■張文靜 雷連成 魏靜元 李亮亮 李曉更

（1.吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，吉林長春 130062；2.遼寧省分析科學(xué)研究院，遼寧沈陽 110015；3.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)，遼寧沈陽 110161；4.丹東市寬甸縣青椅山鎮(zhèn)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，遼寧丹東 118000）

植物精油在植物學(xué)上作為精油（essential oil）或香精油（etheral oil），是一類植物源次生代謝物質(zhì)，具揮發(fā)性。因其具有抗菌、抗氧化等作用引起廣泛的關(guān)注（DominiqueBaudoux等，2002；孫偉等，2005）。由于養(yǎng)殖密度大，肉雞生長迅速，導(dǎo)致肉雞飼養(yǎng)越來越艱辛，一方面疾病增多，肉雞抵抗力差；另一方面加大藥物投入的同時，藥殘問題凸顯，使民眾消費(fèi)雞肉熱情降低。植物精油在肉雞上應(yīng)用的報道雖然不多,但在反芻、豬等應(yīng)用得較多，且取得了很好的效果（劉猛等，2011）。在肉雞上的報道卻不完全一致，添加量也從20～200 mg/kg變化很大。其原因應(yīng)該與精油的質(zhì)量、添加水平、配伍等有關(guān)（張克英，2006）。植物精油來源于自然界的植物，種類繁多，再加上植物精油本身成分復(fù)雜，每種精油含有幾十種或上百種成分（G.J.迪爾斯，2000），這也應(yīng)該是造成添加水平和使用效果不一致的原因之一；再加之價格相對于肉仔雞行業(yè)，大部分比較昂貴，所以給精油在養(yǎng)殖和治療上的應(yīng)用帶來困難。但由于其安全、環(huán)保，生理活性明確，是理想的飼料添加劑，所以有必要對其進(jìn)行相關(guān)試驗，尋找適宜的添加量和最為有效的成分，以降低成本，為其合理使用提供依據(jù)。本試驗所用植物精油采用丁香酚、百里香酚、香芹酚復(fù)合而成，以AA肉雞為研究對象，通過對生長性能指標(biāo)、屠宰性能指標(biāo)和免疫器官指數(shù)、溶菌酶和免疫球蛋白IgG的測定和分析，以確定本復(fù)合植物精油的最適添加量，并探討其對生長、屠宰、免疫性能影響的原因，為其在肉雞上的應(yīng)用提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

肉種雞飼養(yǎng)場購買1日齡活潑健康的肉仔雞，體重相近，公、母各半。

1.1.2 試劑

復(fù)合植物精油，主要成分為百里香酚、香芹酚和丁香酚。

1.2 試驗設(shè)計

采用單因子試驗設(shè)計，480只1日齡肉仔雞雛雞隨機(jī)分成4組，每組6個重復(fù)。具體試驗分組見表1?；A(chǔ)日糧營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)按美國NRC水平設(shè)計，分為1～21日齡、22～42日齡兩階段，42日齡出欄，所以試驗時間為42 d。日糧按配方生產(chǎn)后，考慮原料及加工變異，為保證試驗效果對主要營養(yǎng)成分進(jìn)行化學(xué)分析?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。因復(fù)合植物精油具有一定的揮發(fā)性，所以試驗前現(xiàn)用現(xiàn)配，采用逐級預(yù)混的方式，并注意密封保存。

表1 試驗分組及日糧組成

1.3 飼養(yǎng)管理

按飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)要求控制雞舍光照、溫度、濕度、飼養(yǎng)密度，全天采食，自由飲水。每天觀察雞群狀態(tài)，定期雞舍通風(fēng)和清除糞便，按飼養(yǎng)程序操作，保證雞群健康生長。如發(fā)現(xiàn)病死，及時記錄并淘汰，同時重新統(tǒng)計飼料消耗。

1.4 測試指標(biāo)和方法

1.4.1 生長性能

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（以飼喂?fàn)顟B(tài)為基礎(chǔ)）

于試驗第1 d入舍稱重，在21日齡、42日齡清晨空腹稱重，同時記錄飼料消耗數(shù)量，按下列公式計算得出平均日增重、平均日采食量、料重比。

平均日采食量[g/（只·d）]=總耗料量（g）/（只數(shù)×飼養(yǎng)天數(shù)）；

平均日增重[g/（只·d）]=總體增重（g）/（只數(shù)×飼養(yǎng)天數(shù)）；

料重比=平均日采食量（g）/平均日增重（g）。

1.4.2 屠宰性能

于試驗結(jié)束42日齡時空腹稱活體重，每重復(fù)屠宰2只，公、母各半。分離胸肌、腿肌同時稱重，計算屠宰率、胸肌率、腿肌率。

1.4.3 免疫器官指數(shù)

