張恩輝

長(zhǎng)春市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林長(zhǎng)春130062

血小板功能實(shí)驗(yàn)分析前質(zhì)量控制分析

張恩輝

長(zhǎng)春市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林長(zhǎng)春130062

目的分析血小板功能的影響因素，為建立和完善血小板功能分析的質(zhì)量控制體系。方法2012年12月—2014年12月隨機(jī)選取300名志愿者靜脈血液,在不同血小板血漿量、血小板濃度、誘導(dǎo)劑濃度、血樣放置時(shí)間、抗凝劑種類實(shí)驗(yàn)條件下,采用血漿比濁法進(jìn)行血小板聚集率檢測(cè)。結(jié)果血小板濃度1.0×1011/L以下時(shí)對(duì)血小板凝聚具有明顯影響（P＜0.05）；血小板聚集率隨誘導(dǎo)劑濃度增高而增高,在AA為0.4 mmol/L時(shí),聚集率最低，在從0.7 mmol/L血小板聚集率最高，之后隨AA濃度增大到1.3 mmol/L時(shí)，聚集率由（72.9±13.4）降低到（66.7±15.6），有降低的趨勢(shì)；樣本常溫放置8 h后血小板聚集率降低明顯；枸櫞酸對(duì)血小板凝血作用最明顯。結(jié)論控制血小板功能試驗(yàn)前的各項(xiàng)影響指標(biāo)，放置時(shí)間，血液樣本的抗凝劑的選擇，誘導(dǎo)劑的選擇都需要嚴(yán)格注意，為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

血小板；凝血功能；質(zhì)量控制

血小板聚集是血小板的一個(gè)重要生理特性，是其參與止血和血栓形成過(guò)程的重要因素之一[1-3]。血小板功能檢測(cè)對(duì)于臨床相關(guān)疾病的診斷和抗血小板藥物的篩選及相關(guān)研究有著重要的意義[4-6]。2012年12月—2014年12月該院隨機(jī)選取300名健康的志愿者的新鮮血液進(jìn)行血小板功能檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2012年12月—2014年12月隨機(jī)選取300名健康的志愿者的新鮮血液，其中男性為140人，女性為160人。將血液標(biāo)注1-300，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌龠M(jìn)行分組，分別進(jìn)行不同的血液凝聚實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

（1）不同血小板血漿量對(duì)血液聚集的影響，實(shí)驗(yàn)血液樣本為300例，血液比濁法，取血液400 uL，加入枸櫞酸抗凝，分離出血小板血漿，貧血小板血漿，調(diào)血小板數(shù)目至2.5×1011/L后，分別取400 uL、600 uL置于凝聚杯中，分別加入相同誘導(dǎo)劑，分別測(cè)凝聚率。

（2）血小板血漿濃度對(duì)血液凝聚的影響計(jì)算血小板血漿數(shù)，用貧血小板血漿將富血小板血漿配置濃度為2.5× 1011/L、1.5×1011/L、1.0×1011/L/0.5×1011/L五組，加入誘導(dǎo)劑，測(cè)得凝聚率。

（3）誘導(dǎo)劑的濃度對(duì)血液聚集影響，血漿比濁法，分別取血液400 uL，分離出血小板血漿與貧血小板血漿。計(jì)算血小板血漿數(shù)，調(diào)血小板數(shù)目至2.5×1011/L后，加入不同濃度的誘導(dǎo)劑花生四烯酸，0.4 mmol/L、0.5 mmol/L、0.7 mmol/L、1.1 mmol/L、1.3 mmol/L，測(cè)凝聚率。

（4）放置時(shí)間：分別取400 uL置于6個(gè)聚集杯中，放置2 h,4 h 6 h，10 h,24 h，后測(cè)凝聚率。

（5）不同抗凝劑對(duì)于血小板血漿凝聚影響，分別加入枸櫞酸，乙二胺四乙酸和肝素，置于凝聚杯中，測(cè)得凝聚率。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析,計(jì)量資料采用形式表示，t檢驗(yàn)、方差分析等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，計(jì)算P值，若有P＜0.05，說(shuō)明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同血小板血漿量量對(duì)血液聚集的影響

血小板血漿量分別為400 uL、600 uL對(duì)血小板聚集的影響，配對(duì)t檢驗(yàn)400 uL、600 uL組值之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表1 不同血小板血漿量量對(duì)血液聚集的影響

表1 不同血小板血漿量量對(duì)血液聚集的影響

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2.2 血小板血漿濃度對(duì)血液凝聚的影響

與富血小板血漿配置濃度為2.5×1011/L進(jìn)行對(duì)比，富血小板血漿配置濃度為1.0×1011/L、0.5×1011/L時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與1.5×1011/L比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 血小板血漿濃度對(duì)血液凝聚的影響

