維藥榅桲多糖抗血栓作用及其機(jī)制研究

美合日阿依·伊薩克，馬虎，周文婷，艾尼瓦爾·吾買爾

(新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，新疆 烏魯木齊830011)

Anti-thrombotic effect of polysaccharide ofCydoniaoblongaMill and its mechamism

ISAK Mihray，MA Hu，ZHOU Wen-ting, UMAR Anwar

(DeptofPharmacology，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011，China)

榅桲(CydoniaoblongaMill，COM)具有降血壓、調(diào)血脂、補(bǔ)血、補(bǔ)腎、止瀉、利尿等功效。還有資料報(bào)道榅桲具有抗氧化、抗菌作用。其果實(shí)含有糖類、黃酮類、生物堿類、氨基酸及多肽、鞣質(zhì)、有機(jī)酸、揮發(fā)油等成分[1]，其中糖類含量最高。目前，在國內(nèi)外尚未見到榅桲果實(shí)多糖結(jié)構(gòu)及藥理活性的相關(guān)報(bào)道。大量研究證明，植物多糖具有增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤、抗病毒、抗突變、抗衰老、抗凝血、降血糖和環(huán)境治理等生物學(xué)效應(yīng)[2-5]。本文就榅桲果實(shí)多糖對(duì)大鼠動(dòng)、靜脈血栓形成的影響進(jìn)行了研究，探討其抗血栓作用及其可能的機(jī)制，為進(jìn)一步篩選抗血栓有效部位提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料

1.1儀器臺(tái)式高速離心機(jī)(KH-120M，上海安亭科技儀器廠)，酶標(biāo)儀(Model-680，日本)，放射免疫計(jì)數(shù)器(GC-2016 γ，中國科大中佳公司)，全自動(dòng)血凝分析儀(德國)。

1.2藥物與動(dòng)物榅桲果實(shí)多糖(自提)，阿司匹林(Sigma，No2000641) ，銀杏葉片(天津天士力制藥有限公司，批號(hào)259)；SPF 級(jí)Wistar 大鼠96只，♂，體質(zhì)量220～260 g，均由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào): SCXK( 新)2011-0004。

2方法

2.1分組及給藥大鼠隨機(jī)分成6組，即:空白組、阿司匹林組(5 mg·kg-1)、銀杏葉片組(20 mg·kg-1)、榅桲果實(shí)多糖低、中、高(50、100、200 mg·kg-1)劑量組，每組8只。灌胃給藥15 d，每天1次，容積為10 mL·kg-1。

2.2實(shí)驗(yàn)方法末次給藥1 h 后腹腔注射3%戊巴比妥鈉(5 mL·kg-1) 麻醉，參照文獻(xiàn)[6-7]的方法改良制作血栓模型，剪下血栓發(fā)生部位的血管，取出血栓。腹主動(dòng)脈取血，枸櫞酸鈉1 ∶9 抗凝，混勻后3 000 r·min-1離心15 min，收集血漿，分裝,凍存于-80℃。

2.3指標(biāo)測定稱血栓重量，計(jì)算血栓抑制率，測定影響凝血、纖溶及血小板功能的指標(biāo)。

3結(jié)果

3.1榅桲果實(shí)多糖對(duì)血栓重量的影響中、高劑量組均能減輕動(dòng)、靜脈血栓重量，抑制血栓形成，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(Tab 1)。

GroupDose/mg·kg-1ArteryWWT/mgInhibitoryrate/%VenaWWT/mgInhibitoryrate/%Control-9.63±1.55-6.14±0.73-Aspirin54.84±0.87*49.85±4.14*1.48±0.29*75.86±4.52*Ginkgoleaftablets205.21±1.00*46.11±4.60*2.70±1.43*56.12±6.35*Lowdose508.40±0.9310.21±5.324.08±1.4033.42±5.21Middledose1006.51±0.64*32.41±2.75*3.22±2.05**47.55±4.46**Highdose2005.97±1.85*40.64±6.04*2.15±1.54**64.81±5.38**

