聶海濤肖慎華?蘭 山張 浩王子玉王 鋒，2??（．南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，江蘇省肉羊產(chǎn)業(yè)工程技術(shù)中心，南京20095；2．南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，海門山羊研發(fā)中心，南京20095）

4～6月齡杜湖羊雜交F1代母羔凈蛋白質(zhì)需要量

聶海濤1肖慎華1?蘭 山1張 浩1王子玉1王 鋒1，2??
（1．南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，江蘇省肉羊產(chǎn)業(yè)工程技術(shù)中心，南京210095；2．南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，海門山羊研發(fā)中心，南京210095）

摘 要：本試驗(yàn)旨在探討杜泊羊×湖羊（杜湖）雜交F1代母羔羊在4～6月齡生長階段的蛋白質(zhì)代謝規(guī)律的同時確定其凈蛋白質(zhì)需要量。選取4月齡左右湖羊雜交F1代母羔［（35．68± 1．68）kg］42只，結(jié)合比較屠宰試驗(yàn)（30只）和消化代謝試驗(yàn)（12只），利用析因法探討預(yù)測維持和生長凈蛋白質(zhì)需要量的方法。比較屠宰試驗(yàn)：正試期第1天隨機(jī)挑選6只母羔進(jìn)行屠宰（A屠宰批次，n＝6），其余24只羊隨機(jī)分為自由采食（AL）組（n＝12）、低限飼（LR）組（n＝6）和高限飼（HR）組（n＝6）3組，當(dāng)AL組羊均重達(dá)42 kg時，選取6只進(jìn)行屠宰（B屠宰批次，n＝6），待其余自由采食組羊均重達(dá)50 kg時，將AL組、LR組和HR組羊屠宰，分別作為C、D和E屠宰批次（n＝6）。消化代謝試驗(yàn)：將12只羊按照比較屠宰試驗(yàn)的設(shè)計(jì)，分3組（n＝4）進(jìn)行飼喂。預(yù)試期7 d，正試期5 d。結(jié)果表明：4～6月齡杜湖雜交F1代母羔的內(nèi)源性氮損失量為261 mg／kg SBW0．75（SBW為宰前活重），換算為維持凈蛋白質(zhì)需要量為1．63 g／kg SBW0．75。該品種肉羊在35～50 kg體重階段，平均日增重為100～300 g／d的生長凈蛋白質(zhì)需要量為9．83～25．08 g／d。本試驗(yàn)建立了利用氮沉積量與氮攝入量估測4～6月齡杜湖雜交F1代母羔維持凈蛋白質(zhì)需要量的模型以及體蛋白質(zhì)含量與排空體重估測生長蛋白質(zhì)需要量的模型。

關(guān)鍵詞：杜泊羊；湖羊；雜交F1代；母羔；凈蛋白質(zhì)需要量

?同等貢獻(xiàn)作者

??通信作者：王 鋒，教授，博士生導(dǎo)師，E?mail：caeet＠njau．edu．cn

良好的肉羊飼養(yǎng)管理通常被認(rèn)為是需要建立在對家畜營養(yǎng)需要量的精確測定和飼料原料營養(yǎng)成分的客觀評價的基礎(chǔ)上才能成功實(shí)施的，因此，國內(nèi)外研究者一直關(guān)注并從事動物營養(yǎng)需要量相關(guān)領(lǐng)域的研究。與國際上比較成熟的肉羊營養(yǎng)需要量評價體系（NRC，美國［1－2］；ARC，英國［3］；AFRC，法國［4］；CSRIO，澳大利亞［5］）相比，無論是從研究廣度（報道所涵蓋的肉羊品種的數(shù)量，研究對象生理階段的多樣性）還是研究精度（營養(yǎng)需要量評價指標(biāo)的選擇，試驗(yàn)方案的客觀性和營養(yǎng)需要量決定性作用機(jī)理）而言，國內(nèi)的研究都處于全面落后的階段［6］，這種現(xiàn)象與我國現(xiàn)代肉羊產(chǎn)業(yè)的發(fā)展速度極度不符。雖然，農(nóng)業(yè)部2004年制訂的《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY／T 815—2004）［7］和其他研究者的工作［8－14］確實(shí)在一定程度上填補(bǔ)了我國在肉羊營養(yǎng)需要量方面的空白，但是隨著肉羊產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展的不斷增快，肉用性能突出的優(yōu)秀肉羊品種的不斷涌現(xiàn)，已有的研究成果已經(jīng)不能完全適應(yīng)現(xiàn)代肉羊產(chǎn)業(yè)發(fā)展的需要，我國肉羊營養(yǎng)需要量領(lǐng)域的研究亟需更新。隨著近年來我國在該領(lǐng)域研究力量投入的不斷增強(qiáng)，相應(yīng)的研究成果也陸續(xù)報道出來。目前，已有多家研究單位分別就杜泊羊×小尾寒羊F1代［15－17］、無角道賽特×小尾寒羊F2代［18］、薩福克×阿勒泰雜交F1代［19］等肉羊的營養(yǎng)需要量進(jìn)行了報道，本研究團(tuán)隊(duì)也相繼報道了杜泊羊×湖羊（杜湖）雜交F1代公羊的能量和蛋白質(zhì)需要量［20－21］。本文力求從育肥期營養(yǎng)需要量中最為關(guān)鍵的蛋白質(zhì)需要量這一指標(biāo)著手，借鑒國外先進(jìn)研究經(jīng)驗(yàn)并結(jié)合我國的實(shí)際生產(chǎn)需求，最終確定以比較屠宰試驗(yàn)、消化代謝試驗(yàn)相結(jié)合的實(shí)施方案，來確定4～6月齡杜湖雜交F1代母羔的凈蛋白質(zhì)需要量，并從氮表觀消化率和體蛋白質(zhì)（body protein，BP）沉積2方面探討該品種肉羊的蛋白質(zhì)代謝規(guī)律。本試驗(yàn)旨在通過對該品種肉羊蛋白質(zhì)需要量和蛋白質(zhì)代謝規(guī)律的研究，為該雜交組合肉用綿羊飼養(yǎng)過程的飼糧中蛋白質(zhì)的合理供給、肉羊的高效養(yǎng)殖提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1．1 飼糧