表2 血小板血漿濃度對(duì)血液凝聚的影響

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2.3 誘導(dǎo)劑的濃度對(duì)血液聚集影響

隨AA濃度增高,聚集率降低,0.7 mmmol/L組值只與0.4 mmol/L組t值=-3.3差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表3 不同濃度誘導(dǎo)劑對(duì)血小板聚集的影響

表3 不同濃度誘導(dǎo)劑對(duì)血小板聚集的影響

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3 討論

通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們可以看出，血小板血漿量分別為400 uL、600 uL對(duì)血小板聚集無(wú)明顯影響，血小板血漿配置濃度為2.5×1011/L進(jìn)行對(duì)比，配置濃度為1.0*1011/L、0.5×1011/L差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，1.5×1011/L差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，誘導(dǎo)劑濃度為0.4 mmol/L時(shí),聚集率最低，0.7 mmol/L血小板聚集率最高，AA濃度增高,聚集率降低,0.7 mmmol/L組與0.4 mmol/L組值差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在AA 1.0 mmol/L濃度時(shí),8 h后血小板聚集率降低明顯,時(shí)間2 h組與4 h、6 h、組之間AA聚集率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，AA為0.5 mmol/L濃度時(shí),2 h組同6 h、8 h組值之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05），說(shuō)明濃度較低時(shí)放置時(shí)間對(duì)于血小板凝聚具有顯著作用。同李祖蘭等[7-8]的研究方法一致。

血小板的凝聚實(shí)驗(yàn)是一個(gè)非常嚴(yán)謹(jǐn)?shù)募夹g(shù)，為了得到更加精確，準(zhǔn)確的診斷結(jié)果，就需要對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程更加精細(xì)，所以對(duì)于血小板檢測(cè)就需要更加敏感和特異在進(jìn)行血小板功能實(shí)驗(yàn)分析前應(yīng)當(dāng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的條件即樣本放置時(shí)間，抗凝劑，誘導(dǎo)劑種類等各方面做到均一化，為保證得到準(zhǔn)確、可靠，經(jīng)濟(jì)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提供根據(jù)。

[1]邵永生.組合檢驗(yàn)法在EDTA依賴性假性血小板減少癥中的應(yīng)用[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,33(16)：2036.

[2]周倩.1種血細(xì)胞分離機(jī)預(yù)測(cè)采集后血小板計(jì)數(shù)的評(píng)估[J].中國(guó)輸血雜志,2012,25(10)：957.

[3]尹小明.SD大鼠血小板聚集實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法的研究[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版,2013,53(8)：6.

[4]王志杰.血小板功能與抗體檢查[J].中外健康文摘，2012,9 (24)：102.

[5]張永紅.血小板功能檢測(cè)進(jìn)展及臨床應(yīng)用[J].臨床合理用藥雜志，2012,5(23)：216.

[6]萬(wàn)鵬,童華生,張興欽,等.新型凝血和血小板功能分析儀在彌散性血管內(nèi)凝血早期診斷中的價(jià)值[J].中國(guó)急救醫(yī)學(xué)，2014,34(9)：96.

[7]李祖蘭.血小板聚集實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)劑儲(chǔ)存條件及配制[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2012(4)：241-243.

[8]ThachilJ,TohCH.Currentconcepts in the management of disseminated intravascular coagulation[J].Thrombosis research, 2012(1)：54-59.

Experimental Analysis of Platelet Function Analysis of Quality Control

ZHANG En-hui
Changchun second hospital laboratory,Changchun,Jilin Province,130062 China

ObjectiveA Factor Analysis of platelet aggregation,for the establishment and improvement of platelet function analysis of the quality control system.Methods300 volunteers venous blood,platelet-rich plasma at different volume, platelet concentration,inducer concentration,blood storage time,type and experimental conditions anticoagulants plasma, plasma assay was performed using platelet aggregation testing.ResultsPlatelet concentration 1.0*1011/L or less obvious effect on platelet aggregation（P＜0.05）；induced platelet aggregation with increased and increased concentration in AA0.4mmol/L,the aggregation rate lowest in from 0.7mmol/L platelet aggregation highest rate further increased with the AA concentration,platelet aggregation rate decreased;sample placed at room temperature for 8h platelet aggregation rate decreased significantly;the most obvious citrate platelet clotting effect.ConclusionControl of platelet function tests before impact indicators,the accuracy of the experimental results has a crucial role.

Platelets;Coagulation;Quality control

R4

A

1674-0742（2015）11（a）-0189-02

2015-08-09）

張恩輝（1972-）,女，吉林長(zhǎng)春人，本科，主管檢驗(yàn)師，研究方向：臨床檢驗(yàn)。