李玉嬋，劉國(guó)良

廊坊市疾控中心，河北廊坊065000

廊坊市2013—2014年手足口病病毒核酸檢測(cè)結(jié)果分析

李玉嬋，劉國(guó)良

廊坊市疾控中心，河北廊坊065000

目的分析廊坊市2013—2014年手足口病病毒核酸型別及分布特征，為預(yù)防和控制手足口病提供科學(xué)依據(jù)。方法對(duì)該市各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)送檢的手足口病臨床診斷病例標(biāo)本，采用Real-time RT-PCR法進(jìn)行病毒核酸檢測(cè)并分型。結(jié)果2013年4月—2014年12月共收到咽拭子標(biāo)本462份，檢出陽(yáng)性標(biāo)本318份，總陽(yáng)性率68.83%，其中EV71型95份，占29.87%；CoxA16型108份，占33.96%。發(fā)病年齡主要集中在5歲以下兒童，占85.50%。結(jié)論2013年廊坊市手足口病的病原體以EV71型為主，2014年廊坊市手足口病的病原體以CoxA16型為主，5歲以下兒童是腸道病毒感染的高危人群。

手足口病;核酸；腸道病毒EV71型;腸道病毒CoxA16型

手足口?。╤and-foot-mouth disease,HFMD）是由腸道病毒引起的、一種兒童常見(jiàn)急性傳染病，多發(fā)生于5歲以下兒童，該病出現(xiàn)發(fā)熱和手、足和口腔等部位的發(fā)疹、潰瘍[1]，具有播散快、流行性強(qiáng)的特點(diǎn)。引起手足口病的腸道病毒有20多種（型），其中以腸道病毒71型（EV 71）和柯薩奇病毒A16型（Cox A16）最為常見(jiàn)。近幾年全世界已有多個(gè)國(guó)家和地區(qū)報(bào)告了手足口病的流行[2-3]，引起手足口病的腸道病毒有20多種（型），其中以EV71型和CoxA16型感染最常見(jiàn)。該研究對(duì)2013—2014年廊坊市手足口病臨床診斷病例進(jìn)行核酸檢測(cè)分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2013年4月—2014年12月廊坊市各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床診斷手足口病病例。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

手足口病的診斷依據(jù)參照原衛(wèi)生部《手足口病診療指南》（2012年版）。

1.3 標(biāo)本采集

用病毒采樣管采集手足口病例咽拭子標(biāo)本，置-70℃保存，并于48 h內(nèi)冷藏送達(dá)微生物實(shí)驗(yàn)室。采樣管由友康基業(yè)生物科技（北京）有限公司生產(chǎn)。

1.4 提取病毒RNA

采用Ambion公司的MagMAXTM—96Viral RNA Isolation kit配套于ThermoFisher Scientific KingFisherFlex全自動(dòng)磁珠提取系統(tǒng)，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)和儀器操作規(guī)程來(lái)提取病毒RNA。

1.5 PCR擴(kuò)增

儀器：美國(guó)ABI7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀。核酸檢測(cè)試劑盒（PCR熒光法）：由上海之江生物科技有限公司和江蘇碩世生物科技有限公司生產(chǎn)，反應(yīng)體系按照試劑和說(shuō)明書(shū)配制。

1.6 結(jié)果判斷

按照試劑說(shuō)明書(shū)判斷。

2 結(jié)果

2.1 核酸檢測(cè)結(jié)果

2013—2014年共收到手足口病標(biāo)本462份，陽(yáng)性318份，陽(yáng)性率68.83%。其中，EV71型95份，占陽(yáng)性標(biāo)本的29.87%,CoxA16型108份，占陽(yáng)性標(biāo)本的33.96%。不同年份手足口病核酸檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.42，P＞0.05），但不同年份手足口病流行核酸型別不同（χ2=020.37，P＜0.01），即2013年以EV71型流行為主，2014年以CoxA16型流行為主。（表1）。

2.2 季節(jié)分布

2013—2014年廊坊市手足口病核酸陽(yáng)性數(shù)均自4月份開(kāi)始上升，6月達(dá)到高峰，7月開(kāi)始下降，主要集中在5～8月，符合手足口病的流行特征（圖1）。

表1 2013—2014年廊坊市手足口病核酸檢測(cè)結(jié)果

圖1 2013—2014年廊坊市手足口病時(shí)間分布

2.3 地區(qū)分布

全市10個(gè)縣（市、區(qū)）每年檢測(cè)均有陽(yáng)性病例，2013年全市以EV71型優(yōu)勢(shì)流行，主要分布在三河市、香河縣和安次區(qū)，2014年全市以CoxA16型優(yōu)勢(shì)流行，主要分布在大廠縣、三河市、霸州市和香河縣（圖2）。

圖2 2013—2014年廊坊市手足口病陽(yáng)性病例地區(qū)分布圖

2.4 人群特征

2013年和2014年廊坊市手足口病陽(yáng)性病例中，男性112例，女性91例，性別比1.23:1。不同性別兒童EV71型和CoxA16型陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.90，P＞0.05）。發(fā)病年齡以0歲?5歲兒童為主，占85.50%。年齡最小者僅2月，最大者16歲。職業(yè)分布以散居兒童和幼托兒童為主，占總?cè)藬?shù)96.54%（表2）。

