劉 園，張華峰，宋 青，戴 博

(空軍總醫(yī)院，北京 100142)

甲癬涂劑是由水楊酸、冰醋酸、碘、碘化鉀等成分混合制成的涂劑，為紅棕色澄明液體，有冰醋酸特臭［1］;具有溶解角質(zhì)、抑制真菌的作用，用于手、足甲癬治療［2］;收載于《中國人民解放軍醫(yī)療機構制劑規(guī)范》2003版中(下簡稱《軍規(guī)》)。原處方中冰醋酸與乙醇儲存過程中會生成乙酸乙酯［3－4］，有效期僅為7 d，不適合商品化。本試驗改進了制備工藝，修改了原《軍規(guī)》中處方，通過對其穩(wěn)定性的測定，得到滿意的結果。并且為了更好的控制該制劑的質(zhì)量，在原有的方法基礎上加以修訂，修訂了H+總量、碘和碘化鉀的含量測定方法，終點顏色反應靈敏，方法準確，結果穩(wěn)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 電子分析天平(Sartorius，型號:BS 110S);25 mL、50 mL滴定管;移液管(1 mL);三角瓶(25 mL)(北京玻璃儀器廠)。

1.2 試藥 冰醋酸(國藥集團化學試劑有限公司，批號10000218);苯二甲酸氫鉀(基準試劑);二甲基亞砜為色譜純;甲醇為色譜純;鄰氫氧化鈉為分析純;硫代硫酸鈉為分析純;水為重蒸水，其余試劑均為分析純。甲癬涂劑樣品(批號:20130801、20130802、20130803，空軍總醫(yī)院提供)。其余原料均由空軍總醫(yī)院提供。

2 方法與結果

2.1 甲癬涂劑的制備和穩(wěn)定性考察

2.1.1 甲癬涂劑的制備 取水楊酸50 g溶于250 mL二甲基亞砜后，加300 mL冰醋酸混勻;另取27 g碘化鉀溶于適量水中，加碘使其溶解，再與前液混合后，加水使成1 000 mL，攪勻，即得。

2.1.2 甲癬涂劑的穩(wěn)定性考察 將“2.1.1”項處方工藝制備的三批樣品(01、02、03)放置于(25±2)℃，相對濕度(60±10)%的環(huán)境中保存［5］，并定期于放置1、3、6、10 d后分別取樣檢測，考察樣品的外觀及含量變化。“2.1.1”項下的制備的甲癬涂劑短期內(nèi)穩(wěn)定性良好，后續(xù)穩(wěn)定性可做長期試驗驗證。穩(wěn)定性結果見表1。

表1 穩(wěn)定性試驗結果

2.2 H+總量的含量測定

2.2.1 測定方法 精密量取本品2 mL，加新沸過的冷水20 mL，逐滴滴入5%的硫化鈉溶液，振搖，使溶液的棕紅色逐步退去，直至顯微黃色，加酚酞［6］指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液(0.5 mol·L－1)滴定至粉紅色。每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.5 mol·L－1)相當于 0.503 95 mg的 H+總量。

2.2.2 精密度試驗 取同一批樣品，按照修訂后的方法進行含量測定，結果表明該方法的精密度良好，見表2。

2.2.3 重現(xiàn)性試驗 取本品，3個不同操作者分別按照修訂后的方法進行含量測定，計算3個不同操作者測定的H+總量的含量變化。3個不同操作者測得的H+總量平均含量均小于2%。結果表明該方法的重現(xiàn)性良好。

表2 H+總量精密度測定結果

2.2.4 回收率試驗 按照甲癬涂劑處方量的要求，分別加入處方量80%、100%、120%的水楊酸和冰醋酸，其他物質(zhì)的加入量不變，最后用水補足至處方量。按上述修訂方法測定，記錄氫氧化鈉滴定液的用量，平行測定3次，計算平均回收率。結果表明該方法的回收率良好，見表3。

2.2.5 修訂后方法與《軍規(guī)》方法比較 分別使用修訂后方法和《軍規(guī)》方法測定3批樣品，每個樣品平均測定3次。結果表明，修訂后的方法先采用硫化鈉溶液還原碘單質(zhì)，再以酚酞作指示劑，氫氧化鈉滴定液滴定，不僅使終點判定更靈敏，且測定結果與理論含量接近，保證了測定結果的準確性和可靠性。見表4。

表4 兩種方法三批樣品H+總量的含量測定結果的比較

2.3 碘和碘化鉀的含量測定

2.3.1 測定方法 精密量取本品5 mL，至碘量瓶中，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1 mol·L－1)滴定至近中點時，加淀粉指示液1 mL，繼續(xù)滴定至溶液藍色消失，即得。每1 mL硫代硫酸鈉滴定液(0.1 mol·L－1)相當于 12.69 mg的碘。

取上述滴定碘［7－8］含量后的溶液加曙紅鈉指示液3滴，用硝酸銀滴定液滴定，至沉淀由黃色轉(zhuǎn)變?yōu)槊倒寮t色;將消耗的硝酸銀滴定液(0.1 mol·L－1)的毫升數(shù)減去碘消耗的硫代硫酸鈉滴定液(0.1 mol·L－1)的毫升數(shù)。每1 mL的硝酸銀滴定液(0.1 mol·L－1)相當于16.60 mg 的碘化鉀。