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

3.2榅桲果實(shí)多糖對(duì)凝血功能的影響高劑量組對(duì)個(gè)別指標(biāo)略有影響，而低、中劑量組均沒有影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Tab 2)。

GroupDose/mg·kg-1TT/sPT/sAPTT/sFIB/g·L-1AT-Ⅲ/ng·L-1PC/mg·L-1D-D/pg·L-1Control-30.88±3.2816.86±0.8225.20±3.861.95±0.5158.52±1.593.10±0.432833.5±654.17Aspirin540.18±1.29**18.80±2.08**38.41±0.74*1.87±0.1361.58±6.17*3.16±0.082545.7±153.76**Ginkgoleaftablets2039.38±1.06**18.16±1.94*33.88±1.22*1.74±0.1060.01±4.083.09±0.142708.6±262.57*Lowdose5032.01±1.3816.16±1.6127.66±4.191.79±0.1456.05±0.752.94±0.062418.9±123.77**Middledose10033.76±1.2216.27±1.8228.41±5.741.80±0.1357.54±3.863.03±0.142779.4±151.37Highdose20037.30±1.28**16.92±5.1533.71±1.59*1.67±0.2062.63±4.48*3.13±0.142544.4±175.33**

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

3.3榅桲果實(shí)多糖對(duì)纖溶功能的影響高劑量組能提高PLG含量(P<0.05), t-PA、 PAI-1均略有變化,但差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Tab 3)。

Tab 3Effect of COM polysaccharides on

GroupDose/mg·kg-1PLG/μg·L-1t-PA/ng·L-1PAI-1/ng·L-1Control-839.30±22.6810.49±3.20320.83±90.48Aspirin5932.62±66.83**13.92±1.27*332.50±35.67Ginkgoleaftablets20872.15±70.42*13.44±1.47314.18±34.83*Lowdose50812.01±45.579.66±1.24412.81±73.34Middledose100827.86±135.3112.69±1.37369.60±36.85Highdose200914.38±86.17*13.76±1.13319.56±36.95

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

3.4榅桲果實(shí)多糖對(duì)血小板功能的影響中、高劑量組均明顯升高6-keto-PGF1α含量(P<0.01)；降低VWF、TXB2含量(P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Tab 4)。

Tab 4Effect of COM polysaccharides on

GroupDose/mg·kg-1VWF/ng·L-1P-selectin/ng·L-16-keto-PGF1α/ng·L-1TXB2/ng·L-1Control-1777.7±144.5215.94±0.6020.13±4.67430.48±39.49Aspirin51706.3±50.49*13.90±1.2519.54±1.33107.48±16.75**Ginkgoleaftablets201714.3±50.46*13.34±1.0318.86±1.3288.66±9.33**Lowdose501774.1±61.0214.83±0.9820.73±1.46281.30±36.34Middledose1001684±44.48*14.18±1.3629.50±1.42**112.75±28.87**Highdose2001675±48.75*13.48±0.2239.11±7.05**105.92±23.75**

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

4討論

血小板參與血栓形成過程的許多環(huán)節(jié)，在血栓形成過程中起核心作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，榅桲果實(shí)多糖對(duì)于凝血、纖溶系統(tǒng)的影響不明顯；而能減輕血栓重量，抑制血栓形成；升高具有抑制血小板聚集作用的PGI2代謝產(chǎn)物6-keto-PGF1α含量，降低體內(nèi)強(qiáng)效的血小板聚集劑TXA2代謝產(chǎn)物TXB2含量。TXB2和6-keto-PGF1α相互作用，抑制血小板聚集，從而抑制血栓形成。VWF是反映血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的相對(duì)特異的血液學(xué)指標(biāo)，是血小板黏附起點(diǎn)，VWF明顯升高，表明內(nèi)皮功能損傷，內(nèi)皮損傷為血小板黏附聚集和血栓形成提供結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)中榅桲果實(shí)多糖降低VWF含量而抑制血栓形成。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示榅桲果實(shí)多糖抗血栓作用主要與抑制血小板黏附和聚集有關(guān)。由于僅做了體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，而參與血栓形成的因素很多，這有待于做進(jìn)一步的研究和探索論證。