3 討論

手足口病是由多種腸道病毒引起的全球性傳染病，最早于1957年在新西蘭流行[4]，世界大部分地區(qū)都有此病流行的報(bào)道。近年來(lái)，由EV 71引起的手足口病和神經(jīng)系統(tǒng)嚴(yán)重并發(fā)癥日益受到人們密切關(guān)注[5]，嚴(yán)重患者并發(fā)神經(jīng)性肺水腫或腦干腦炎[6]，迅速出現(xiàn)死亡，因此我們應(yīng)警惕上述嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生，2008年5月2日原衛(wèi)生部將HFMD納入法定丙類傳染病管理。

2013年和2014年共檢測(cè)手足口病臨床診斷病例462份，確診率為68.83%，EV71型和CoxA16型分別占29.87%和33.96%，所以這兩年引起廊坊市手足口病的主要病原體是EV71型和CoxA16型。

表2 2013年—2014年廊坊市手足口病的社會(huì)人口學(xué)特征

手足口病有明顯的季節(jié)性，春末夏初季流行，6月能達(dá)到高峰；主要以5歲以下兒童為主，占85.50%；散居兒童病例多，占71.86%；男性多于女性，比例為1.23:1，可能與男孩好動(dòng)，接觸頻繁，接觸傳染機(jī)會(huì)大有關(guān)。

2013年全市以EV71型優(yōu)勢(shì)流行，2014年全市以CoxA16型優(yōu)勢(shì)流行型，29.87%的以EV71感染為主,33.96%以CoxA16感染為主，有型別交替感染的現(xiàn)象。全市各縣（市、區(qū)）均能檢出陽(yáng)性病例，但是各型腸道病毒陽(yáng)性檢出率有差異，可能與標(biāo)本來(lái)源、標(biāo)本質(zhì)量有一定關(guān)心，而且標(biāo)本種類單一，今后應(yīng)采集所有種類標(biāo)本。

EV71型腸道病毒除了引起手足口病外，部分嬰兒感染后容易出現(xiàn)嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，如無(wú)菌性腦炎、腦膜腦炎和腦干腦炎等，少數(shù)發(fā)展為肺水腫/肺出血。雖然實(shí)驗(yàn)室未收到手足口病重癥病例，但是我們必須對(duì)有類似癥狀的標(biāo)本及時(shí)監(jiān)測(cè)，降低重癥病例的發(fā)病。

5歲以下兒童為重點(diǎn)防治人群，他們抵抗力差，環(huán)境衛(wèi)生意識(shí)不強(qiáng)，我們要加強(qiáng)宣傳教育，做好疫情監(jiān)測(cè)和疫情報(bào)告工作，同時(shí)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢測(cè)，更好控制疫情蔓延，為手足口病患兒爭(zhēng)取最佳治療時(shí)間。

[1]耿貫一.流行病學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1996.

[2]李靜，周紅瀛，杜寶靜，等.邯鄲地區(qū)2009—2011年重型手足口病的臨床特征和流行病學(xué)分析[J].醫(yī)學(xué)動(dòng)物防制，2012，4（28）：411-412.

[3]周紅娟,嚴(yán)飛.張家港市2010—2013年兒童手足口病病原學(xué)監(jiān)測(cè)及流行特征分析[J].醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐，2014(21)：2904-2905.

[4]蔡穎,梁潤(rùn)梅,劉志鵬,等.2009—2013年成都市青白江區(qū)手足口病疫情分析[J].職業(yè)衛(wèi)生與病傷，2015(1)：37-40.

[5]李昆宏,董菊花,刀保清,等.2009—2013年云南省德宏州手足口病流行病學(xué)分析[J].衛(wèi)生軟科學(xué)，2015(2)：112-114.

Analysis on Hand-foot-mouth Disease Virus Nucleic Acid Detection Results in 2013-2014 in Langfang

LI Yu-chan，LIU Guo-liang
The Center for Disease Control and Prevention of Langfang City，Hebei Prvince，065000 China

ObjectiveTo analyse the type and distribution characteristics ofhand-foot-mouth disease virus nucleic acid in Langfang city in 2013-2014,and provide scientific basis for the prevention and control of hand foot and mouth disease.MethodsFor all levels of medical institutions in this Municipality for the clinical diagnosis ofcases of hand foot mouth disease specimens, using the Real-time RT-PCR method for virus nucleic acid detection and classification.Results318 specimens were tested positive for enterovirus from 462 specimens from 2013 April to 2014 December,the total positive rate was 68.83%,In all cases,95 samples were EV71 type(29.87%)and 108 samples were CoxA16 type 33.96%.ConclusionThe major pathogens for HFMD in Langfnag were EV71 in 2013 and CoxA16 in 2014.Children under 5 years old are the high-risk population of enterovirus infection.

Hand-foot-mouth disease(HFMD);Nucleic;EV71;CoxA16

R51

A

1672-5654（2015）03（c）-0018-02

2015-01-15）

李玉嬋（1979-），女，河北廊坊文安縣人，本科，廊坊市疾控中心主管檢驗(yàn)師，主要負(fù)責(zé)微生物檢驗(yàn)及病毒檢測(cè)工作。

劉國(guó)良（1982-），河北廊坊文安縣人，本科，廊坊市疾控中心檢驗(yàn)師，主要負(fù)責(zé)微生物檢驗(yàn)及病毒檢測(cè)工作。