試驗雞42日齡時空腹屠宰后解剖取出法氏囊、胸腺和脾臟，先用濾紙吸干組織表面血液，然后利用分析天平稱重，按公式計算各免疫器官與體重的相對重量：

免疫器官指數(shù)（g/kg）=免疫器官鮮重（g）/活體重（kg）。

1.4.4 血清溶菌酶和免疫球蛋白IgG

于21日齡和42日齡空腹采血分離血清，按試劑盒說明書操作。

1.4.5 統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)分析采用SPSS18.0軟件。

2 試驗結(jié)果

2.1 復(fù)合植物精油對肉仔雞生長性能的影響

2.1.1 復(fù)合植物精油對日增重的影響（見表3）

表3 植物精油對肉仔雞平均日增重的影響（g）

由表3可知，除1～21日齡試驗組Ⅲ日增重略低于對照組（P＞0.05）外，其他各階段試驗組日增重均高于對照組，并且22～42日齡階段和1～42日齡階段，試驗組Ⅰ、試驗組Ⅱ日增重相對對照組差異達(dá)到極顯著（P＜0.01）。隨著精油添加量的增加，日增重呈現(xiàn)明顯的上升趨勢，但達(dá)到添加量為160 mg/kg日糧之后呈下降的表現(xiàn)。相比對照組，22～42日齡階段，試驗組Ⅰ提高日增重12.13%，試驗組Ⅱ提高日增重20.97%，試驗組Ⅲ略提高；1～42日齡階段，試驗組Ⅰ提高日增重8.48%，試驗組Ⅱ提高15.57%，試驗組Ⅲ略提高。試驗結(jié)果說明80、160、240 mg/kg均有促生長的作用，160 mg/kg效果最好，其次為80 mg/kg。

2.1.2 復(fù)合植物精油對日采食量的影響（見表4）

表4 植物精油對肉仔雞平均日采食量的影響（g）

由表4可知，1～21日齡階段，試驗組Ⅲ采食量較對照組低，差異顯著（P＜0.05）。試驗組Ⅰ和試驗組Ⅱ分別略低或略高于對照組，差異不顯著（P＞0.05）；22～42日齡階段,試驗組Ⅱ采食量高于對照組,差異極顯著（P＜0.01），其他各試驗組仍維持1～21日齡階段隨精油添加量增加采食量增加的趨勢,但是均超過對照組,尚未達(dá)到差異顯著（P＞0.05）；全程來看，試驗組Ⅱ采食量高于對照組22.92%，差異極顯著（P＜0.01）,其他組略高于或約等于對照組，差異不顯著。從3個階段分析看，試驗組Ⅱ采食量最高，試驗組Ⅰ和試驗組Ⅲ次之，隨著精油添加量由80 mg/kg增加到160 mg/kg采食量有隨之增加的趨勢，達(dá)160 mg/kg時為最高點(diǎn)之后呈下降表現(xiàn)，整體看來，有增加采食量的作用。

2.1.3 植物精油對料重比的影響（見表5）

表5 植物精油對肉仔雞料重比的影響

由表5可知，除試驗組Ⅱ在22～42日齡和1～42日齡階段料重比高于對照組，其他試驗組試驗階段料重比均低于對照組。1～21日齡階段，試驗組料重比均低于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）；22～42 d階段，試驗組Ⅰ料重比低于對照組，差異極顯著（P＜0.01），試驗組Ⅱ高于對照組，差異極顯著（P＜0.01）。全程分析來看，試驗組Ⅰ低于對照組，達(dá)差異顯著（P＜0.05）,試驗組Ⅱ高于對照組，差異顯著（P＜0.05），試驗組Ⅲ略低于對照組，差異不顯著（P＞0.05）。從本數(shù)據(jù)可知，料重比隨著精油添加量增加有先增加又降低的表現(xiàn)，而且對肉雞的影響主要在后期（22～42日齡）。由表5得出，全程比較，試驗組Ⅰ料重比最為理想，試驗組Ⅱ最高。

