郭 華，劉吉開

(1.鞍山師范學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，遼寧 鞍山114007;2.中國科學(xué)院昆明植物研究所植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室，云南昆明650201)

輻裂銹革菌(Hymenochaete tabacina)為擔(dān)子菌綱多孔菌目革菌科高等真菌，擔(dān)子果一年生，無嗅無味，不可食用.該菌通常覆瓦狀疊生，有時達(dá)數(shù)百個菌蓋聚生，菌蓋半圓形、扇形、貝殼形至不規(guī)則形，單個菌蓋突起可達(dá)1.5 cm，寬可達(dá)3 cm，表面呈褐色、銹褐色、黑褐色，為我國最常見的木材腐朽菌之一，主要分布于山西、吉林、黑龍江、河南、湖北、云南、西藏、陜西、甘肅、新疆等地，造成木材白色腐朽［1］，經(jīng)檢索，國內(nèi)外未見對其化學(xué)成分的研究報道.本課題組多年來一直致力于高等真菌化學(xué)成分的研究［2～6］，為進(jìn)一步從高等真菌中尋找具有生物活性的次生代謝產(chǎn)物，對該菌進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究.

1 實驗

1.1 材料、儀器與試劑

實驗材料于2009年9月采自吉林長白山，由中國科學(xué)院昆明植物研究所楊祝良研究員鑒定為輻裂銹革菌(Hymenochaete tabacina)，標(biāo)本存放于中國科學(xué)院昆明植物研究所標(biāo)本館.

熔點由X-4顯微熔點測定儀測定；1H-NMR和13C-NMR由Bruker AM-400和DRX 500測定，內(nèi)標(biāo)為TMS；ESI+-MS由VG AutoSpec-3000質(zhì)譜儀測定；分析型和制備型HPLC為Agilent 1100 HPLC，色譜柱為 Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)和 YMC(9.4 mm × 150 mm，5 μm)柱.

柱層析硅膠(80～100目和200～300目)和薄層層析材料均為青島海洋化工廠生產(chǎn)；Sephadex LH-20為Amersham Biosciences公司產(chǎn)品；RP-18(40～63 μm)為德國Merck公司產(chǎn)品；顯色方法為254 365 nm熒光，10%硫酸乙醇溶液和硫酸香草醛處理后加熱及碘蒸氣顯色；其它試劑為分析純和色譜純.

1.2 提取與分離

輻裂銹革菌子實體干重約500 g，用甲醇溶劑提取3次，提取液合并，減壓蒸干得到浸膏10 g.粗提物上硅膠柱色譜粗分，石油醚-丙酮(100∶0→0∶100)梯度洗脫給出組分A-F.組分C(石油醚-丙酮，30∶1)用石油醚-乙酸乙酯30∶1分離，后經(jīng)Sephadex LH-20(氯仿-甲醇，1∶1)柱層析，再用RP-18反相硅膠柱色譜，用甲醇-水(90%甲醇)系統(tǒng)洗脫，得到化合物7(5.0 mg)、8(6.0 mg).組分 D(石油醚-丙酮，10∶1)經(jīng)石油醚-丙酮15∶1分離，后用Sephadex LH-20(丙酮)柱層析，再經(jīng)制備型HPLC，用乙腈/水30∶70→50∶50梯度洗脫，純化得到化合物2(3.0 mg)、3(5.5 mg)、5(6.5 mg).組分 E(石油醚-丙酮，5∶1)經(jīng) Sephadex LH-20(氯仿-甲醇，1∶1)柱層析分離，再經(jīng)制備型HPLC，用乙腈/水(40∶60)梯度洗脫，純化得到化合物 1(3.0 mg)、4(5.5 mg)、6(4.0 mg).