本試驗(yàn)于2012年7—10月在江蘇省海門山羊研發(fā)中心開展，試驗(yàn)中所使用的杜湖雜交F1代母羔購自江蘇省漣水縣源農(nóng)生態(tài)農(nóng)業(yè)有限公司。試驗(yàn)中所使用基礎(chǔ)飼糧組成及其營養(yǎng)水平見表1，以全價顆粒飼料形式飼喂，由江蘇省舜潤飼料有限公司代為加工。

1．2 試驗(yàn)動物及飼養(yǎng)管理

選擇體重［（35．68±1．68）kg］、周齡（14～15周齡）相近，體況健康的杜湖雜交F1代母羔42只，常規(guī)驅(qū)蟲處理（伊維菌素，乾坤動物藥業(yè)有限公司）后將每只試驗(yàn)羊分別置于單欄（1．5 m× 4．0 m）內(nèi)飼養(yǎng)直至試驗(yàn)結(jié)束。

比較屠宰試驗(yàn)，預(yù)試期為10 d，期間逐步使用試驗(yàn)飼糧替換原有基礎(chǔ)飼糧（每日替換量為15%～20%）并保證自由飲水。待預(yù)試期結(jié)束后，從42只試驗(yàn)羊中隨機(jī)挑選30只作為比較屠宰試驗(yàn)對象，并從中挑選6只母羔在正試期第1天進(jìn)行屠宰（A屠宰批次，n＝6），其余24只羊隨機(jī)分為自由采食（al libitum，AL）組（n＝12）、低限飼（low?re?stricted，LR）組（自由采食量的60%，n＝6）和高限飼（high?restricted，HR）組（自由采食量的60%，n＝6）3組，為了保證AL組試驗(yàn)羊的自由采食狀態(tài)，在清晨飼喂前需準(zhǔn)確稱量并記錄該組剩料量，通過計(jì)算和調(diào)整投喂量來保證次日剩料量不低于該日采食量的10%，HR組和LR組試驗(yàn)羊投喂量根據(jù)自由采食量按相應(yīng)比例計(jì)算來確定。保證自由飲水和正常光照，其他按照常規(guī)飼養(yǎng)操作規(guī)程進(jìn)行，當(dāng)AL組試驗(yàn)羊體重均重達(dá)到42 kg時，從AL組中挑選6只進(jìn)行屠宰（B屠宰批次，n＝6），待剩余AL組試驗(yàn)羊的均重達(dá)到50 kg時，將AL組、HR組和LR組試驗(yàn)羊一并屠宰，分別記作C、D和E屠宰批次（n＝6）。正試期間，準(zhǔn)確稱量并記錄試驗(yàn)羊每日的投喂量和剩料量，并對每日剩料羊和投喂量按照5%比例進(jìn)行縮分采樣，－20℃保存。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels ofthe basal diet（DM basis）

消化代謝試驗(yàn)，剩余12只試驗(yàn)羊也按照比較屠宰試驗(yàn)設(shè)計(jì)分3組（n＝4）進(jìn)行飼喂。待AL組試驗(yàn)羊均重達(dá)到42 kg［實(shí)測值（41．77±2．03）kg］時，將其移入代謝籠內(nèi)，待7 d預(yù)試期試驗(yàn)羊完全適應(yīng)代謝籠環(huán)境（無應(yīng)激反應(yīng)且采食量恢復(fù)正常）后，進(jìn)入為期5 d的全糞尿收集消化代謝正試期，期間除按照比較屠宰試驗(yàn)所介紹的方法進(jìn)行采食量記錄并采樣的同時，還需分別稱量并記錄每只羊的糞便和尿液排泄量。