2.2 復(fù)合植物精油對肉仔雞屠宰性能的影響（見表6）

表6 植物精油對肉仔雞屠宰性能的影響（%）

由表6可知，試驗組Ⅰ和試驗組Ⅱ胸肌率均高于對照組，且試驗組Ⅱ差異顯著（P＜0.05），試驗組Ⅲ略低于對照組，差異不顯著（P＞0.05）。相對于對照組，試驗組Ⅰ提高8.96%，試驗組Ⅱ提高10.34%，試驗組Ⅲ降低1.95%。該結(jié)果顯示，隨著精油添加量增加，胸肌率呈現(xiàn)先增加再降低的趨勢。

植物精油對于腿肌率的影響更為明顯，與對照組相比，試驗組Ⅰ和試驗組Ⅱ分別提高15.19%和29.71%，差異極顯著（P＜0.01），試驗組Ⅲ提高4.41%，差異不顯著（P＞0.05）。與胸肌率一樣，存在隨著精油添加量增加而增大的趨勢，但達(dá)到一定數(shù)值后開始下降。

2.3 復(fù)合植物精油對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響（見表7）

由表7可知，復(fù)合植物精油對肉仔雞脾臟指數(shù)的影響差異極顯著（P＜0.01），與對照組相比，分別提高了46.25%、96.25%和63.75%，呈現(xiàn)隨精油添加量增加先升高再降低的趨勢。然而在胸腺指數(shù)上沒有明顯變化的趨勢，說明該精油對胸腺指數(shù)沒有影響。法氏囊指數(shù)的變化也表現(xiàn)為隨精油添加量先升高再降低的趨勢，其中試驗組Ⅰ和試驗組Ⅱ分別比對照組提高了47.27%、39.09%，差異極顯著（P＜0.01），試驗組Ⅲ比對照組略高，差異不顯著（P＞0.05）。

表7 植物精油對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響（g/kg）

2.4 植物精油對肉仔雞血清免疫球蛋白IgG含量的影響（見表8）

表8 植物精油對肉仔雞血清IgG含量的影響（μg/ml）

由表8可知，各精油組添加日糧在21日齡和42日齡肉仔雞血清中IgG含量均高于對照組，且差異極顯著（P＜0.01），但各試驗組間差異不顯著。在21日齡精油組各試驗組中，尤以80 mg/kg飼料中精油劑量組血清IgG含量最高，且隨著精油添加量的增加血清中IgG呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢。在42日齡肉仔雞血清中的IgG含量也以試驗組Ⅰ含量最高，依然表現(xiàn)隨著精油添加劑量增加，而IgG逐漸降低的趨勢。相比對照組，試驗組Ⅰ21日齡血清IgG濃度提高68.23%，42日齡提高了69.04%。

2.5 植物精油對肉仔雞血清溶菌酶含量的影響（見表9）

表9 植物精油對肉仔雞血清溶菌酶含量的影響（U/ml）

由表9可知，精油試驗組肉仔雞21 d血清溶菌酶含量均高于對照組，且試驗組Ⅰ差異顯著。21日齡試驗組Ⅰ血清溶菌酶含量最高，42日齡試驗組Ⅱ血清溶菌酶最高，試驗組Ⅲ血清溶菌酶略低于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）。42日齡各試驗組與對照組相比較均差異不顯著（P＞0.05）。但均呈現(xiàn)隨精油添加量增加先增加又降低的趨勢。

3 討論

3.1 復(fù)合植物精油對肉仔雞生長性能的影響

植物精油對肉仔雞生長性能的影響在國內(nèi)外均有報道，韓新茹在肉仔雞日糧中分別添加100、150、200、250 mg/kg植物精油后對其進(jìn)行研究，結(jié)果表明100 mg/kg可以顯著提高平均日采食量（P＜0.05）；當(dāng)植物精油添加量為100、250 mg/kg時，肉仔雞日增重提高，差異顯著（P＜0.05）；而且植物精油組降低了料肉比，但尚未達(dá)到顯著差異。植物精油在肉仔雞生產(chǎn)性能的效果顯示正效應(yīng)的很多，添加水平變化也很大，最多和最少相比差10倍。不同的精油成分對肉仔雞生長性能的影響也是不同的，有研究表明，在為期四周的試驗中，分別在日糧中添加香芹酚和百里香酚（分別為精油中的兩種主要成分）200 mg/kg時，前者的體重和采食量均低于后者，但在料肉比上香芹酚則好于百里香酚（Lee等，2003b）。本試驗結(jié)果也表明，丁香酚、百里香酚和香芹酚復(fù)合而成的植物精油對提高肉仔雞生長性能有一定的效果，綜合日增重、采食量和料肉比，日糧中添加80 mg/kg最為適當(dāng)。

