解郁開心丹對抑郁模型大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌的影響

周慶瑩，劉宏巖*

(長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117)

摘要：目的觀察解郁開心丹對抑郁模型大鼠血清皮質(zhì)醇、β-內(nèi)啡肽含量的影響。方法將80只SD雄性大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、陽性藥物對照組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組，每組10只；用慢性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)的方式造模。造模后給藥，陽性藥物對照組給予鹽酸氟西汀混懸液10 mg/d；中藥高、中、低劑量組分別給予解郁開心丹2.0，1.0，0.5 g/d (給藥體積為每100 g體質(zhì)量給予1.0 mL)，模型組給予等量生理鹽水，連續(xù)28 d。用放射免疫分析法檢測大鼠血清皮質(zhì)醇、β-內(nèi)啡肽的含量。結(jié)果與模型組比較，中藥高劑量組、中藥中劑量組大鼠的血清皮質(zhì)醇含量明顯減少，β-內(nèi)啡肽的含量明顯增加，P<0.05；中藥高劑量組、中藥中劑量組與陽性藥物對照組比較無明顯差異，P>0.05。結(jié)論解郁開心丹具有與西藥抗抑郁藥物氟西汀同樣的抗抑郁作用，且抗抑郁作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)大鼠的血清皮質(zhì)醇、β-內(nèi)啡肽的平衡有關(guān)。

關(guān)鍵詞：抑郁模型；解郁開心丹；血清皮質(zhì)醇；β-內(nèi)啡肽

DOI:10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.04.028

中圖分類號：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1003-5699(2015)04-0401-03

基金項(xiàng)目:吉林省科學(xué)技術(shù)廳、吉林省自然科學(xué)基金(201015118)。

作者簡介:周慶瑩(1985-)，女，碩士研究生，助教，主要從事中醫(yī)臨床基礎(chǔ)理論研究。

收稿日期:(責(zé)任編輯：趙玉芝2014-08-27)

收稿日期:(責(zé)任編輯：趙玉芝2014-12-24)

*通信作者:劉宏巖，電話-18686698557，電子信箱-hong.yancc@163.com

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Effect of Jie Yu Kai Xin Dan on neuroendocrine of model rats with depression

ZHOU Qingying,LIU Hongyan*

(Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the influence of Jie Yu Kai Xin Dan on depression model rats’ serum cortisol and the content of beta-endorphin.MethodsThe 80 male SD rats were randomly divided into normal group,model group,positive drug control group,Chinese medicine high dose group,Chinese medicine medium dose group,Chinese medicine low dose group,each group of 10 rats.Make mould with chronic stress combining with solitary keeps the way.After building,positive drug control group given fluoxetine hydrochloride mixed suspension 10 mg/d.Chinese medicine high,medium and low dose groups,respectively,to give Jie Yu Kai Xin Dan 2.0 g,1.0 g and 0.5 g/d (dosing volume per 100 g body quality give 1.0 mL),model group was given amount of normal saline,continuous 28 d.Radiation immunity analysis method is used to inspect the rat serum cortisol,the content of beta-endorphin.ResultsCompared with model group,high dose of Chinese Medicine group and medium dose group of rats serum cortisol content decreased significantly,the content of beta-endorphin increased significantly,P<0.05.Traditional Chinese medicine (TCM) in high dose group and medium dose group compared with positive drug control group has no significant difference,P>0.05.ConclusionJie Yu Kai Xin Dan has the same antidepressant effect with western medicine antidepressants fluoxetine,and the antidepressant mechanism may be related to regulating the rat serum cortisol and beta-endorphin of balance.

Keywords:depression model;Jie Yu Kai Xin Dan;serum cortisol;beta-endorphin

抑郁癥屬于復(fù)雜情感性精神障礙的一種臨床類型，其顯著而持久的情緒低落是抑郁癥主要的特征。發(fā)病過程中常伴有無愉快感、興趣喪失；疲乏感或精力減退；精神運(yùn)動性遲滯或激越；自責(zé)、自我評價過低、或有內(nèi)疚感；聯(lián)想困難或自覺思考能力下降；反復(fù)出現(xiàn)想死的念頭或有自殺、自傷行為；睡眠障礙；食欲降低或體質(zhì)量明顯減輕；性欲減退等癥狀[1]。近些年抑郁癥的發(fā)病率逐年升高，已經(jīng)成為當(dāng)今社會上嚴(yán)重危害人類身體健康、社會職業(yè)功能和生活質(zhì)量的重大精神生理心理疾病。 隨著中醫(yī)對抑郁癥研究的不斷增加，特別是中藥復(fù)方治療抑郁癥方面已經(jīng)取得了可喜的臨床療效。本文在“解郁開心丹對抑郁大鼠模型腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)影響”的基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究解郁開心丹對抑郁大鼠模型神經(jīng)內(nèi)分泌的影響，進(jìn)而探討解郁開心丹抗抑郁作用機(jī)制。