1．3 樣本的收集和指標(biāo)的測定

1．3．1 屠宰樣本的收集和測定

屠宰前1天17：00稱重并記錄為末期活體重（live body weight，LBW）。禁食、禁水16 h，次日09：00再次稱重，此時的體重記為宰前活重（shrunk body weight，SBW），電擊暈后經(jīng)頸靜脈放血屠宰。將胴體沿背中線剖為左右兩半，分別稱重后將右側(cè)胴體的骨骼、肌肉、脂肪分離，頭部和蹄同樣按照左、右側(cè)等比例進(jìn)行分割，并同時進(jìn)行骨骼、肌肉和脂肪的分離，將骨骼用碎骨機(jī)粉碎，混勻后采樣500 g；將肌肉、脂肪用絞肉機(jī)分別絞碎混勻后各采樣500 g；將試驗(yàn)羊的各個內(nèi)臟剝離下之后稱重并記錄，其中消化道組織在稱量并記錄其清空前重量后，隨即使用清水對其進(jìn)行清理，盡量擠除多余水份之后記錄重量，消化道各組織清理前后的重量之差記作消化道內(nèi)容物（GIT）重，用于排空體重（empty body weight，EBW）的計(jì)算（EBW＝SBW－GIT）；屠宰后所收集的血液、清理內(nèi)容物后的消化道組織、以及其他內(nèi)臟組織合并稱重后，用碎骨機(jī)粉碎混勻后采樣500 g，記作內(nèi)臟重。所有樣本需冷凍干燥（XIANOU－12N型冷凍干燥機(jī)，先歐儀器有限公司）之后再置于烘箱內(nèi)105℃下持續(xù)烘干至少8 h以上來測定其干物質(zhì)（DM）含量；氮含量使用凱氏定氮法［22］進(jìn)行測定（Kjeltec－7300全自動凱氏定氮儀，福斯儀器有限公司，丹麥）。

1．3．2 飼料、糞和尿液樣本的收集和測定

每日清晨飼喂前按10%的比例對飼料投喂樣進(jìn)行采樣，前日剩料樣也需要準(zhǔn)確稱量并也按照10%的比例進(jìn)行取樣，置于－20℃保存待測。投喂樣和剩料樣中的DM和氮含量按照1．3．1介紹的方法進(jìn)行測定；酸性洗滌纖維（ADF）和中性洗滌纖維（NDF）參照文獻(xiàn)［23］進(jìn)行測定。消化代謝正試期內(nèi)，在每日晨飼前將每日經(jīng)糞尿分離裝置分離出的糞便中的羊毛等其他雜質(zhì)挑除后稱重并記錄，隨后按照5%的比例進(jìn)行縮分采樣并于－20℃保存待測，所收集的糞樣用于測定其DM和氮含量。每日所收集的尿液體積需要用量筒準(zhǔn)確度量，并減去提前加入收集裝置中的10%稀硫酸的體積（100 mL／d），該結(jié)果即為各試驗(yàn)羊在正試期內(nèi)每日所排出的尿液體積，將每只羊5 d正試期內(nèi)每日的尿液樣本混勻后抽取1%制為混合尿樣，－20℃保存，利用凱氏定氮法測定其氮含量，與飼料和屠宰樣本的氮含量測定程序稍有差異，具體如下所述，待冷凍狀態(tài)下的尿液樣本自然融化，混勻后取10 mL，用膠頭滴管均勻滴涂于定量濾紙（分析純），置于55℃下8 h以上直至完全烘干后再測定其氮含量，尿樣的氮含量為滴涂尿液濾紙和空濾紙的氮含量之差。

1．4 指標(biāo)的計(jì)算

在國家肉羊產(chǎn)業(yè)體系“營養(yǎng)與飼料功能研究室”各崗位科學(xué)家的指導(dǎo)下，經(jīng)各功能研究室研究團(tuán)隊(duì)成員討論后，最終確定采用“析因法”對營養(yǎng)需要量進(jìn)行估測的方案，即將動物的總營養(yǎng)需要量剖析為維持（體重維持）和生長（體重增長）需要2大部分，維持需要量利用營養(yǎng)物質(zhì)攝入量及沉積量建立回歸方程的方法進(jìn)行估測，在已知體重和增重情況數(shù)據(jù)的前提下通過建立回歸方程的方法推算其體組成沉積量，最終確定其生長需要量，再將各部分的營養(yǎng)需要量疊加最終獲得總營養(yǎng)需要量。

1．4．1 生長性能

比較屠宰試驗(yàn)正試期前1天17：00稱重，記作各屠宰批次試驗(yàn)羊的初始LBW；所有試驗(yàn)羊每隔1周稱重1次（晨飼前空腹稱重），結(jié)合正試期內(nèi)試驗(yàn)羊的日采食量記錄，用于統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)羊的平均日增重（ADG）、干物質(zhì)采食量（DMI）和料重比。各屠宰批次試驗(yàn)羊在屠宰前禁食16 h后稱重，記作SBW；通過屠宰測定中得到的消化道內(nèi)容物重量計(jì)算排空體重（empty body weight，EBW）。