3.2 復(fù)合植物精油對肉仔雞屠宰性能的影響

胸肌率和腿肌率在屠宰利潤中占有重要地位，尤其腿肌，售價較高，所以，肉雞生產(chǎn)上非常關(guān)注二者的產(chǎn)量，尤其力圖提高腿肌的比率。在肉仔雞日糧中添加10%牛至油預(yù)混劑的試驗表明，當(dāng)添加量分別為75、100、125、150 mg/kg時，試驗組胸肌率和腿肌率提高，差異顯著（P＜0.05）（陳立華等，2007）。李敏瑩等（2015）報道，在復(fù)合植物精油對肉鴨生長性能與血清生化指標(biāo)的影響研究中發(fā)現(xiàn)，添加100 mg/kg植物精油組比對照組胸肌率顯著提高3.34%（P＜0.05），該試驗動物為10日齡三水白鴨，試驗期35 d。600只白鴨分為5組：對照組飼喂基礎(chǔ)日糧；抗生素對照組，基礎(chǔ)日糧中添加金霉素500 mg/kg；余下三組分別在基礎(chǔ)日糧中添加植物精油，添加量為100、150、200 mg/kg。最后得出結(jié)論復(fù)合植物精油具有促進(jìn)肉鴨生長與延長肉鴨抗氧化能力的作用，適宜添加量為100 mg/kg。該試驗所使用的復(fù)合植物精油為香芹酚、肉桂醛和百里香酚經(jīng)過抗菌篩選復(fù)配組成。Isabel等（2009）發(fā)現(xiàn)，丁香與肉桂精油能顯著提高胸肌率。本試驗也得到了相同的結(jié)論，在提高肉仔雞胸肌率和腿肌率方面有一定效果，根據(jù)計算（耗料量=a/胸（腿）肉率×料肉比，a為胸腿肉產(chǎn)量）得出，相同產(chǎn)胸肉和腿肉的耗料量比較，最經(jīng)濟(jì)添加量仍為80 mg/kg。

3.3 復(fù)合植物精油對肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響

胸腺、法氏囊和脾臟是禽類重要的免疫器官，胸腺和法氏囊屬于中樞免疫器官，分別是T、B淋巴細(xì)胞分化的場所，也是機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答的主要場所。脾臟是外周免疫器官，在體液免疫和細(xì)胞免疫中也發(fā)揮著重要的作用（楊漢春，2003）。

因此，免疫器官絕對重量和相對重量大小可以反映機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的機(jī)能強(qiáng)弱，胸腺、脾臟和法氏囊的指數(shù)也常常用來評價雞的免疫狀態(tài)，如指數(shù)升高，即認(rèn)為免疫增強(qiáng)（王自力等，2007）。百里香酚精油的主要成分是百里香酚，朱曉磊等（2013）為研究該精油對麻花雞生長性能及免疫器官指數(shù)的影響，選取384只麻花雞，分成對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；試驗組7個，在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上添加不同水平百里香精油，測定指標(biāo)為日增重、日采食量、料肉比和免疫器官指數(shù)，試驗期為42 d。研究發(fā)現(xiàn)，百里香精油顯著提高21 d和42 d體重，但對生長性能指標(biāo)的影響差異不顯著；麻花雞胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)顯著提高，但脾臟指數(shù)顯著降低，脾臟指數(shù)的降低與其他學(xué)者研究的結(jié)論不一致，有待于后續(xù)探討（朱曉磊等，2013）。姜維等（2014）在薰衣草精油的研究發(fā)現(xiàn)，其對41日齡肉仔雞的免疫器官指數(shù)影響差異不顯著。這說明不同的精油成分對動物的影響可能是完全不同的，本試驗的精油成分為百里香酚、香芹酚和丁香酚，試驗結(jié)果與百里香精油類似，對免疫器官指數(shù)有一定的影響，可以提高脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)，但對胸腺指數(shù)無影響，對各器官指數(shù)影響不同的原因可能與精油成分有關(guān)，該結(jié)果表明復(fù)合植物精油在提高肉雞免疫力方面有一定效果。

