王剛正，陳 媛，邊銀丙

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)應(yīng)用真菌研究所，湖北 武漢 430070）

〈病蟲害防治〉

植物提取液對4種食用菌子實體病原物的抑制作用*

王剛正，陳 媛，邊銀丙**

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)應(yīng)用真菌研究所，湖北 武漢 430070）

將30種市售產(chǎn)品或采集的植物樣品進行提取，把植物提取液加入培養(yǎng)基進行抑菌效果實驗。對4種病原菌菌絲生長的測定結(jié)果表明，在30種供試植物中，大蒜（Allium sativum）提取液對粉紅聚端孢霉（Trichothecium roseum）的抑制率達99.1%；蒲公英（Taraxacum mongolicum）提取液對有害疣孢霉（Mycogone perniciosa）抑制率達96.3%；石榴皮（Punica granatum）和龍葵（Solanum nigrum）提取液對蠟蚧輪枝菌（Lecanicillium fungicola）抑制率分別為85.2%和83.5%。但所有植物提取液對真菌輪枝霉（Verticillium fungicola）均無明顯的抑制作用（＜40.3%）。

植物提取液；食用菌；子實體病害；抑菌作用

許多食用菌子實體病害經(jīng)常造成重大的經(jīng)濟損失[1-4]。食用菌子實體生長期短，對化學(xué)藥劑較敏感，且使用化學(xué)農(nóng)藥極易帶來農(nóng)藥殘留和藥害。為此，國內(nèi)外學(xué)者開始探索采用高效安全的植物源農(nóng)藥防治食用菌病害：Sokovic等[5]發(fā)現(xiàn)牛至（Origanum vulgare） 精油對雙孢蘑菇有害疣孢霉（Mycogonepeiniciosa）和輪枝霉菌（Verticillium fungicola）等具有很好的抑制作用；Thierry R等[2，6]研究表明，百里香（Thymus mongolicus） 精油對有害疣孢霉菌絲生長具有很好的抑制作用。為進一步篩選植物提取液用于食用菌的病害防治，本研究選取30種植物提取液，研究它們對雙孢菇的疣孢霉?。∕ycogone peini－ciosa）、雙孢菇干泡病的真菌輪枝霉（Verticillium fungicola）、雞腿菇的黑頭病（Lecanicillium lecanii）、雞腿菇菌柄潰瘍病的粉紅聚端孢霉（Trichothecium roseum）等子實體病害病原菌菌絲生長的抑制作用。

1 材料與方法

1.1植物樣品與病原菌菌株來源

30種植物材料均為市售產(chǎn)品或作者采集（表1）。4種引起食用菌子實體病害的病原物包括有害疣

M.perniciosa

Lecanicillium lecanii

V.fungicola

T.roseum

Solanum nigrum

Allium sativum

Allium cepa

Oxalis rubra

Solanum nigrum

表1 供試植物材料及其提取液制備方法Tab.1 Plant materials and methonds preparing extracts in this study

1.2植物提取液的制備方法

將商陸和曼陀羅干燥后的材料稱重，加入蒸餾水煮沸，收集上層水煮液；重新加水煮沸，重復(fù)3次，合并3次收集的水煮液，將水煮液濃縮至100 mL，制成濃度為1 g·mL-1的水煮液，作為母液備用。將大蒜、龍葵果、洋蔥和紅花醡漿草以1∶10的比例與蒸餾水混合榨汁，作為母液。其他植物材料參考Shan B[7]和Ghassan Al-Samarrai[8]的方法提取植物活性成分，供試植物樣品烘干，并用粉碎機粉碎，過篩，然后與50%乙醇或丙酮或無菌水混勻，水浴，超聲波處理1 h，更換浸提液，重復(fù)3次，合并3次收集的浸提液，3 000 r·min-1離心10 min；除去廢渣，收集上清液[7-8]。采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進行減壓濃縮，將上清液濃縮至20 mL，制成濃度為500mg·mL-1的浸提液，作為母液備用。母液4℃保存。