1．4．2 初始體氮含量的預(yù)測和氮沉積量（retained N，RN）的計(jì)算

首先，利用比較屠宰試驗(yàn)A屠宰批次試驗(yàn)羊的體氮含量（各個屠宰樣本氮含量之和）與EBW，EBW與SBW以及SBW與LBW建立相應(yīng)的異速回歸方程，隨后將B、C、D和E屠宰批次試驗(yàn)羊初始LBW代入上述回歸方程中依次計(jì)算得到上述各屠宰批次試驗(yàn)羊的初始體氮含量，各個屠宰批次試驗(yàn)羊RN根據(jù)其屠宰樣本測定所得的體總氮含量實(shí)測值與的初始體總氮含量預(yù)測值之差計(jì)算而得。

1．4．3 氮攝入量（N intake，NI）的計(jì)算

通過消化代謝試驗(yàn)，對投喂樣、剩料樣、糞便樣和尿樣中氮含量進(jìn)行測定，計(jì)算氮表觀消化率。

氮表觀消化率（%）＝100×（攝入氮－糞氮）／攝入氮。

結(jié)合比較屠宰試驗(yàn)中試驗(yàn)羊的采食量記錄，可計(jì)算出比較屠宰試驗(yàn)羊在正試期的總氮攝入量（total N intake，TNI）、日均氮攝入量（average daily N intake，ADNI），并用于后期的回歸方程的建立。

1．4．4 維持凈蛋白質(zhì)需要量的計(jì)算

根據(jù)比較屠宰試驗(yàn)氮平衡的結(jié)果，建立相對RN與NI的線性回歸關(guān)系：

RN＝a＋b×NI。

式中：截距a即為氮維持需要量（即內(nèi)源尿氮和代謝糞氮之和）（g／kg SBW0．75），所得結(jié)果乘以6．25即為維持凈蛋白質(zhì)需要量（g／kg SBW0．75）。

1．4．5 生長凈蛋白質(zhì)需要量的計(jì)算

根據(jù)比較屠宰試驗(yàn)AL組數(shù)據(jù)，建立RN與EBW的異速回歸關(guān)系：

lgRN＝a＋b×lgEBW。

由此關(guān)系反推不同體重的蛋白質(zhì)沉積量，即為該體重水平的生長凈蛋白質(zhì)需要量。例如20 kg體重平均日增重300 g／d的生長凈蛋白質(zhì)需要量可由20．3與20．0 kg體重下的兩者蛋白質(zhì)沉積之差得到。

1．5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)

所有數(shù)據(jù)在使用Excel 2013進(jìn)行初步整理（小數(shù)點(diǎn)定標(biāo)及對數(shù)Logistic模式進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理）之后，用SPSS 17．0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有數(shù)據(jù)在進(jìn)行相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)分析前需要采用柯爾莫諾夫－斯米爾諾夫法（Kolmogorov?Smirnov goodness?of?fit test）檢驗(yàn)變量是否符合正態(tài)分布規(guī)律，對于符合正態(tài)分布的變量可直接使用單因素方差分析（one?way ANOVA）進(jìn)行差異性檢驗(yàn)，并用Tur?key’s法進(jìn)行多重比較，當(dāng)方差分析輸出P＜0．05時表明差異顯著，P＞0．05時表明差異不顯著。結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。線性回歸分析使用PROC REG模型進(jìn)行。

2　結(jié)果與分析

2．1 不同屠宰批次母羔的生長性能和屠宰性能

由表2可知，A、B、C、D和E屠宰批次初始LBW差異不顯著（P＞0．05）；如試驗(yàn)設(shè)計(jì)，B和C屠宰批次試驗(yàn)羊的DMI均顯著高于D和E屠宰批次（P＜0．05）；采食量水平顯著影響各屠宰批次試驗(yàn)羊的末期LBW、ADG和料重比（P＜0．05），AL組（B和C屠宰批次）料重比顯著低于限飼組（D和E屠宰批次）；就屠宰性能而言，5個屠宰批次試驗(yàn)羊的屠宰率、凈肉率差異均不顯著（P＞0．05）；AL組（A、B和C屠宰批次）肉骨比高于限飼組［D（P＞0．05）和E屠宰批次（P＜0．05）］。

表2　不同屠宰批次杜湖雜交F1代母羔的生長性能和屠宰性能Table 2 Growth and slaughter performance of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs of different slaughter batches