2.3.2 精密度試驗 取同一批樣品，按照修訂后的方法進行含量測定，結果表明該方法的精密度良好，見表 5，6。

表5 碘的精密度測定結果

表6 碘化鉀精密度測定結果

2.3.3 重現(xiàn)性試驗 取本品，3個不同操作者分別按照修訂后的方法進行含量測定，計算3個不同操作者測定的碘和碘化鉀的含量變化。3個不同操作者測得的碘和碘化鉀平均含量均小于2%。結果表明該方法的重現(xiàn)性良好。

2.3.4 回收率試驗 按照甲癬涂劑處方量的要求，分別加入處方量80%、100%、120%的碘和碘化鉀。按上述修訂方法測定，平行測定3次，計算平均回收率。結果表明該方法的回收率良好，見表7，8。

2.3.5 樣品含量測定結果 取本品三批樣品，用修訂的含量測定方法與原方法比較，結果見表9。

表7 碘的回收率結果

表9 三批樣品中碘和碘化鉀的含量測定結果

3 討論

3.1 H+總量 國家藥品標準技術規(guī)范規(guī)定，定量分析［9］在含量測定中應用指導原則要求供試品的取用量應滿足精度要求，一般消耗滴定液約20 mL?！盾娨?guī)》中供試品的取用量為1 mL，用0.1 mol·L－1氫氧化鈉滴定液滴定理論上應消耗在60 mL左右，與國家藥品標準要求不一致。本研究根據(jù)樣品取量和滴定劑的濃度計算，將原標準中取樣由1 mL增加到2 mL，同時將氫氧化鈉滴定液的濃度由原標準的 0.1 mol·L－1增加到 0.5 mol·L－1，理論上氫氧化鈉滴定液應消耗在20 mL，因此甲癬涂劑的取樣量和氫氧化鈉滴定液的消耗量都滿足國家藥品標準要求。

《軍規(guī)》中測定H+總量時對樣品未加任何處理，采用酚酞作指示劑，氫氧化鈉滴定液直接滴定。因為甲癬涂劑中含大量的碘單質(zhì)，溶液為紅棕色，溶液中的碘單質(zhì)不僅影響滴定終點的判斷，而且消耗氫氧化鈉滴定液使測定結果偏高。因此本研究修訂了H+總量的測定方法，先用硫化鈉溶液還原碘單質(zhì)，再以酚酞作指示劑，氫氧化鈉滴定液滴定。

每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.1 mol·L－1)應該相當于 0.100 79 mg 的 H+總量［10］，而不是 1.007 9 mg的H+總量，原標準中書寫錯誤。因此，每1 mL氫氧化鈉滴定液(0.5 mol·L－1)應相當于 0.503 95 mg H+總量。

3.2 碘和碘化鉀 測定碘和碘化鉀量時，將原標準中取樣量2 mL增加到5 mL，增加了滴定液的消耗量，滿足精度要求。

3.3 制備工藝 冰醋酸為甲癬涂劑中有效成分之一，原《軍規(guī)》中的家甲癬涂劑中溶解水楊酸的是乙醇和丙酮，有文獻報道［11］甲癬涂劑中的冰醋酸與乙醇在儲存過程中形成乙酸乙酯，導致藥效降低，有效期僅為4 d;且碘和丙酮［12－13］這兩種成分能使H+總量下降速度加快，并且碘是一種氧化劑，在甲癬涂劑中可能對酯化反應有一定的催化作用，丙酮具有羰基，可與水分子的氫形成氫鍵，同時又可與水發(fā)生加成反應而減少環(huán)境中的水量，從而能促使反應向酯化反應方向進行。本研究通過工藝改進，將乙醇和丙酮去掉，用二甲基亞砜［14－16］作為溶劑，保證了制劑的穩(wěn)定性。冰醋酸的測定方法一般為酸堿滴定法，乙酸乙酯的測定方法為氣相色譜法，后續(xù)實驗中考慮用氣相色譜法對甲癬涂劑在儲存過程中冰醋酸及乙酸乙酯的含量同時進行測定，進而分析其穩(wěn)定性。由于處方中含有乙醇和丙酮，有機溶劑不能單獨將其萃取出來，因此不能利用酸堿滴定法測定冰醋酸的含量;此外，也不能測定乙酸乙酯的含量。因此根據(jù)冰醋酸和乙酸乙酯本身的性質(zhì)，建議用GC法測定甲癬涂劑中冰醋酸及儲存過程中可能產(chǎn)生的乙酸乙酯的含量。進行甲癬涂劑的穩(wěn)定性試驗條件:考察在室溫(25±2)℃，相對濕度(60±10)%放置10 d內(nèi)冰醋酸和乙酸乙酯的含量情況。

3.4 甲癬涂劑 性狀為為紅棕色澄明液體，有冰醋酸特臭;作用與用途:具有溶解角質(zhì)、抑制真菌的作用，用于手、足甲癬治療;用法與用量:外用，刮薄病甲板后，涂于患處;貯藏:置于非金屬容器內(nèi)，密封，在陰暗處保存。水楊酸與碘能結合成不溶物，故配制時不宜用碘溶液直接溶解水楊酸。本品忌與金屬器皿接觸，以免變色。本品腐蝕性強，應用時只涂病甲，注意不要涂在周圍健康皮膚組織上。

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