2 結(jié)構(gòu)鑒定

2.1 化合物1

棕色油狀物；ESI-MS(pos.)：395［M+Na］+；分子式為 C23H32O4；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)：6.25(1H，s，H-6)，5.27(1H，t，J=7.0 Hz，H-2')，5.07(2H，m，H-6'and H-10')，3.42(2H，d，J=7.0 Hz，H-1')，2.52(3H，s，H-7)，1.89 ～2.05(8H，m，H-4'，H-5'，H-8'and H-9')，1.82(3H，s，H-15')，1.62(3H，s，H-12')，1.58(6H，s，H-13'and H-14')；13C-NMR(CDCl3，100 MHz)：174.2(s，COOH)，164.2(s，C-1)，160.0(s，C-3)，140.5(s，C-5)，134.5(s，C-3')，134.0(s，C-7')，130.7(s，C-11')，124.4(d，C-10')，124.2(d，C-6')，122.9(d，C-2')，112.8(s，C-2)，110.7(d，C-6)，103.9(s，C-4)，39.7(t，C-8')，39.6(t，C-4')，26.6(t，C-9')，26.4(t，C-5')，25.0(q，C-12')，23.5(q，C-7)，21.7(t，C-1')，16.9(q，C-13')，15.5(q，C-15')，15.3(q，C-14').

上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報道值一致，鑒定為grifolic acid.

2.2 化合物2

黃色糖漿物；分子式為 C10H10O3；1H-NMR(CD3COCD3，400 MHz)：7.40(1H，d，J=16.5 Hz，H-4)，7.10(1H，d，J=2.3 Hz，H-6')，6.97(1H，dd，J=8.0，2.3 Hz，H-4')，6.79(1H，d，J=8.0 Hz，H-3')，6.46(1H，d，J=16.5 Hz，H-3)，2.20(3H，s，H-1)；13C-NMR(CD3COCD3，100 MHz)：197.7(s，C-2)，148.8(s，C-5')，146.3(s，C-2')，144.2(d，C-4)，127.7(s，C-1')，125.2(d，C-3)，122.6(d，C-3')，116.4(d，C-4')，115.2(d，C-6')，27.2(q，C-1).

上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報道值一致，鑒定為4-(2'，5'-Dihydroxyphenyl)-(E)-3-buten-2-one.

2.3 化合物3

黃色粉末(甲醇)，m.p.125 ～126 °C；分子式為 C10H10O2；1H-NMR(CDCl3，500 MHz)：7.57(2H，d，J=8.4 Hz，H-2'and H-6')，7.53(1H，d，J=16.8 Hz，H-1)，6.82(2H，d，J=8.4 Hz，H-3'and H-5')，6.60(1H，d，J=16.2 Hz，H-2)，2.28(3H，s，H-4)；13C-NMR(CDCl3，125 MHz)：199.2(s，C-3)，158.4(s，C-4')，143.9(d，C-1)，130.5(d，C-2'and C-6')，127.0(s，C-1')，125.0(d，C-2)，116.2(d，C-3'and C-5')，27.6(q，C-4).

上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］報道值一致，鑒定為反式-1-(4'-羥基苯基)-丁-1-烯-3-酮.

2.4 化合物4

無色針晶(丙酮)，m.p.153 ～154 °C；分子式為 C7H6O3；1H-NMR(CD3OD，400 MHz)：9.71(1H，s，CHO)，7.30(1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，7.27(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6)，7.00(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)；13C-NMR(CDCl3，100 MHz)：191.3(d，CHO)，152.2(s，C-4)，146.0(s，C-3)，129.9(s，C-1)，125.4(d，C-6)，116.4(d，C-5)，115.4(d，C-2).

上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］報道值一致，鑒定為原兒茶醛.

2.5 化合物5

白色片晶(丙酮)，m.p.113 ～ 114 °C；分子式為 C7H6O2；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)：9.67(1H，s，CHO)，7.67(2H，d，J=8.4 Hz，H-2 and H-6)，6.83(2H，d，J=8.4 Hz，H-3 and H-5)；13C-NMR(CDCl3，100 MHz)：192.3(d，CHO)，164.2(s，C-4)，133.0(d，C-2 and C-6)，129.2(s，C-1)，116.4(d，C-3 and C-5).

上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］報道值一致，鑒定為對羥基苯甲醛.

2.6 化合物6

無色油狀物；分子式為 C18H32O2；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)：5.35(4H，m，H-9，H-10，H-12 and H-13)，2.75(2H，m，H-11)，2.34(2H，t，J=7.6 Hz，H-2)，2.04(4H，m，H-8 and H-14)，1.63(2H，m，H-3)，1.31(14H，m，H-4 to H-7 and H-15 to H-17)，0.87(3H，t，J=7.2 Hz，H-18).