2．2 采食量水平對母羔氮代謝的影響

由表3可知，消化代謝試驗(yàn)中AL組DMI分別比LR和HR組高47．41%和106．02%（P＜ 0．05）；TNI和糞氮排出量均隨著采食量的增加而顯著升高（P＜0．05）；HR組尿氮排出量顯著低于AL組（P＜0．05），其余各組間差異不顯著（P＞0．05）；AL組氮表觀消化率顯著高于LR和HR組（P＜0．05），其余各組間差異不顯著（P＞0．05）。

表3　采食量水平對杜湖雜交F1代母羔氮代謝的影響Table 3 Effects of feeding level on N metabolism of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs

2．3 不同屠宰批次母羔體組成及蛋白質(zhì)在各組織間的分布

由表4可知，通過對自由采食飼喂處理的試驗(yàn)羊（A、B和C屠宰批次）體組成比較后發(fā)現(xiàn)，在自由采食飼喂條件下，骨骼和肌肉占EBW比例隨著月齡的增加顯著降低（P＜0．05），A屠宰批次（4月齡）最高，B屠宰批次（5月齡）次之，C屠宰批次（6月齡）最低；C屠宰批次胴體脂肪占EBW比例顯著高于A和B屠宰批次（P＜0．05）；3個批次內(nèi)臟占EBW比例差異不顯著（P＞0．05），但有隨著周齡增加而降低的趨勢；總脂肪占EBW比例隨月齡增加而升高，C屠宰批次顯著高于A組（P＜0．05）。對于相同月齡的不同采食量水平的試驗(yàn)羊（C、D和E屠宰批次），骨骼、胴體脂肪、總脂肪、內(nèi)臟和肌肉占EBW比例均顯著受采食量水平的影響，其中AL組（C屠宰批次）的骨骼和肌肉占EBW比例均顯著低于限飼組（D和E屠宰批次）（P＜0．05）；胴體脂肪、總脂肪和內(nèi)臟占EBW比例均隨著采食量的增加而升高（P＜0．05），AL組（C屠宰批次）最高，HR組（E屠宰批次）最低，2個限飼組（D和E屠宰批次）體脂肪和內(nèi)臟占EBW比例差異均不顯著（P＞0．05）。

肌肉蛋白質(zhì)占BP比例在5個屠宰批次間差異不顯著（P＞0．05）。從BP分布來看，自由采食的試驗(yàn)羊（A、B和C屠宰批次）間比較，隨著月齡的增加，胴體脂肪、內(nèi)臟脂肪、總脂肪中蛋白質(zhì)占BP比例出現(xiàn)顯著增加（P＜0．05）；其中C屠宰批次（6月齡）胴體脂肪蛋白質(zhì)占BP比例顯著高于A （4月齡）和B屠宰批次（5月齡）（P＜0．05）；B和 C屠宰批次內(nèi)臟脂肪蛋白質(zhì)占BP比例顯著高于A屠宰批次（P＜0．05）；C屠宰批次總脂肪蛋白質(zhì)占BP比例顯著高于A屠宰批次（P＜0．05）。對于相同月齡的不同采食量水平的試驗(yàn)羊（C、D和E屠宰批次），隨著采食量水平的升高，胴體脂肪、內(nèi)臟、總脂肪中蛋白質(zhì)占BP比例均出現(xiàn)顯著增加（P＜0．05），骨骼蛋白質(zhì)占BP比例則出現(xiàn)顯著降低（P＜0．05）；其中，AL組胴體脂肪、內(nèi)臟中蛋白質(zhì)占BP比例顯著高于LR和HR組（P＜0．05），總脂肪蛋白質(zhì)占BP比例顯著高于HR組（P＜0．05），骨骼蛋白質(zhì)占BP比例顯著低于LR和HR組（P＜0．05）。

2．4 維持凈蛋白質(zhì)需要量

由表5可知，5個屠宰批次試驗(yàn)羊的初始LBW和初始BP含量差異均不顯著（P＞0．05）；B 和C屠宰批次間RN和NI差異不顯著（P＞0．05），但均顯著高于D和E屠宰批次（P＜0．05）。建立RN（g／kg SBW0．75）與NI（g／kg SBW0．75）的回歸方程：Rn＝（－0．260 7±0．054 4）＋（0．272 8± 0．031 1）×NI（圖1）。由此計(jì)算出，4～6月齡杜湖雜交F1代母羔的維持凈氮的需要量為261 mg／kg SBW0．75，換算為維持凈蛋白質(zhì)需要量為1．63 g／kg SBW0．75。

2．5 生長凈蛋白質(zhì)需要量

如圖2所示，BP（g）含量與EBW（kg）的回歸方程為：lgBP＝（2．952±0．261 8）＋（0．562± 0．169 2）×lgEBW；由此計(jì)算可知，4～6月齡杜湖雜交F1代母羔生長蛋白質(zhì)需要量為9．83～25．08 g／d（表6）。

表4　不同屠宰批次杜湖雜交F1代母羔體組成及蛋白質(zhì)在各組織間的分布Table 4 Body composition and protein distribution in various tissues of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs of different slaughter batches