1實(shí)驗(yàn)材料

由長春中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)動物中心提供的清潔級健康成年雄性SD大鼠80只，體質(zhì)量(200±20) g，合格證號:SCXK(吉-2011-0004)。“解郁開心丹”由柴胡、桂枝、人參、龍骨、牡蠣、郁金、黃芩、大黃、夜交藤、制何首烏等組成(購于長春市中東市場醫(yī)藥超市)。按照灌胃劑量制成水煎劑濃縮至相應(yīng)濃度后，置4 ℃冰箱儲存?zhèn)溆?。鹽酸氟西汀每片20 mg,蘇州中化藥品工業(yè)有限公司，批號H20064844。按照灌胃劑量制成相應(yīng)濃度的混懸液后,置4 ℃冰箱儲存?zhèn)溆谩５馄べ|(zhì)醇放射免疫分析藥盒(購于天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司)，β-內(nèi)啡肽放射免疫分析藥盒(購于上海瑞齊生物科技有限公司)。臺式冷凍離心機(jī)(sigma Corp3k15)；電子顯微鏡(萊卡)；寶特ELX-808酶標(biāo)儀(ELX-808)；GHP-9270隔水式培養(yǎng)箱(上海莜翼儀器設(shè)備有限公司)；BS-1100型分析天平(天津斯維科科技有限公司生產(chǎn))。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1動物分組80只SD大鼠自由飲食，自然光線，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后。按照Open-Field評分方法：將得分≤20分和得分≥130分的大鼠剔除后，剩余的大鼠隨機(jī)分為6組。分別為：正常對照組、模型組、陽性藥物對照組、中藥高劑量組、中藥中劑量組和中藥低劑量組(每組10只)。

2.2模型制備具體造模方法采用慢性不可預(yù)見性溫和應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)法制備大鼠抑郁模型。從第8天起,正常組大鼠同籠飼養(yǎng)，自由飲食飲水，不給予任何刺激。其余各組大鼠單籠飼養(yǎng)，并開始接受21 d各種不同的應(yīng)激刺激。包括：1)禁水24 h；2)禁食24 h；3)4 ℃冰水游泳5 min；4)2 h行為限制；5)夾尾1 min；6)潮濕環(huán)境；7)晝夜顛倒。7種應(yīng)激刺激每天隨機(jī)安排1種，每種應(yīng)激刺激不連續(xù)出現(xiàn)。

2.3給藥情況除正常組外，其余各組大鼠在接受28 d應(yīng)激刺激后，開始灌胃給藥。給藥量如下：陽性藥物對照組給予鹽酸氟西汀混懸液10 mg/d；中藥高、中、低劑量組分別給予解郁開心丹2.0,1.0,0.5 g/d(給藥體積為每100 g體質(zhì)量給予1.0 mL)，模型組給予等量生理鹽水。

2.4血清皮質(zhì)醇及β-內(nèi)啡肽的測定給藥28 d后麻醉大鼠，腹主動脈取血，靜置0.5 h后，離心分離血清后置于-20 ℃冰箱內(nèi)備用。具體檢測方法如下：

表1　檢測方法

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

與正常組比較，模型組大鼠的血清皮質(zhì)醇含量明顯增加，β-內(nèi)啡肽含量明顯減少；與模型組比較，中藥高劑量組、中藥中劑量組大鼠的血清皮質(zhì)醇含量明顯減少，β-內(nèi)啡肽的含量明顯增加，P<0.05；中藥高劑量組、中藥中劑量組與陽性藥物對照組比較無明顯差異，P>0.05。見表2。

組 別皮質(zhì)醇/(μg/dL)β-內(nèi)啡肽/(pg/mL)空白組 36.63484±8.110446 362.6054±65.02026 模型組 46.43663±4.504350#248.9691±36.92187#陽性藥組40.27182±4.660892△349.7105±31.13860△高劑量組39.13687±2.331602△331.1741±62.80685△中劑量組38.07931±7.163919△320.6970±69.51599△低劑量組43.41871±3.550504 263.9594±55.72480

注：模型組與空白組比較，#P<0.05；與模型組相比較，△P<0.05

4討論

有研究認(rèn)為，抑郁癥患者血漿皮質(zhì)醇的分泌失去了正常自發(fā)性夜間負(fù)反饋機(jī)制，患者血漿皮質(zhì)醇濃度分泌增加[2]。研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者垂體和腎上腺體積增大，與正常人比較約增生38%,增生程度與皮質(zhì)醇的濃度相關(guān)，抑郁恢復(fù)皮質(zhì)醇濃度下降，似乎增生也會隨之恢復(fù)[3]。有實(shí)驗(yàn)證明抑郁癥患者皮質(zhì)醇水平顯著高于對照組,經(jīng)藥物治療后，其水平明顯降低，與對照組比較無顯著性差異[4]。

β-內(nèi)啡肽(β-endorphin,β-EP)是體內(nèi)主要的內(nèi)阿片肽之一，是1976年發(fā)現(xiàn)的最早的內(nèi)啡肽，其直接前體是由前阿黑皮素水解產(chǎn)生的β-趨脂素，主要集中于下丘腦—垂體軸中。β-內(nèi)啡肽作為主要的內(nèi)阿片樣物質(zhì)，參與欣快、報酬行為等情緒調(diào)節(jié)活動[5]。有研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者存在血漿β-內(nèi)啡肽及其他神經(jīng)內(nèi)分泌異常[6]，抑郁癥患者可能存在β-內(nèi)啡肽的缺乏或功能缺陷[7]。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，解郁開心丹可以明顯降低抑郁模型大鼠血清皮質(zhì)醇的含量、增加β-內(nèi)啡肽的含量，所以解郁開心丹對抑郁癥大鼠模型神經(jīng)內(nèi)分泌的異常起到了良性調(diào)節(jié)作用。由此推斷解郁開心丹的抗抑郁作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌有關(guān)。

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