1.3植物提取液室內(nèi)抑菌效果的測定

采用3種方式，分別將植物提取液與培養(yǎng)基混勻（表1）。采用細菌過濾器（0.22 μm）將提取液過濾，然后與培養(yǎng)基按1∶10混勻；提取液與培養(yǎng)基按1∶10混合，121℃，滅菌30 min；提取液121℃滅菌30 min后，再按1∶10與培養(yǎng)基混勻。每個平皿中加入20 mL混勻培養(yǎng)基，接種6 mm菌絲塊，25℃培養(yǎng)，3 d～10 d后測量病原菌菌落生長速度。以加入50%酒精或無菌水到培養(yǎng)基中作為對照。每個處理重復(fù)5次。計算不同植物提取液對病原菌的抑制率。所有數(shù)據(jù)通過Spss17.0分析軟件中的新復(fù)極差法（Duncan’s Multiple Range）進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1植物提取液對有害疣孢霉菌絲生長的抑制作用

植物提取液對有害疣孢霉菌絲生長的抑制作用見表2。

表2結(jié)果表明，蒲公英提取液對有害疣孢霉（M.perniciosa） 菌絲抑制率達到96.3%，龍葵、花椒、茶、商陸、銀杏、石榴皮等植物提取液的抑制作用分別為89.4%、88.7%、84.8%、75.8%、74.8%和70.2%。蒲公英、龍葵、花椒、茶等4種植物提取物抑制率之間沒有達到顯著差異水平。其他植物提取液對有害疣孢霉抑制率均低于60%。

2.2植物提取液對蠟蚧輪枝菌菌絲生長的抑制作用

植物提取液對蠟蚧輪枝菌菌絲生長的抑制作用見表3。

由表3可見，石榴皮和龍葵提取液對蠟蚧輪枝菌（L.lecanii）抑制作用最好，抑制率分別為85.2%和83.5%，與其他植物提取物抑制率存在顯著差異。大蒜、銀杏、茶等植物提取液對蠟蚧輪枝菌菌絲生長抑制率分別為64.1%、63.6%和61.6%，其他幾種植物提取液抑制率均低于60%，抑制效果則不明顯。

2.3植物提取液對粉紅聚端孢霉菌絲生長的抑制作用

植物提取液對粉紅聚端孢菌絲生長的抑制作用見表4。

表2 植物提取液對有害疣孢霉菌絲生長的抑制作用Tab.2 Inhibition effect of plant extracts on Mycogone perniciosa

表3 植物提取液對蠟蚧輪枝菌菌絲生長的抑制作用Tab.3 Inhibition effect of plant extracts on Lecanicillium lecanii

表4 植物提取液對粉紅聚端孢菌絲生長的抑制作用Tab.4 Inhibition effect of plant extracts on Trichothecium roseum

由表4可見，大蒜提取液對粉紅聚端孢霉（T. roseum）菌絲的抑制作用最強，抑制率達到99.1%，與其他植物提取物抑制率存在顯著差異。朝天椒、銀杏抑制作用稍弱，抑制率分別為86.9%和83.4%，但與石榴皮、龍葵和茶葉等植物提取液抑制率亦達到顯著差異水平。其他24種植物提取液抑制率均低于74.3%。

2.4植物提取液對真菌輪枝霉菌絲生長的抑制作用

供試的30種植物提取液對真菌輪枝霉（V. fungicola）菌絲生長均無明顯的抑制作用。抑制作用最大的是大蒜提取液，雖然與其它植物提取液抑制率存在顯著差異，但其抑制率僅40.3%。龍葵、銀杏兩種植物提取液完全沒有抑制作用，其它27種植物提取液抑制率介于8.3%～29.5%。

3 討論

每一種植物提取液中均含有特定的抑菌物質(zhì)。從本次試驗還觀察到一些植物提取液對一些病原菌菌絲生長有抑制作用，一些植物提取液對另一些病原菌菌絲生長又有促進作用。同一種植物提取液對不同病原菌具有不同的抑菌效果，如銀杏對粉紅聚端孢霉（T.roseum）和蠟蚧輪枝菌（L.lecanii）具有一定的抑制作用，花椒對有害疣孢霉（M.perniciosa）有一定的抑制效果，但他們對其他病原菌抑制作用較弱。一些植物提取液對病原菌生長具有某種程度的促進作用，如烏蓮莓對矩孢木霉（T.oblongisporum）、橘皮對有害疣孢霉（M.perniciosa）、茵陳和車前對粉紅聚端孢霉（T.roseum） 等均觀察到有促進生長的作用。本研究采用供試植物提取液進行培養(yǎng)皿中的抑菌試驗，為進一步開展田間子實體病害防治試驗，探索高效安全環(huán)保的防治方法奠定了基礎(chǔ)。

[1]黃春燕，萬魯長，單洪濤.雞腿蘑黑斑病及其病原研究初報[J].食用菌學(xué)報，2008，15（1）：83-85.