上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］報道值一致，與亞油酸對照品共薄層，Rf值相同，鑒定為亞油酸.

2.7 化合物7

白色晶體(丙酮)，m.p.154 ～156 °C；分子式為 C28H44O；1H NMR(CDCl3，400 MHz)：5.54(1H，m，H-6)，5.40(1H，m，H-7)，5.16 ～5.28(2H，m，H-22 and H-23)，3.58(1H，m，H-3)，1.02(3H，d，J=6.7 Hz，H-21)，0.97(3H，s，H-19)，0.91(3H，d，J=6.8 Hz，H-28)，0.85(3H，d，J=6.8 Hz，H-27)，0.81(3H，d，J=6.8 Hz，H-26)，0.60(3H，s，H-18)；13C NMR(CDCl3，100 MHz)：141.5(s，C-8)，139.6(s，C-5)，135.8(d，C-22)，131.9(d，C-23)，120.2(d，C-6)，116.8(d，C-7)，71.0(d，C-3)，56.2(d，C-17)，54.8(d，C-14)，46.9(d，C-9)，43.2(s，C-13)，41.3(d，C-24)，41.1(t，C-4)，40.7(d，C-20)，39.6(t，C-12)，38.1(t，C-1)，37.4(s，C-10)，33.0(d，C-25)，32.3(t，C-2)，28.1(t，C-16)，23.2(t，C-15)，21.1(t，C-11)，20.9(q，C-21)，20.1(q，C-26)，19.7(q，C-27)，17.8(q，C-28)，16.5(q，C-19)，12.3(q，C-18).

上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］報道值一致，鑒定為麥角甾-5，7，22-三烯-3β-醇.

2.8 化合物8

無色針晶(丙酮)，m.p.177 ～178 °C；分子式為 C28H44O3；1H NMR(CDCl3，400 MHz)：6.49(1H，d，J=8.3 Hz，H-7)，6.25(1H，d，J=8.3 Hz，H-6)，5.23(1H，dd，J=15.4，7.6 Hz，H-22)，5.13(1H，dd，J=15.4，7.6 Hz，H-23)，3.98(1H，m，H-3)，0.98(3H，d，J=6.8 Hz，H-21)，0.91(3H，d，J=6.8 Hz，H-28)，0.89(3H，s，H-19)，0.84(3H，d，J=6.8 Hz，H-27)，0.83(3H，s，H-18)，0.81(3H，d，J=6.8 Hz，H-26)；13C NMR(CDCl3，100 MHz)：135.3(d，C-6)，135.1(d，C-22)，132.1(d，C-23)，131.0(d，C-7)，82.4(s，C-5)，79.6(s，C-8)，67.0(d，C-3)，56.5(d，C-17)，51.8(d，C-14)，51.2(d，C-9)，44.6(s，C-13)，42.7(d，C-24)，40.2(d，C-20)，39.5(t，C-12)，37.0(t，C-4)，36.8(s，C-10)，34.8(t，C-1)，33.1(d，C-25)，30.2(t，C-2)，28.8(t，C-15)，23.6(t，C-11)，20.9(q，C-21)，20.7(t，C-16)，20.0(q，C-27)，19.8(q，C-26)，18.3(q，C-19)，17.6(q，C-28)，12.9(q，C-18).

上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］報道值一致，鑒定為過氧麥角甾醇.

3 結(jié)論

從輻裂銹革菌子實體中分離得到8個已知化合物，分別為：

(1)grifolic acid；

(2)4-(2'，5'-dihydroxyphenyl)-(E)-3-buten-2-one；

(3)反式-1-(4'-羥基苯基)-丁-1-烯-3-酮；

(4)原兒茶醛；

(5)對羥基苯甲醛；

(6)亞油酸；

(7)麥角甾-5，7，22-三烯-3β 醇；

(8)過氧麥角甾醇.

所有化合物均是首次從該菌中分離得到，為開發(fā)利用高等真菌資源提供科學(xué)依據(jù).

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