表5　不同屠宰批次杜湖雜交F1代母羔體蛋白質(zhì)沉積Table 5 BP deposition of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs of different slaughter batches

3　討 論

動物的維持凈蛋白質(zhì)需要量反映了包括代謝糞蛋白質(zhì)（MFCP）和內(nèi)源性尿蛋白質(zhì)（EUCP）在內(nèi)的氮損失總量。根據(jù)NRC（2007）［2］的介紹，MFCP最常用的預(yù)測方法是利用飼糧中可消化粗蛋白質(zhì)（digestible CP concentration，DCPC）含量與飼糧粗蛋白質(zhì)含量（total CP concentration，TCPC）建立回歸方程，所建立回歸方程的截距即為所得的結(jié)果。利用此種方法，推導(dǎo)出4～6月齡杜湖雜交F1代母羔DCPC（g／kg）與TCPC（g／kg）的回歸方程：DCPC＝（－4．446±1．522）＋（1．099± 0．160 3）×TCPC（R2＝0．83，P＝0．07）。由此可知，4～6月齡杜湖雜交F1代母羔的MFCP損失量占DMI比例為4．45%［每采食1 kg試驗(yàn)飼糧所損失的粗蛋白質(zhì)（CP）為44．5 g］；MFCP的單位既可以使用占DMI比例，也可以使用占不可消化干物質(zhì)（indigestible DM）比例來表示，相較而言，使用后者具有更高的準(zhǔn)確性［2］，但是利用上述2種單位進(jìn)行MFCP描述時，均需要增添額外的工作量，如對DMI、DM消化率或者兩者同時測定；且考慮到營養(yǎng)需要量大多皆以體重為單位進(jìn)行表述，故在品種間體重差異不明顯的前提下，利用體重為單位來描述MFCP可能會更加適用，NRC也曾在2000版［1］中將MFCP以體重為單位進(jìn)行量化描述，此方法可以減少對DMI測定的工作量。在本試驗(yàn)中，將MFCP以體重為單位進(jìn)行換算后可知，4～6月齡杜湖雜交F1代母羔每kg體重的MFCP損失量為1．30 g。對于EUCP而言，其使用頻率往往低于MFCP，但是在精確度方面卻優(yōu)于MFCP。根據(jù)SCA（1990）［24］的介紹，EUCP會隨著必需氨基酸（AA）的強(qiáng)制性氧化而升高，并反映了動物的蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)過程。依據(jù)Luo等［25］介紹的方法，利用尿氮排出量（UN，g／kg BW）與表觀可消化氮攝入量（ADNI，g／kg BW）建立回歸方程：UN＝（0．125 1±0．006 4）＋（0．186 3±0．021 1）×ADNI （R2＝0．89，P＝0．004）；可知4～6月齡杜湖雜交F1代母羔內(nèi)源性尿氮損失為0．125g／kg BW0．75，換算為EUCP損失量為0．78 g／kg BW0．75。結(jié)合上述結(jié)果，由EUCP與MFCP之和（2．08 g／kg BW0．75）高于本試驗(yàn)中利用NI與RN建立回歸關(guān)系所得的維持凈蛋白質(zhì)需要量（1．76 g／kg BW0．75）。對于上述結(jié)果，我們認(rèn)為MFCP預(yù)測方法所得結(jié)果主要包括組織細(xì)胞新陳代謝過程中脫落的細(xì)胞上皮細(xì)胞、酶類物質(zhì)，但消化道微生物細(xì)胞碎片，而消化道微生物并不屬于真正的內(nèi)源性損失［2］，并由此推測，該預(yù)測方法可能會高估MFCP，從而引起維持凈蛋白質(zhì)需要量預(yù)測值偏高。

圖1　4～6月齡杜湖雜交F1代母羔氮沉積量與氮攝入量的回歸關(guān)系Fig．1 Regression relationship between RN and NI of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs aged 4 to 6 months

圖2　4～6月齡杜湖雜交F1代母羔體蛋白質(zhì)含量與排空體重的回歸關(guān)系Fig．2 Regression relationship between BP content and EBW of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs aged 4 to 6 months

表6　4～6月齡杜湖雜交F1代母羔生長凈蛋白質(zhì)需要量Table 6 Net protein requirement for growth of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs aged 4 to 6 months　 g／d