3.4 復(fù)合植物精油對肉仔雞免疫球蛋白的影響

免疫球蛋白是由動物免疫系統(tǒng)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，經(jīng)抗原的誘導(dǎo)，可以轉(zhuǎn)化為抗體（王中華等，2012）。血清IgG、IgA和IgM是參與體液免疫的主要抗體，在血清中的含量高低是動物體液免疫水平的體現(xiàn)（王世若等，2001）。IgG是機(jī)體內(nèi)含量最多的免疫球蛋白，血清中的IgG可以增強(qiáng)細(xì)胞吞噬作用的調(diào)理功能，還可以活化補(bǔ)體，抗感染能力因此提高，所以血清中IgG的含量可以作為機(jī)體抗病狀態(tài)高低的衡量指標(biāo)（劉建新等，2002），用來評價動物的免疫功能水平。本試驗結(jié)果也顯示，植物精油可以提高肉仔雞血清中IgG含量，且與對照組比差異極顯著（P＜0.01），說明植物精油在提高動物的體液免疫水平上具備一定的功效。

3.5 復(fù)合植物精油對肉仔雞溶菌酶的影響

溶菌酶是由單核-巨噬細(xì)胞分泌，是溶酶體酶的一種，作用于肽聚糖和細(xì)菌的細(xì)胞壁，是一種有效的抗菌劑（賈向志等，2002）。溶菌酶又稱為粘肽N-乙?；邗Ｋ饷浮谫|(zhì)酶或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶，分布于動植物組織、體液與分泌液中，具有抗菌消炎（葉丹等，2003）、抗病毒（劉梅等，2006）、增強(qiáng)免疫力（黃峰等，2008）的作用。因此，溶菌酶在人類和動物上也得到了廣泛應(yīng)用，用來治療疾病。根據(jù)溶菌酶的一級結(jié)構(gòu)、分子量和生物來源不同，可以分為噬菌體T4溶菌酶、微生物溶菌酶、植物溶菌酶和3種動物型溶菌酶（C型、G型、I型）。無脊椎動物只含有I型溶菌酶；脊椎動物中主要含有G型溶菌酶；唯一同時存在于原索動物（文昌魚）、無脊椎動物、脊椎動物的是溶菌酶C型，這個類型的溶菌酶研究得也最為廣泛和透徹。

溶菌酶通過分解細(xì)菌細(xì)胞壁中的肽聚糖導(dǎo)致菌體細(xì)胞壁溶解，從而實(shí)現(xiàn)殺菌的作用（張鵬等，2013）。因為溶菌酶具有溶解細(xì)菌細(xì)胞、迅速清理黏膜的能力，因此可以加快痊愈及抗感染，所以，血清中溶菌酶的含量增加，說明機(jī)體的免疫力增加。天然產(chǎn)物山豆根多糖添加一定劑量于小鼠的飼糧中，可以顯著提高小鼠血清中溶菌酶的含量，使機(jī)體抵抗細(xì)菌的能力增強(qiáng)，達(dá)到提高非特異性免疫的功能（帥學(xué)宏，2011）。周美玲等（2014）研究紫蘇精油對小鼠免疫血清指標(biāo)的影響，發(fā)現(xiàn)與對照組相比較，精油組血清中溶菌酶含量均顯著提高（P＜0.05）；白細(xì)胞介素-2（IL-2）生物活性顯著提高或極顯著增強(qiáng)（P＜0.05或P＜0.01）；各組IgM含量提高，但差異不顯著（P＞0.05）（周美玲）。這與本試驗結(jié)果一致，說明植物精油可以提高肉仔雞的血清殺菌能力，提高機(jī)體的免疫水平，可以在一定程度上抵抗微生物的侵襲。

4 結(jié)論

從試驗結(jié)果分析，本復(fù)合植物精油能夠提高肉仔雞生長性能，提高日增重和采食量、降低料重比，可以提高屠宰性能，對胸肌率和腿肌率有不同程度提高，提高胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)，增加血清中IgG和溶菌酶的含量，增強(qiáng)了肉仔雞的免疫力。綜合試驗結(jié)果，本復(fù)合植物精油在肉仔雞日糧中適宜添加量為80 mg/kg，可為肉仔雞應(yīng)用提供參考。