五組產(chǎn)品在不同檢測(cè)方式下的不同效果。運(yùn)用752型可見(jiàn)紫外分光光度計(jì)進(jìn)行分析。

1.2 方法

1.2.1 形成間苯三酚分光光度法的相關(guān)性標(biāo)準(zhǔn)曲線 選取其中經(jīng)105℃干燥4 h的硫酸軟骨素有關(guān)的對(duì)照品0.2068 g展開(kāi)實(shí)驗(yàn),并將其全部放入10ml量瓶當(dāng)中,接著添加適量水,使其發(fā)生溶效果,添加水使其達(dá)到刻度處的位置,并進(jìn)行均勻搖晃。分別取0.2、0.6、0.4、0.8、1.0ml量放置在10ml的量瓶當(dāng)中,并加水使其至1ml。另外,增加3ml間苯三酚溶液,并均勻搖晃,放置在沸水當(dāng)中浴30min,接著拿出,使用冰水冷卻持續(xù)5min,添加冰醋酸使其達(dá)到刻度,均勻搖晃。另外取出1ml水,運(yùn)用同樣方法進(jìn)行操作,用于空白對(duì)照。在波長(zhǎng)處的558cm處測(cè)量其吸收程度,并實(shí)現(xiàn)線性回歸。最后得出其標(biāo)準(zhǔn)曲線方程應(yīng)為A=0.567C+0.110,r=0.9997,而其中的線性范圍應(yīng)是0.253～1.260mg/ml。

1.2.2 運(yùn)用間苯三酚分光光度辦法對(duì)試驗(yàn)品的含量進(jìn)行測(cè)驗(yàn) 提取0.5 g經(jīng)105℃干燥4 h的硫酸軟骨素試驗(yàn)品,進(jìn)行精密稱定。將其放置在50ml的量瓶當(dāng)中,增加適量水,振動(dòng)搖晃。放置使其溶,并增加水進(jìn)行稀釋,使其達(dá)到刻度處,均勻搖晃。取出1ml并按照上文所述進(jìn)行操作,測(cè)驗(yàn)其本身的吸收程度,以標(biāo)準(zhǔn)曲線為準(zhǔn)計(jì)算出含量。

1.2.3 運(yùn)用部頒保準(zhǔn)法對(duì)試驗(yàn)品進(jìn)行含量測(cè)定 以標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方式為準(zhǔn),測(cè)定其中氨基己糖的有效含量,將其乘以2.82,并最后換算成為硫酸軟骨素的有效含量。將兩種不同辦法得出的含量結(jié)果進(jìn)行對(duì)比和分析。

2 結(jié)果

運(yùn)用硫酸軟骨素A組作為其中主要的對(duì)照品,表現(xiàn)出線性關(guān)系較好。但是,當(dāng)運(yùn)用在測(cè)驗(yàn)其中供試品有效含量的過(guò)程中,其檢測(cè)結(jié)果相對(duì)部頒標(biāo)準(zhǔn)法明顯更高。見(jiàn)表1。

3 討論

近幾年,硫酸多糖類型的藥物已經(jīng)逐漸開(kāi)始運(yùn)用在臨床治療過(guò)程中,其在抗凝血和抗血栓等方面都發(fā)揮重要的作用。多糖在作為藥物的情況下,其內(nèi)部含量的多少直接決定藥效,而因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)構(gòu)成不存在均一性,致使不同測(cè)量方式可能導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果存在比較大的差異,且不利于藥物的運(yùn)用和研究。因此,如何尋找最為準(zhǔn)確地硫酸多糖類型藥物含量的測(cè)定方式是當(dāng)前影響相關(guān)藥物含量鑒定等的重要問(wèn)題之一。

硫酸軟骨素主要來(lái)自于豬的喉骨以及鼻中骨等軟骨組織當(dāng)中,屬于一種天然性粘多糖［4］。肝素屬于其中核心五糖,是促使其發(fā)揮抗凝活性的重要組成結(jié)構(gòu)。間苯三酚發(fā)在多糖類藥物含量測(cè)驗(yàn)當(dāng)中運(yùn)用較為普遍,主要原理是多糖物質(zhì)在有關(guān)酸性條件之下,降解成為單糖形式,之后再分解成為糠醛,所得到的產(chǎn)物可和間苯三酚發(fā)生反應(yīng),并顯示顏色,且能夠在標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)部位產(chǎn)生紫外吸收情況,間接測(cè)驗(yàn)出其多糖含量［5］。這種測(cè)驗(yàn)方式操作構(gòu)成比較簡(jiǎn)單,且耗費(fèi)的時(shí)間較短,具有操作方面的優(yōu)勢(shì),受到較大范圍內(nèi)的歡迎,且經(jīng)常運(yùn)用在實(shí)驗(yàn)過(guò)程當(dāng)中。

本文研究結(jié)果中發(fā)現(xiàn),當(dāng)運(yùn)用硫酸軟骨素A組作為其中主要的對(duì)照品的過(guò)程中,表現(xiàn)出的線性關(guān)系較好。但是,當(dāng)運(yùn)用在測(cè)驗(yàn)其中供試品有效含量的過(guò)程中,其檢測(cè)結(jié)果相對(duì)部頒標(biāo)準(zhǔn)法明顯更高。出現(xiàn)類似情況的主要原因與硫酸軟骨素相關(guān)部頒標(biāo)準(zhǔn)有關(guān),其主要憑借氨基葡萄糖展示其內(nèi)部含量。因此,在實(shí)際將其轉(zhuǎn)變成為硫酸軟骨素含量的過(guò)程中,應(yīng)提前確定該供試藥品的基本單位是硫酸乙酰氨基葡萄糖以及葡萄糖醛酸。但是,硫酸軟骨素的原始材料一般是硫酸軟骨素的A、B組等混合型物品,混合比例相互不一,且其中不同批次的硫酸軟骨素中相對(duì)的分子量也存在較大差別。因此,在實(shí)際測(cè)量過(guò)程中可能出現(xiàn)轉(zhuǎn)換性誤差。

綜上所述,間苯三酚法相對(duì)來(lái)說(shuō)操作更加迅速而有效,且比較適合運(yùn)用在掌握一定規(guī)律后的內(nèi)部質(zhì)量控制當(dāng)中。

［1］薛依婷,李春霞,管華詩(shī).硫酸多糖類藥物含量測(cè)定方法研究進(jìn)展.中國(guó)藥學(xué)雜志,2014(4):271-274.

［2］曾洋洋,韓章潤(rùn),楊玫婷,等.海洋糖類藥物研究進(jìn)展.中國(guó)海洋藥物,2013(2):67-75.

［3］隋玉榮.多糖類藥物的研究進(jìn)展.天津藥學(xué),2013(2):41-43.

［4］馮優(yōu),王鳳山,張?zhí)烀?等.多糖類藥物的研究進(jìn)展.中國(guó)生化藥物雜志,2008(2):129-133.

［5］胡川梅,鄭璐俠,陳鋼.多糖類藥用輔料的應(yīng)用及其質(zhì)量分析進(jìn)展.中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn),2015(1):31-35.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.07.216

2015-12-10］

518000 深圳市藥品檢驗(yàn)研究院