芒黃顆粒對糖尿病腎病大鼠的保護作用

王建瑋1，盧晗瀅2，林賀1，律廣富1，張靖卓1，常志達1，林喆1*

(1.長春中醫(yī)藥大學，長春 130117；2.長春市婦產醫(yī)院，長春 130022)

摘要：目的探討芒黃顆粒(MHG)對Ⅱ型糖尿病腎病大鼠動物模型的保護作用。方法以腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)并長期高脂飲食制備大鼠糖尿病腎病模型。對大鼠血清空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、血脂、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、24 h尿微量蛋白的含量等進行測定。結果MHG可顯著降低造模大鼠空腹血糖、空腹胰島素含量以及胰島素抵抗指數(shù)，可顯著降低造模大鼠血清三酰甘油、膽固醇、高密度脂蛋白及游離脂肪酸含量，能夠顯著降低模型大鼠SCr、BUN及尿微量蛋白含量。結論芒黃顆粒對糖尿病腎病大鼠具有較好的保護作用

關鍵詞：芒黃顆粒；糖尿病腎?。谎?；胰島素

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2015.06.003

中圖分類號：R285.5文獻標志碼：A

文章編號：2095-6258(2015)06-1107-02

基金項目:吉林省中醫(yī)藥科技項目(2014-ZC24) 。

作者簡介:王建瑋(1991-) ，女，碩士研究生，主要從事中藥復方制劑分子藥理學及其應用研究。

收稿日期:(2015-06-10)

*通信作者:林喆,男,教授，博士研究生導師，電話-13252649565，電子信箱-linzhe1228@163.com

Mangiferin hydrastis granulein in rats with diabetes nephropathy mellitus

WANG Jianwei1, LU Hanying2, LIN He1, LYU Guangfu1, ZHANG Jingzhuo1, CHANG Zhida1, LIN Zhe1*

(1.Changchun University of Chinese Medicine, Changchun 130117, China;

2. Changchun Obstetrics-Gynecology Hospital, Changchun 130022, China)

Abstract:ObjectiveTo explore the protective effects of mangiferin hydrastis granulein in rats with diabetes nephropathy mellitus. MethodsBy intraperitoneal injection of STZ and long-term high fat diet preparation in the rat model of diabetic nephropathy. To test the fasting blood glucose (FBG), fasting insulin (FINS), blood lipid, creatinine (SCr), urea nitrogen (BUN) and 24 h urine micro protein content etc of rat serum. ResultsMHG can reduce the rats fasting glucose, fasting insulin levels and insulin resistance index significantly. It also can reduce the rats serum triglyceride, cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol and free fatty acid content conspicuously. In addition, MHG can decrease significantly to the model rats SCr, BUN, urinary trace protein content. ConclusionMangiferin hydrastis granulein can protect the diabetic nephropathy rats.

Keywords:Mangiferin hydrastis granulein; diabetic nephropathy; blood glucose; insulin

糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是伴隨著糖尿病及高血壓等疾病發(fā)生的，糖尿病病程10年以上者約有50%并發(fā)糖尿病腎病[1-2]。發(fā)病機制多由氧化應激、炎癥反應及纖維化等過程相互交聯(lián)引起，單從簡單的血壓、血糖控制很難對其進行根本上的治療[3-5]。芒黃顆粒是芒果苷和小檗堿制成的顆粒制劑，前期研究[6]發(fā)現(xiàn)其對GK糖尿病具有較好的治療作用，并可能通過促進三酰甘油(TG)的氧化水解，降低血糖，可用于糖尿病的治療，且阻止血脂紊亂引起的動脈硬化的形成。本研究主要考察芒黃顆粒對糖尿病腎病大鼠的治療作用，為其進一步的深入研究開發(fā)提供依據(jù)。

1材料

1.1藥物芒黃顆粒(MHG)，黃色粉末，由海南德澤藥物研究有限公司提供。二甲雙胍腸溶膠囊，0.25 g/粒，北京圣永制藥有限公司生產，批號：121004。1.2實驗動物SD雄性大鼠，體質量180~220 g，清潔級，由吉林大學動物中心提供，動物合格證編號：SCXK-(吉)2008-0005，飼養(yǎng)條件：室溫20~25 ℃，濕度45%~50%，自然晝夜節(jié)律，自由進食及飲用凈化水。1.3主要試劑鏈脲佐菌素，sigma產品。血糖(GLU)、血清三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、游離脂肪酸(FFA)試劑盒，Rat 胰島素INS ELISA Kit，96T，均由南京建成生物工程研究所生產。