與前人所得試驗(yàn)結(jié)果對比我們發(fā)現(xiàn)，本試驗(yàn)所得的4～6月齡杜湖雜交F1代母羔的維持凈蛋白質(zhì)需要量（1．63 g／kg SBW0．75）比許貴善［15］就杜寒雜交公羔（1．86 g／kg SBW0．75）和母羔（1．82 g／kg SBW0．75）所報道的結(jié)果分別低12%和10%。Galvani等［26］報道了特克賽爾雜交公羔羊的維持凈氮需要量為243 mg／kg SBW0．75，換算為維持凈蛋白質(zhì)需要量為1．52 g／kg SBW0．75，其結(jié)果比本試驗(yàn)所得結(jié)果低6．75%。王鵬［18］在以杜泊羊小尾寒羊雜交肉羊?yàn)樵囼?yàn)對象的研究中認(rèn)為20～35 kg該品種肉羊的維持凈蛋白質(zhì)需要量為1．68 g／kg SBW0．75，略高于本試驗(yàn)結(jié)果。本試驗(yàn)所報道的杜湖雜交F1代母羔維持凈蛋白質(zhì)需要量與Gonzaga等［27］對細(xì)毛羊的研究結(jié)果（2．07 g／kg SBW0．75）相比較低，約為其所報道結(jié)果的78．75%。維持凈蛋白質(zhì)需要量結(jié)果的差異主要源于不同研究中試驗(yàn)羊的品種，試驗(yàn)條件和研究方法之間的差異。

體組成變化和體營養(yǎng)成分沉積規(guī)律對動物營養(yǎng)需要量研究具有很重要的意義，動物機(jī)體各組織的生長構(gòu)成了整個機(jī)體的生長，不同生長階段各組織間的發(fā)育速度也存在著差異。本試驗(yàn)中使用的杜湖雜交F1代母羔在4～6月齡生長階段，各組織中僅有脂肪（包括胴體脂肪和內(nèi)臟脂肪）占EBW比例呈上升趨勢，其余各組織均呈降低的趨勢，上述結(jié)果均表明該生長階段試驗(yàn)動物的生長以脂肪生長為主，且晚于骨骼、肌肉和內(nèi)臟的發(fā)育。屠宰期均為6月齡的不同限飼處理動物體組成也具有一定規(guī)律性的變化：限飼組試驗(yàn)羊骨骼、內(nèi)臟和肌肉占EBW比例的上升，而總脂肪（胴體脂肪、內(nèi)臟脂肪）比例的下降。上述結(jié)果表明，相對與AL組羊而言，限飼處理試驗(yàn)羊均出現(xiàn)營養(yǎng)不良所引起的生長發(fā)育受阻滯后現(xiàn)象，其中表現(xiàn)最明顯的為內(nèi)臟，LR和HR組（6月齡）內(nèi)臟占EBW比例不僅低于同月齡的AL組，也低于較低月齡（4、5月齡）自由采食的試驗(yàn)羊。我們推測認(rèn)為引起這種變化最主要的原因?yàn)椋簞游镌跔I養(yǎng)攝入嚴(yán)重不足的情況下，機(jī)體會被動通過一系列生理反應(yīng)以減少維持營養(yǎng)需要輸出；根據(jù)Seve等［28］的報道，占BP比例僅僅為7%～8%的內(nèi)臟（消化道＋肝臟）卻提供了50%的BP周轉(zhuǎn)率，而肌肉的蛋白質(zhì)占BP比例高達(dá)30%～45%，但僅僅提供了約20% 的BP周轉(zhuǎn)率，因此他們認(rèn)為與外周組織相比，內(nèi)臟比例的高低對動物機(jī)體的維持營養(yǎng)需要量有決定性的作用。依據(jù)上述觀點(diǎn)及本試驗(yàn)結(jié)果，我們推測在限飼條件下，試驗(yàn)動物通過降低增耗較高的內(nèi)臟來降低其維持需要量，以適應(yīng)營養(yǎng)供給不足的飼養(yǎng)環(huán)境。

本試驗(yàn)中由不同屠宰批次BP分布結(jié)果可知，經(jīng)自由采食處理的4～6月齡杜湖雜交F1代母羔骨骼、胴體脂肪、內(nèi)臟脂肪、內(nèi)臟、總脂肪和肌肉組織蛋白占BP比例的變化范圍分別為25．22%～23．11%、2．99%～4．16%、0．95%～1．67%、22．63%～23．43%、4．08%～5．99%和48．10%～47．69；胴體脂肪、內(nèi)臟脂肪占BP比例隨月齡的增加而上升，骨骼和肌肉中蛋白質(zhì)占BP比例隨著月齡的增加而降低，表明4～6月齡生長階段胴體脂肪和內(nèi)臟脂肪生長速度高于骨骼和內(nèi)臟。雖然4～6月齡均為胴體脂肪和內(nèi)臟脂肪優(yōu)勢生長期，但兩者的發(fā)育時間卻存在著某些差異，由本試驗(yàn)結(jié)果可知，4～5月齡生長階段內(nèi)臟脂肪沉積速率顯著高于5～6月齡生長階段（內(nèi)臟脂肪蛋白質(zhì)占BP比例的增長幅度0．95%～1．53%vs．1．53%～1．67%）；相較而言，5～6月齡生長階段為胴體脂肪分化生長優(yōu)勢階段，該生長階段胴體脂肪蛋白質(zhì)沉積速率顯著高于4～5月齡生長階段（胴體脂肪蛋白質(zhì)占BP比例的增長幅度2．99%～2．96%vs．2．96%～4．16%）。本試驗(yàn)中，杜湖雜交F1代母羔在相同ADG水平下，生長凈蛋白質(zhì)需要量隨著體重的升高而顯著降低，以ADG同為200 g／d為例，50 kg體重階段生長凈蛋白質(zhì)需要量為16．73 g／d，相較于35 kg體重試驗(yàn)羊的生長凈蛋白質(zhì)需要量（19．65 g／d）降低了14．86%，我們認(rèn)為，這種差異極有可能是由于BP比例隨著體重增加而降低所造成的，該觀點(diǎn)與許貴善［15］和王鵬［18］的觀點(diǎn)相吻合。由上述結(jié)果推測可知，不同品種、月齡和性別間試驗(yàn)羊維持和生長凈蛋白質(zhì)需要量結(jié)果主要取決于體成熟階段的差異，蛋白質(zhì)合成高峰期也相應(yīng)有著差異性，無論從維持還是生長凈蛋白質(zhì)需要量角度來看，體成熟度較低的試驗(yàn)羊都應(yīng)當(dāng)有著較高的蛋白質(zhì)需要量。