參考文獻(xiàn):

[1]周文婷，鄔利婭·伊明，阿迪力·阿布都熱合曼，等. 榅桲不同藥用部位對(duì)腎性高血壓大鼠血壓及血液流變學(xué)指標(biāo)的影響[J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(22):254-8.

[1]Zhou W T,Abdurahma A,Yiming W,et al. Influence of different parts ofCydoniaoblongaMill．(COM) on blood pressure and hemorheology parameter in renal hypertensive rats[J].ChinJExpTraditMedForm,2013，19(22):254-8.

[2]黃建琴，聶少平，張莘莘，等. 黑靈芝多糖對(duì)S-180 荷瘤小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用[J]. 中國藥理學(xué)通報(bào)，2014，30(5)：739-40.

[2]Huang J Q, Nie S P, Zhang S S，et al. Immunomodulatory activities of polysaccharide from Ganoderma atrum on S-180 tumor-bearing mice[J].ChinPharmacolBull,2014，30(5)：739-40.

[3]孫陽，楊婧，張琪琪，等. 紅花多糖對(duì)肝癌細(xì)胞增殖阻滯的機(jī)制探討[J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2014，20(13):156-9.

[3]Sun Y，Yang J，Zhang Q Q，et al. Mechanism investigation of cell cycle arrest in hepatic cancer cell induced by safflower polysaccharide[J].ChinJExpTraditMedForm, 2014，20(13):156-9.

[4]趙楊，王生，陶麗,等. 海參粘多糖對(duì)腫瘤細(xì)胞介導(dǎo)的凝血過程的影響[J]. 中國藥理學(xué)通報(bào),2012,28(6):797-802.

[4]Zhao Y,Wang S,Tao L,et al.Effects of holothurian glycosaminologlycan on coagulation process medieted by tumor cells[J].ChinPharmacolBull,2012,28(6):797-802.

[5]洪德志，時(shí)連根. 桑枝多糖對(duì)糖尿病模型小鼠的降血糖作用[J]. 中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2012,26(6)：806-9.

[5]Hong D Z,Shi L G.Hypoglycemic effect of polysaccharides in Ramulus Morion diabetic model mice[J].ChinJPharmacolToxicol, 2012,26(6)：806-9.

[6]Kurz K D，Main B W，Sandusky G E. Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride[J].ThrombRes，1990，60(4):269-80.

[7]Reyer L. Failure of aspirin at different doses to modify experimental thrombosis in rat[J].ThrombRes，1980，18(5):669-74.

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2015-1-9 13:37網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/doi/10.3969/j.issn.1001-1978.2015.02.030.html

中國圖書分類號(hào)：R-332；R284.1；R364.15；R973.2

關(guān)鍵詞:榅桲；多糖；抗血栓； 抗凝血；抗血小板；機(jī)制

Key words:Cydonia oblonga;polysaccharides;anti-thrombosis;anticoagulant;antiplatelet; mechanism

通訊作者艾尼瓦爾·吾買爾(1962-)，男，博士，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向:心血管藥理學(xué)，,Tel：0991-4365602，E-mail:anwar.umar@126.com

作者簡介：美合日阿依·伊薩克(1988-)，女，碩士生，研究方向：心血管藥理學(xué)，E-mail:mhray88@126.com;

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金(地區(qū)基金)資助項(xiàng)目(No 81260490)

收稿日期:2014-10-13,修回日期:2014-10-31

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001-1978(2015)02-0295-02

doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2015.02.030