[2]Potocnik I.,Vukojevic J.,Stajic M.,et al.Sensitivity of Mycogone perniciosa,pathogen of culinary-medicinal button mushroom Agaricus bisporus(J.Lge)Imbach(Agaricomycetideae), to selected fungicides and essential oils[J].International Journal of Medicinal Mushrooms,2010,12(1):91-98

[3]Zare R,Gams W.A revision of the Verticillium fungicola species complex and its affinity with the genus Lecanicillium [J].Mycological Research,2008,112(7):811-824.

[4]Dong WH,Bian YB.Stipe canker caused by Trichothecium roseum on the edible shaggy mane Coprinus comatus in China [J].Plant Disease,2013,97(11):1507-1507.

[5]Sokovi M,van Griensven LJLD.Antimicrobial activity of essential oils and their components against the three major pathogens of the cultivated button mushroom,Agaricus bisporus[J].European Journal of Plant Pathology,2006,116(3): 211-224.

[6]Thierry R,Sandra C,Kimberly P.,et al.Application regime for disease control using thyme oil[C]//Proceedings of the 18th congress of the iInternational society for mushroom science. Beijing:Institute of Agricultural Resources and Regional Planning of AAS,2012:338-342.

[7]Shan Bin,Cai YZ,Sun M,et al.Antioxidant capacity of 26 spice extracts and characterization of their phenolic constituents[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2005, 53(20):7749-7759.

[8]Al-Samarrai G,Singh H,Syarhabil M.Evaluating eco-friendly botanicals(natural plant extracts)as alternatives to synthetic fungicides[J].Annals of Agricultural and Environmental Medicine,2011,19(4):673-676.

《中國食用菌》聲明

近期，有部分網(wǎng)站盜用《中國食用菌》期刊的名義，發(fā)布《中國食用菌》期刊論文，索要審稿費或者推薦作者改投他刊，《中國食用菌》特提醒廣大作者和讀者，目前《中國食用菌》網(wǎng)站正在建設(shè)中，投稿仍為郵箱投稿，投稿郵箱為zgsyj2005@163.com，編輯部電話為0871-65151099，以避免上當(dāng)受騙。

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《中國食用菌》編輯部

2015年7月10日

Antimicrobial Effect of Plant Extracts Against Four Pathogens of Edible Mushroom Fruit Body

WANG Gang-zheng,CHEN Yuan,BIAN Yin-bing
(Institute of Applied Mycology,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China)

The extracts form thirty plants collected or brought in the market were added to the medium to screen their antimicrobial activity in four edible fungi fruiting body pathogen.The results measuring the radial length of four pathogen mycelia demonstrated that the inhibition rate of Allium sativum extract against Trichothecium roseum was 99.1%during thirty plant tested.The inhibition ratio of Taraxacum mongolicum extract on Mycogone perniciosa was 96.3%.The suppression ratio of Punica granatum and Solanum nigrum extracts against Lecanicillium fungicola was 85.2%and 83.5%respectively.However,the suppression effect of all plant extracts against Verticillium fungicola were＜40.3%.

plant extract;edible fungi;fruiting body disease;antimicrobial effect

S646.9

A

1003-8310（2015）04-0076-04

10.13629/j.cnki.53-1054.2015.04.018

國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系資助項目（CARS-24）。

王剛正（1988-），男，在讀博士研究生，主要研究方向為食用菌病害與分子生物學(xué)。E-mail:wgzhau@163.com

**通信作者：邊銀丙 (1963-)，男，博士，教授，主要從事食用菌遺傳育種與生物技術(shù)。E-mail:bianyb.123@163.com

2015-05-10