4　結(jié) 論

①4～6月齡杜湖雜交F1代母羔的內(nèi)源性氮損失量為261 mg／kg SBW0．75，換算為維持凈蛋白質(zhì)需要量為1．63 g／kg SBW0．75。

②該品種肉羊在35～50 kg體重階段，ADG 為100～300 g／d的生長凈蛋白質(zhì)需要量為9．83～25．08 g／d。

③本試驗(yàn)建立了利用RN與NI估測4～6月齡杜湖雜交F1代母羔維持凈蛋白質(zhì)需要量的模型以及BP含量與EBW估測生長蛋白質(zhì)需要量的模型。

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（編輯 王智航）

Net Protein Requirement of Dorper and Hu Crossbred F1Ewe Lambs Aged 4 to 6 Months

NIE Haitao1XIAO Shenhua1?LAN Shan1ZHANG Hao1WANG Ziyu1WANG Feng1，2??
（1．Jiangsu Engineering Technology Research Center of Meat Sheep＆Goat Industry，Nanjing Agricultural University，Nanjing 210095，China；2．Research Center of Haimen Goats，Nanjing Agricultural University，Nanjing 210095，China）

?Contributed equally

??Corresponding author，professor，E?mail：caeet＠njau．edu．cn

Abstract：This study was conducted to investigate the protein metabolism rules and determine the net protein requirement of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs aged 4 to 6 months．Forty two four?month?old Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs［（35．68±1．68）kg］were used，comparative slaughter trail（n＝30）and di?gestive and metabolic trail（n＝12）were conducted，and factorial method was used to explore the method of predicting net protein requirement for maintenance and growth．Comparative slaughter trail：on day 1 of experi?mental period，six ewes were randomly chosen and killed（slaughter batch A，n＝6），the rest 24 ewes were divided into 3 groups，which were ad libitum（AL）group（n＝12），low?restricted（LR）group（n＝6）and high?restricted group（HR，n＝6）．When the average body weight（BW）of ewes in AL group reached 42 kg，six from twelve ewes in AL group were chosen and killed（slaughter batch B，n＝6），when the rest 6 ewes in AL group reached 50 kg of average BW，ewes in AL，LR and HR groups were killed as slaughter batches C，D and E（n＝6），respectively．Digestive and metabolic trail：twelve ewes were divided into three groups（n＝4）the same as comparative slaughter trial．The trial included 7 days for adaptation and 5 days for formal trial．The results showed as follows：endogenous nitrogen loss of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs aged 4 to 6 months was 261 mg／kg SBW0．75（SBW＝shrunk BW），and it corresponded to net protein for maintenance of 1．63 g／kg SBW0．75．Ewes with 35 to 50 kg BW and ADG ranging from 200 to 300 g／d had net protein re?quirement for growth from 9．83 to 25．08 g／d．In conclusion，models for predicting net protein requirements for maintenance and growth of Dorper and Hu crossbred F1ewe lambs are set in the experiment using retained ni?trogen and nitrogen intake，and body protein content and empty BW，respectively．［Chinese Journal of Ani?mal Nutrition，2015，27（1）：93?102］

Key words：Dorper sheep；Hu sheep；crossed F1；ewe lambs；net protein requirement

作者簡介：聶海濤（1986—），男，安徽蚌埠人，博士研究生，從事反芻動物營養(yǎng)方向研究。E?mail：niehaitao＿2005＠126．com

基金項(xiàng)目：國家肉羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（CARS?39）；公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)（201303143）；江蘇省農(nóng)業(yè)三新工程項(xiàng)目（SXGC［2014］306）

收稿日期：2014－07－04

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．01．013

文章編號：1006?267X（2015）01?0093?10

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

中圖分類號：S826