2方法

2.1模型的制備將60只SD雄性大鼠隨機分出10只，設為正常對照組，給予正常飲食飲水；其余50只設為高脂飼料組，用于糖尿病腎病的造模，每日給予高脂飼料(由12%豬油，0.5%膽酸鹽，1%膽固醇，5%蔗糖，81.5%基礎營養(yǎng)飼料配制而成)。于4周末給予大鼠腹腔注射30 mg/kg鏈脲佐菌素(STZ)，72 h后尾靜脈采血測血糖，大于16.7 mmol/L為糖尿病模型造模成功[7]。造模大鼠繼續(xù)給以高脂飼料，于12周末檢測大鼠24 h尿微量蛋白量持續(xù)增高，確定糖尿病腎病模型成功。2.2分組與給藥將造模完成的50只大鼠按體質量隨機分為5組，每組10只，即模型對照組，陽性對照組，芒黃顆粒高、中、低劑量組。陽性對照組每日灌胃二甲雙胍，給藥濃度125 mg/kg；芒黃顆粒高、中、低劑量組每日分別灌胃芒黃顆粒粉末480、240、120 mg/kg；空白對照組、模型對照組每日灌胃相同體積蒸餾水。連續(xù)給藥10周。2.3指標檢測末次給藥前所有大鼠禁食不禁水10 h，給藥2 h后稱量體質量，各組大鼠腹腔注射3%水合氯醛1 mL/100 g麻醉，腹主動脈取血，4 500 r/min，離心15 min，分離血清。采用生化法測定大鼠血清空腹FBG、TG、TC、HDLC、LDLC、FFA、SCr、BUN，采用ELISA法測定大鼠空腹胰島素(FINS)、24 h尿微量蛋白含量。2.4數(shù)據(jù)處理所有實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(±s)表示，采用t檢驗進行統(tǒng)計學處理，P<0.05為有統(tǒng)計學意義。

3結果

3.1芒黃顆粒對體質量及腎臟指數(shù)的影響見表1。

表1　芒黃顆粒對體質量及腎臟指數(shù)的影響( ± s, n=10)

表1　芒黃顆粒對體質量及腎臟指數(shù)的影響( ± s, n=10)

組 別劑量/(mg/kg)體質量/g腎臟指數(shù)/(mg/g)正常對照組 —486±52.9 5.78±0.60 模型對照組 —345±65.4##8.59±1.50##陽性對照組 125404±57.9△ 7.31±1.45△ 芒黃顆粒高劑量組480421±62.7△△7.07±1.24△ 芒黃顆粒中劑量組240406±66.9△ 7.42±1.31△ 芒黃顆粒低劑量組120387±53.7 7.69±1.52

注：與正常對照組比較，##P<0.01；與模型對照組比較，△P<0.05，△△P<0.01

3.2對空腹血糖、空腹胰島素的影響見表2。

表2　芒黃顆粒對空腹血糖、空腹胰島素的影響( ± s, n=10)

表2　芒黃顆粒對空腹血糖、空腹胰島素的影響( ± s, n=10)

組 別劑量/(mg/kg)FBG/mmol/LFINS/mU/L正常對照組 —3.21±1.20 28.6±4.01 模型對照組 —6.07±2.06##33.5±3.12##陽性對照組 1254.11±1.46△ 29.9±3.06△ 芒黃顆粒高劑量組4804.32±1.36△ 28.2±3.17△ 芒黃顆粒中劑量組2404.46±2.13 29.6±2.27△ 芒黃顆粒低劑量組1204.87±1.96 31.7±3.22

注：與正常對照組比較， ##P<0.01；與模型對照組比較，△P<0.05

3.3芒黃顆粒對大鼠血脂的影響結果表明，芒黃顆粒高、中、低劑量組可顯著降低造模大鼠血清TG、TC、HDLC、FFA含量(P<0.05,P<0.01)。

3.4芒黃顆粒對大鼠24 h尿微量蛋白、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的影響結果表明，芒黃顆粒高、中、低劑量組均能顯著降低模型大鼠SCr、BUN及尿微量蛋白含量(P<0.05,P<0.01)。

4小結

本實驗結果表明，給予芒黃顆粒可改善造模大鼠多尿，體毛干枯無光澤，精神萎靡，活動減少等癥狀；可顯著降低造模大鼠空腹血糖、空腹胰島素含量以及胰島素抵抗指數(shù)(P<0.05)；可顯著降低造模大鼠血清三酰甘油、膽固醇、高密度脂蛋白及游離脂肪酸含量(P<0.05);能夠顯著降低模型大鼠肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及尿微量蛋白含量(P<0.05)。關于其干預機制目前多限于氧化應激等方面[8-13]，而對其腎小管、腎間質等方面作用有待進一步完善。目前研究結果發(fā)現(xiàn)，芒黃顆粒(MHG)對糖尿病腎病(DN)具有一定的干預作用，但對于其機制仍有待于進一步研究。

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